以凝血功能异常为首发表现的朗格汉斯细胞肉瘤1例

朗格汉斯细胞肉瘤（LCS）是一种较少见的恶性肿瘤，且预后较差，现通过回顾性分析我院收治的1例以凝血功能异常为首发表现的LCS患者的临床资料，并复习相关文献，以提高对LCS的认知。     

CD4-CD8-TCRγδ+T细胞大颗粒淋巴细胞白血病合并纯红细胞再生障碍性贫血1例并文献复习

本文回顾性分析2021年3月山东大学附属威海市立医院收治的1例CD4-CD8-TCRγδ+ T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-cell large granular lymphocyte leukemia, T-LGLL)合并纯红细胞再生障碍性贫血(Pure red cell aplasia, PRCA)患者的临床资料, 并复习相关文献, 以提高对CD4-CD8-TCRγδ+ T-LGLL合并PRCA的认知, 从而减少临床中的误诊及漏诊。     

利用SOE-PCR技术构建eglAp-rhIL-12融合基因的条件优化

目的利用SOE-PCR技术连接丙酮丁醇梭菌内源性β1,4-葡聚糖酶启动子和信号肽(eglAp)与重组人白细胞介素12(rhIL-12)序列,构建融合基因eglAp-rhIL-12;优化SOE-PCR反应中的主要条件,获得具有可重复性的SOE-PCR方法。方法通过PCR得到eglAp的3′端和rhIL-12的5′端重叠的两个基因序列;通过调整SOE-PCR体系中模板eglAp和rhIL-12的量及比例,得到目的产物;通过调整退火温度及引物量提高扩增产物特异性。结果当SOE-PCR满足以下条件时即可获得高纯度高丰度目的产物:25μL PCR反应体系中,eglAp和rhIL-12的两个模板量分别为5～10ng,摩尔比为5∶1(质量比1∶1);在不加引物的情况下,退火温度设定为71℃,扩增3个循环,然后加入0.4μL引物(10μmol/L),退火温度设定为61.3℃,扩增28个循环。结论 SOE-PCR成功的关键在于调整好模板的比例和浓度,即质量比1∶1,模板量不要少于5ng(25μL PCR体系);若要获得高纯度高丰度的连接产物,则需要适当提高退火温度和减少引物量。     

重组HER2真核表达载体的构建及其稳定转染EMT6细胞株的筛选

目的:构建人表皮生长因子受体(HER2)胞外区(1 896 bp)基因的真核表达质粒(pcDNA6/v5-his-HER2),转染小鼠乳腺癌细胞(EMT6),获得其稳定表达细胞株(EMT6/ HER2).方法:用PCR方法从含HER2全长基因的pcDNA3.1-HER2质粒上扩增HER2胞外区基因序列;经酶切、连接构建pcDNA6/v5-his-HER2;转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,对其进行酶切及测序鉴定;以PEI法将pcDNA6/v5-his-HER2导入EMT6小鼠乳腺癌细胞,经杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选1～2周,获得抗性克隆EMT6/HER2;用RT-PCR检测EMT6/HER2中HER2 mRNA,免疫组化法检测其HER2蛋白的表达.结果:PCR产物与预期片段大小一致;pcDNA6/v5-his-HER2经酶切、琼脂糖凝胶电泳后,可见与PCR产物大小相同的片段;DNA测序结果显示,pcDNA6/v5-his-HER2 中HER2 基因序列无误,读码框正确;用RT-PCR可在EMT6/HER2中检测到HER2 mRNA,免疫组化法证实,EMT6/HER2中有HER2的阳性信号.结论:成功地构建了HER2胞外区真核表达载体,获得稳定表达HER2基因的小鼠乳腺癌EMT6细胞株,为进一步研究HER2基因过表达与乳腺癌发生的关系及其基因治疗奠定基础.     

甘肃地区碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌产NDM-1型碳青霉烯酶情况分析

目的调查研究甘肃地区产NDM-1型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌现状,为临床感染防控提供依据。方法收集甘肃地区8家医院2015年至2016年临床分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌65株,采用Vitek 2 Compact细菌鉴定仪鉴定到种,K-B纸片扩散法进行药敏试验,E-test法检测碳青霉烯类药物最低抑菌浓度(MIC)值,采用改良Hodge、E-test法测金属酶和改良碳青霉烯类灭活试验(mCIM)筛选bla_(NDM-1)基因耐药表型,PCR特异性扩增bla_(NDM-1)基因,并对扩增产物进行测序和BLAST比对分析。结果 65株实验菌株中有39株在280 bp处扩增出bla_(NDM-1)基因目的条带,经测序和阳性结果比对证实为bla_(NDM-1)基因,其阳性率为60%;65株实验菌改良Hodge、E-test金属酶和m CIM试验阳性率分别为75.38%、70.77%、98.46%;39株bla_(NDM-1)基因阳性肠杆菌科细菌改良Hodge、E-test金属酶和mCIM试验阳性率分别为74.36%、100%、100%。结论甘肃地区肠杆菌科细菌bla_(NDM-1)基因检出率较高,医院应加强防控。     

伴单克隆B淋巴细胞和单克隆浆细胞增殖的AITL 1例

血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma, AITL)是一种预后较差的侵袭性淋巴瘤。本文报道1例伴单克隆B淋巴细胞和单克隆浆细胞增殖AITL患者的诊疗经过, 以提高对AITL的认识及诊疗水平, 从而减少漏诊和误诊。     

某三甲医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药性和耐消毒剂基因分析

目的 了解耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)临床分离菌株的耐药特征,检测分析耐消毒剂基因携带情况。方法 收集兰州大学第一医院2021年1-12月临床送检的住院患者包括痰、血及胸腹水等各类标本,共获得不重复菌株210株,进行菌株鉴定及药敏试验;聚合酶链反应(PCR)方法检测耐消毒剂基因携带情况。结果 210株CRE菌株主要为肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌,分别占64.29%(135/210)和22.86%(48/210);科室分布主要为重症监护病房46.67%(98/210);标本来源主要为痰49.52%(104/210)、血液12.86%(27/210)、分泌物9.52%(20/210);210株CRE菌株耐药率最低的抗菌药物是阿米卡星(49.52%);对庆大霉素、四环素、左氧氟沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、氨曲南和厄他培南的耐药率分别为67.62%、72.38%、83.33%、75.71%、84.76%和98.10%,对其余抗菌药物的耐药率均高达100.00%。210株临床分离的CRE均未检出qacA、qacC、qacJ基因,检出qacB、qacG、qacH、qacE、qacE△1和qacE...     

急性未分化白血病2例临床分析并文献复习

目的探讨急性未分化白血病(AUL)的临床特点、诊断与治疗方法, 并进行相关文献复习。方法选择2020年8月24日、2021年7月20日威海市立医院收治的2例AUL患者为研究对象。根据2例患者入院时间, 将其依次编号为患者1、2。患者1～2均为男性, 年龄分别为62、76岁。采用回顾性分析方法, 收集其临床病例资料, 包括临床特征及外周血常规、生化、凝血、骨髓细胞形态学、骨髓细胞免疫分型检查结果, 诊断、治疗及预后。根据患者1～2临床症状及实验室检查结果, 对其进行诊断及治疗。对患者1～2的随访分别截至2020年10月31日与2021年9月30日。本研究以"急性未分化白血病""系列不明急性白血病""急性髓细胞白血病""急性髓细胞白血病微分化型""acute undifferentiated leukemia""acute leukemia of ambiguous lineage""acute myeloid leukemia""acute myeloid leukemia with minimal differentiation""AUL""ALAL""AML"为中、英文关键词, 检索...     

eglA P-Her2/neu-IL-12融合基因穿梭载体的构建

目的:构建重组厌氧芽胞梭菌saccharobutylicum内源性β-1,4葡聚糖酶启动子(eglA p人)-表皮生长因子受体2胞外区(hHer2/neu ECD人)-白细胞介素12(rhIL-12)融合基因穿梭表达载体(pIMP1 eglA p-hHer2/neu ECD-rhIL-12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu-rhIL-12融合基因修饰的厌氧芽胞梭菌,并探讨其对Her2/neu+实体肿瘤的基因治疗作用奠定基础。方法:以含有全长hHer2/neu序列的真核表达质粒(pcDNA3.1 hHer2/neu)为模板,采用PCR方法,扩增hHer2/neu ECD基因片段;将其插入重组rhIL-12真核表达质粒pcD-NA6 rhIL-12(p1)中的rhIL-12基因上游,获得pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL-12(p2)真核表达质粒;设计合成eglAp基因中一段55 bp序列作为模板,通过连续PCR的方法,扩增eglAp片段(335 bp),并构建T-eglA p(p3)亚克隆质粒;通过酶切连接的方法,将eglA p片段插入p2质粒中的hHer2/neu ECD基因上游,...     

干扰素调节因子在炎症性疾病中的作用

干扰素调节因子(IRF)家族是能对干扰素的基因表达进行调控的一类转录因子,参与炎症反应、细胞周期和细胞凋亡等生物学过程.IRF4作为一种转录因子,通过影响淋巴细胞的分化及其分泌,干扰素转录调控,病原体免疫反应,细胞因子信号转导,细胞增殖调控,自稳平衡,先天性免疫调控和适应性免疫调控等方面来参与炎症的病理生理过程,成为新...