神经外科重症监护病房常见病原菌的分布与耐药性研究

目的调查珠江医院神经外科重症监护病房(ICU)病原菌的分布与耐药情况,分析ICU院内感染的发生原因,探讨防治对策。方法应用法国VITEKⅡ全自动细菌鉴定仪鉴定病原菌,用纸片扩散法检测药敏结果。结果神经外科ICU菌群主要以革兰阴性杆菌(71.6%)为主,鲍曼不动杆菌占16.7%,大肠埃希菌占15.7%,铜绿假单胞菌占13.7%,肺炎克雷伯菌占13.7%等。但葡萄球菌、粪肠球菌等阳性球菌(28.4%)也有增加的趋势。亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦仍保持最高抗菌活性,细菌的耐药率分别为15.3%和30.6%。结论我院神经外科ICU感染主要病原菌是革兰阴性杆菌,对常用抗菌药物耐药性较高,但革兰阳性球菌所占比例呈增高趋势。控制第二、三代头孢菌素以及制酸剂(质子泵抑制剂)的预防性用药,减少耐药菌株的产生,有针对性地使用抗生素是控制危重病人感染的有效措施。     

星形胶质细胞水通道4表达变化与胶质瘤性脑水肿的关系

目的 研究脑胶质瘤细胞对体外血脑屏障模型水转运及星形胶质细胞水通道4的影响。方法 利用重水的荧光特性及高效液相系统检测体外血脑屏障模型对水转运的变化。采用半定量RT-PCR的方法分析胶质瘤细胞作用后星形胶质细胞水通道4的表达变化。结果 胶质瘤细胞可以明显增强体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面至基底面的扩散。这一过程不依赖于白蛋白等大分子物质的通透性变化。同时，胶质瘤细胞明显降低了胶质细胞水通道4的表达水平。结论 胶质瘤细胞可以明显增强体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面向基底面的扩散。胶质瘤性脑水肿不一定是血浆中大分子物质通透性增加的结果。胶质瘤细胞对胶质细胞水通道4的影响可能是胶质瘤性脑水肿产生的分子机制之一。     

水通道1在胶质瘤性脑水肿发生中的意义

胶质瘤性脑水肿所导致的颅内压升高是造成胶质瘤患者预后不良的重要原因。为了探讨这一问题,我们进行以下研究。 一、材料与方法 1.星形胶质细胞的体外培养与细胞系:取10只新生1～2 d的SD大鼠,参照McCarthy等的方法,进行体外培养。实验全部采用2～3代胶质细胞。ECV304人脐静脉内皮细胞系由ECACC提供,培养条件同星形胶质细胞。U251人胶质瘤细胞由本实验室保存,培养条件同前。     

IL-6促进骨髓源性神经干细胞增殖的实验研究

目的研究白细胞介素6(IL-6)及其受体对体外培养的大鼠骨髓源性神经干细胞增殖的影响及信号转导机制。方法采用密度梯度离心法分离骨髓基质细胞,应用特制的神经干细胞培养基诱导培养6d后收集贴壁细胞传代培养,用AlamarBlue摄入法检测不同浓度的IL-6及IL-6受体对大鼠骨髓源性神经干细胞增殖的影响,Westernblot方法检测不同剂量IL-6对干细胞中STAT3表达的影响。结果IL-6能够促进干细胞的增殖,随着药物剂量的增加,增殖作用明显增加,呈明显剂量依赖性,其中20、100、200ng/mL组均与对照组有显著差异(P<0.01),但2ng/mL与对照组、100ng/mL与200ng/mL组之间无显著差异(P>0.05),20ng/mL与100ng/mL组之间有差异(P<0.05)。IL-6受体可抑制干细胞的增殖,单独应用IL-6受体,100ng/mL、200ng/mL组与对照组均有显著差异(P<0.05)。而IL-6与IL-6受体联合应用可促进干细胞的增殖,但增殖作用比单独应用IL-6组差,两组相比有显著性差异(P<0.05)。随IL-6浓度的增加,干细胞中的STAT3表达增加,20、100、200ng/mL组与对照组相差显著(P<0.01)。结论100ng/mL组的IL-6对骨髓源性神经干细胞有较好的增殖促进作用;IL-6受体可抑制骨髓源性神经干细胞增殖;联合应用IL-6和IL-6受体增殖效果不如单独应用IL-6,提示骨髓源性神经干细胞表面自身具有IL-6受体;IL-6通过增加STAT3表达促进骨髓源性神经干细胞增殖。     

神经内科住院病人医院感染分析

目的对神经内科住院患者医院感染发生情况及病原菌流行病学进行调查分析,提出医院感染控制措施。方法调查自2004年9月至2006年9月我院神经内科193例住院患者医院感染发生情况,分析所分离出病原菌的分布及耐药情况。结果医院感染发生率6.87%,其中肺部感染发生率59.65%。分离出的病原菌以革兰阴性菌为主(67.36%),其次为革兰阳性菌(26.94%)和真菌(5.70%)。革兰阴性菌以铜绿假单胞菌居首位,且呈多重耐药。结论神经内科医院感染发生率较其他科高,医院感染病原菌复杂且对抗菌药物呈多重耐药。应合理选用抗菌药物,医护人员要严格无菌技术操作和消毒隔离管理,预防交叉感染。     

高温对血脑屏障内皮细胞紧密连接的作用及其机制

目的　探讨高温对血脑屏障内皮细胞间紧密连接的影响及其分子机制。　方法　利用内皮细胞与胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型。采用Millicell-ERS系统检测血脑屏障模型的跨内皮阻抗 (transendothelialresistance,TER)。对内皮细胞间紧密连接采用银染的方法研究其结构的完整性。运用半定量逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)及Westernblotting的方法分析高温作用后血脑屏障内皮细胞紧密连接蛋白 (zonulaoccluden 1,ZO - 1)与occludin的表达变化。　结果　 4 3℃高温作用 2h后 ,体外血脑屏障模型TER均值由 (32 1.30± 5 8.5 9)Ω·cm2 下降至 (6 5 .6 7± 6 .0 2 )Ω·cm2 。同时 ,内皮细胞紧密连接完整性明显破坏 ,内皮细胞ZO - 1及occludin的表达水平明显降低。　结论　高温可以明显破坏血脑屏障内皮细胞间紧密连接的完整性 ,高温条件下内皮细胞ZO - 1与occludin表达水平的降低是血脑屏障热损伤的重要分子机制。     

神经外科重症监护室铜绿假单胞菌基因分型和耐药性研究

目的 建立随机扩增多态性DNA（RAPD）基因分型方法监测神经外科重症监护室（ICU）铜绿假单胞菌（PA）医院感染并进行耐药性分析。方法 收集自2004年至2005年ICU内分离出的75株PA，提取DNA后进行RAPD分型，同时进行抗生素敏感性实验。结果 75株PA共得14型，其中有3株属于同一种类型；抗生素敏感性实验表明PA对氨基糖苷类和环丙沙星等耐药率呈明显上升趋势，75株均为对亚胺培南／西司他丁，头孢哌酮／舒巴坦等少数几种敏感的多重耐药株。结论 ICU内存在PA感染爆发流行；了解PA的耐药现状，有利于为临床合理用药提供依据。     

胶质细胞诱导内皮细胞系血脑屏障特点的实验研究

目的探索胶质细胞在血脑屏障形成中的重要意义,建立一套可靠、简便的血脑屏障体外研究方法。方法采用内皮细胞系ECV304与星形胶质细胞体外接触共培养的方法,探索星形胶质细胞对内皮细胞系多种血脑屏障特点的诱导作用。结果星形胶质细胞可以诱导内皮细胞系形成紧密连接并产生较高的跨内皮阻抗(transendothelial electricalresistance, TER),同时,内皮细胞系的血脑屏障特征酶γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase, γ-GT)与碱性磷酸酶(alkaline phosphatase , ALP)活性明显增强。结论星形胶质细胞可以诱导ECV304细胞产生紧密连接等血脑屏障特点,ECV304细胞与星形胶质细胞的体外共培养可以作为研究血脑屏障结构与功能的一种可靠而简便的体外实验方法。     

星形胶质细胞水通道4表达变化与胶质瘤性脑水肿的关系

目的研究脑胶质瘤细胞对体外血脑屏障模型水转运及星形胶质细胞水通道4的影响。方法利用重水的荧光特性及高效液相系统检测体外血脑屏障模型对水转运的变化。采用半定量RT-PCR的方法分析胶质瘤细胞作用后星形胶质细胞水通道4的表达变化。结果胶质瘤细胞可以明显增强体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面至基底面的扩散。这一过程不依赖于白蛋白等大分子物质的通透性变化。同时,胶质瘤细胞明显降低了胶质细胞水通道4的表达水平。结论胶质瘤细胞可以明显增强体外血脑屏障模型对水由内皮细胞腔面向基底面的扩散。胶质瘤性脑水肿不一定是血浆中大分子物质通透性增加的结果。胶质瘤细胞对胶质细胞水通道4的影响可能是胶质瘤性脑水肿产生的分子机制之一。     

光动力疗法对人脑胶质瘤细胞存活率影响的实验研究

目的：探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力(ALA—PDT)对人脑胶质瘤细胞U251的治疗作用。方法：实验于2003—01／2004—05在解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所完成。将不同浓度的5-ALA加入到细胞培养基中。随之以激光辐照；固定浓度的5-ALA给予不同剂量的激光辐射。MTT法测定细胞存活率。结果：激光能量恒定于25．0J／cm^2时，ALA-PDT对U251细胞的杀伤力在较低5-ALA浓度范围内，随着5-ALA的浓度的增高而增强。各组与对照组间相比较，差异均有显著性意义(F=770．12，P=0．0000)。在较高5-ALA浓度范围内，则存在着饱和现象；相同的5-ALA浓度下，细胞生存率随着激光能量的增加而下降。单用5-ALA或激光处理，均不对细胞造成显著杀伤。结论：5-ALA本身对细胞无明显毒性作用，其介导的PDT是很有前途的胶质瘤治疗方法。