新型冠状病毒肺炎疫情下神经外科实施急诊手术的思考与建议

目前新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)疫情严重。作为一个新发传染性强的呼吸道感染疾病,控制传染源、切断传播途径、保护易感人群是战"疫"要遵从的三大原则。在此疫情之下,神经外科医生应掌握COVID-19的临床表现和流行病学特点,尤其是针对COVID-19合并神经外科急诊患者,避免误诊漏诊,是当前的重中之重。为疑似或确诊的COVID-19患者实施急诊神经外科手术时,必须严格遵照卫生行政主管部门或所在医疗机构的相关防护规定,密切协调手术各方,所有人员均应做好三级防护,手术必须在负压手术间进行。对于不具备上述医疗条件的单位,宜尽快将需要急诊手术的COVID-19患者转诊至有条件的医疗单位。     

转基因神经干细胞移植对脑外伤大鼠的保护作用

目的探讨移植转染pDsVEGF165Red1—N1质粒的神经干细胞能否促进脑外伤大鼠神经功能的恢复。方法利用阳离子脂质体转染大鼠神经干细胞，在脑立体定向仪引导下分别将PBS（A组）、神经干细胞（B组）、转基因神经干细胞（C组）移植到脑外伤大鼠局部损伤灶边缘，通过NSS评分评价移植后大鼠神经功能的变化。结果转基因细胞移植后可以在一定时间内表达VEGF165，C组大鼠NSS评分从移植后第3天开始明显低于A组（P＜0．05），而B组大鼠NSS评分则从移植后第7天开始明显低于A组（P＜0．05）。结论转基因神经干细胞移植后可以分泌VEGF165促进脑外伤大鼠神经功能的恢复。     

超声辐照载腺病毒靶向微泡增强报告基因在小鼠颅内胶质瘤中的转染效果

目的探讨低频聚焦超声辐照携载腺病毒靶向微泡增强基因转染颅内胶质瘤的效果。方法原位接种U251胶质瘤细胞制备小鼠颅内胶质瘤模型25只;制备可以携载腺病毒载体和偶联RGD肽的脂质体微泡,并检测其性状。筛选颅内胶质瘤直径3.0～4.0 mm的小鼠分为3组,Ⅰ组注射未携带腺病毒的非靶向微泡(对照组),Ⅱ组注射载腺病毒的非靶向微泡,Ⅲ组注射载腺病毒的靶向微泡,各组注射微泡后均接受超声辐照,频率1 MHz,强度0.7 W/cm~2,时间5 min;使用小动物活体荧光成像系统观察各组小鼠颅内荧光强度。结果制备的脂质体微泡直径为1.10～1.20μm,平均浓度(7.8±0.43)×10~8/ml,其可携带腺病毒,还可偶联RGD肽。MRI筛选颅内肿瘤直径3.0～4.0 mm的荷瘤小鼠15只,分为3组(每组5只),小动物活体荧光成像显示,与Ⅰ组和Ⅱ组比较,Ⅲ组小鼠颅内荧光强度显著增强(均P0.01)。结论静脉注射偶联RGD肽的载腺病毒靶向微泡可以将携载的目的基因有效地转染至颅内胶质瘤,为胶质瘤的基因治疗提供了一种新思路。     

携带IRES的hBDNF绿色荧光蛋白表达载体的构建和鉴定

目的构建表达人脑源性神经生长因子(hBDNF)基因的真核细胞表达载体,并且观察重组质粒在真核细胞中的表达情况。方法采用PCR方法从健康人基因组中扩增出该基因,将hBDNF的PCR产物用XhoⅠ和SalⅠ双酶切后克隆到用XhoⅠ和SalⅠ双酶切的带有EGFP和内部核糖体转入位点(IRES)的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中。对重组质粒进行双酶切和质粒测序鉴定后,采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将重组的质粒转染至真核细胞中,用RT-PCR和荧光显微镜检测基因在细胞中表达的情况。结果双酶切和质粒测序结果证明hBDNF已正确地克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,质粒能在细胞中正常表达。结论成功构建了EGFP/hBDNF表达载体,为应用hBDNF治疗中枢神经系统疾病奠定坚实的基础。     

结合网络资源的PBL教学模式指导科研思维能力培养的探索

PBL(problem-based learning)教学模式是一种新的教学模式,有别于传统临床教学模式,其强调的是以学生主动学习为主,提倡以问题为基础的讨论式教学和启发式教学,有利于培养医学生良好的科研思维能力[1-2].随着网络在社会和校园内的不断普及和深入发展,网络资源将会为PBL教学模式提供学生获取知识、整合知识的平台,以及教师-学生间的提问、解答的互动平台[3].因此,两者有机的结合将成为培养科研思维能力不可或缺的手段.     

胚胎干细胞及其在神经疾病治疗中的应用

目前对如何维持胚胎干细胞的多潜能未分化状态及如何定向诱导胚胎干细胞向神经细胞分化已取得巨大进步，移植实验也证明由胚胎干细胞分化的神经细胞可以作为细胞移植的理想来源，尤其是随着人类胚胎干细胞建系的成功和核转移技术的进一步发展，胚胎干细胞在临床的应用必将给传统的治疗方法带来一场革命性变化。     

经尾静脉移植神经干细胞对脑外伤大鼠的保护作用

目的探讨经尾静脉移植神经干细胞能否对脑外伤大鼠产生保护作用及其可能的机制。方法制备脑外伤大鼠模型后随机分为A组和B组,各10只,分别经尾静脉移植PBS和Brdu标记的神经干细胞悬液,应用免疫组织化学方法检测移植细胞在体内的分布及迁移,通过TUNEL法检测A组和B组局部损伤组织中神经细胞凋亡的数量,并应用RT-PCR方法分析A组和B组局部损伤组织中神经营养因子表达情况。结果①B组大鼠局部损伤组织内可见Brdu+细胞,并可观察到向脑实质内迁移的Brdu+细胞;②B组与A组相比局部损伤组织中凋亡细胞明显减少(P<0·05),A组为每高倍镜视野(20·31±2·55)个凋亡细胞,B组为每高倍镜视野(35·41±3·15)个凋亡细胞;③B组与A组相比局部损伤组织中神经营养因子的表达明显增高(P<0·05)。结论经尾静脉移植的神经干细胞可以到达损伤部位,并可以通过上调局部组织内神经营养因子的表达发挥保护作用。     

BFGF、EGF联合应用对新生大鼠海马神干细胞分化的影响

目的:探讨EGF和bFGF联合应用后对新生大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响。方法:联合应用EGF和bFGF培养海马神经干细胞及诱导贴壁的细胞分化,并用免疫细胞化学技术研究神经干细胞的分化情况。结果:bFGF和EGF联合应用可以明显扩增海马神经干细胞,并诱导细胞向神经元和星形胶质细胞分化。结论:bFGF和EGF除了具有促神经干细胞有丝分裂作用外,还可以诱导神经干细胞向神经元和星形胶质细胞分化。     

不同方法治疗高血压脑出血的效果分析

目的探讨不同方法治疗高血压脑出血(HICH)的临床效果。方法 2005年4月至2011年4月收治幕上HICH(出血量20~100 ml)患者214例,根据血肿量及治疗方法不同进行分组;将84例小血肿(20~30 ml)患者分为钻孔引流组(n=36)和保守治疗组(n=48),57例中等血肿(31~60 ml)患者分为钻孔引流组(n=31)和开颅手术组(n=26),73例大血肿(61~100 ml)患者分为钻孔引流组(n=37)和开颅手术组(n=36)。对比分析各组住院期间并发症发生率、再出血率和治疗后3周和6个月GCS、GOS、日常生活能力Barthel指数(BI)和死亡率等。结果钻孔引流组并发症发生率、再出血率和死亡率与其相对应的对照组比较均无明显差异(P>0.05);钻孔引流术均能显著提高小和中等血肿患者近期(治疗后3周)神经功能改善率、BI和GOS评分及远期(治疗后6月)的BI和GOS(P<0.05),而对大血肿患者预后改善不明显(P>0.05)。结论钻孔引流术有助于小、中等血肿的HICH患者早期神经功能改善,促进其恢复,改善其预后;但是对大血肿患者伴脑疝形成或病情进展迅速、再出血明显者,建议首选以降低颅内压为目的开颅血肿清除+去骨瓣减压术。