RN181过表达影响SMMC7721肝癌细胞凋亡的初步研究

目的构建过表达RN181基因的SMMC7721重组细胞株,研究RN181对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其凋亡机制。方法构建高表达RN181逆转录病毒感染SMMC7721细胞,显微镜观察其细胞株荧光强弱,Western blot鉴定RN181蛋白表达水平;采用DAPI染色法、Western blot检测RN181对顺铂诱导SMMC7721细胞株凋亡的变化情况。结果重组细胞株荧光表达良好,7721RN181细胞中RN181蛋白表达量高于其对照,差异有统计学意义(P0.05)。DAPI染色法观察到在顺铂作用下,7721RN181的细胞凋亡阳性率高于其对照,差异有统计学意义(P0.05);Western blot检测到7721RN181的activated caspase-3、cleaved PARP的表达量高于对照组,procaspase-6,pro-caspase-8的表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 RN181表达能促进肝癌细胞的凋亡,其可能通过参与死亡受体凋亡途径来促进肝癌细胞凋亡。进而推测RN181基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点。     

氨甲环酸联合1064nm调Q激光治疗黄褐斑有效性及安全性分析

目的 评价氨甲环酸联合1064nm调Q激光治疗黄褐斑的临床疗效及安全性.方法 将92例黄褐斑患者分为2组,治疗组48例,对照组44例,治疗组予氨甲环酸联合1064nm调Q激光治疗,对照组予氨甲环酸治疗,治疗结束后评价疗效并观察不良反应.结果 治疗组患者治疗4次后,治愈7例(14.58％),显效18例(37.5％),好转...     

尿液分析仪法与显微镜形态学法在尿液隐血检验中的对比分析

目的:探讨尿液分析仪隐血检验与显微镜红细胞计数检验方法在尿液隐血检验中的效果。方法:选取2013年1月~2月我院检验科收取的门诊检查尿液标本80例,同时进行显微镜红细胞计数与尿液分析仪隐血反应检测,对两种尿液红细胞检测方法的结果进行统计学分析。结果:两者联合检测的阳性为15例,以镜检结果为标准,尿液分析仪假阳性的比例为11.76%,假阴性6.35%;以尿液分析仪检测结果为标准,镜检假阳性率为21.05%,假阴性率为3.28%。临床尿液隐血检验中镜检联合尿液分析仪相比单纯镜检的效果更加明显(P<0.05)。结论:尿液分析仪隐血检验与镜检存在差异,单纯仪器检验不能够完全确定尿隐血的阳性,需要进行镜检联合检查。     

类孟买血型鉴定与输血策略研究

目的 研究类孟买血型的鉴定方法、血清学特点和输血策略。方法 对先证者及其四妹采用凝胶微柱法和试管法正反定型,吸收放散试验证实红细胞上弱表达的ABO抗原,测定唾液中的ABH物质,筛查血清中不规则抗体,应用PCR-SSP技术进行ABO基因和FUT1基因分型,并扩增ABO基因的第6、第7外显子和FUT1编码区序列后对PCR产物进行直接测序分析。采用血清学方法为先证者筛选适宜输注的红细胞。结果 先证者和其四妹血清学鉴定为Bm~h和Om~h,血清中有抗-H,ABO基因分型结果为BO2、0102,FUT1基因分型结果均为h1h1型。先证者ABO基因测序结果为B101/002,FUT1基因测序结果为第547-552位AG 2碱基缺失的纯合突变。结论 血型血清学联合分子生物学方法可准确鉴定类孟买血型;类孟买血型个体输血时应采取特殊输血策略,以避免输血不良反应的发生。     

系统性红斑狼疮患者体液免疫功能分析

目的探讨体液免疫功能在系统性红斑狼疮fSLE）中的作用。方法选取53例SLE患者及50例健康对照者，应用速率散射比浊法检测外周血中的IgG、IgA、IgM、C3、C4、K、入．应用流式细胞术检测外周血中的CD19。结果SLE组IgG、IgA、k、λ及CD19均升高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。SLE组C3、C4、k/λ降低，与对照组比较差异有统计学意义（P〈O．05）。SLE组IgM虽有降低，但与对照组比较差异无统计学意义（P〉O．05）。结论检测SLE患者体液免疫功能，有助于SLE疾病的诊断、治疗及监测。     

构建稳定干扰RN181的RKO细胞系并研究其生长现象

目的构建稳定干扰RN181的重组RKO细胞系,并研究下调RN181水平后,重组细胞系在体内外生长的规律。方法 RN181干扰慢病毒感染RKO细胞系,荧光与Western blotting鉴定该重组细胞系,CCK-8法、平板克隆实验研究该重组细胞系在体外增殖规律,裸鼠成瘤实验研究其在体内增殖情况。结果重组细胞系荧光良好,Western blotting证实重组细胞干扰组与对照组的RN181表达量差异有统计学意义(P0.05)。体外细胞生长曲线实验与平板克隆结果显示,干扰组与对照组之间增殖能力差异无统计学意义(P0.05)。干扰组的瘤体生长速度明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论成功构建稳定干扰RN181的肠癌细胞系,并证实了下调RN181对RKO细胞在体外生长无影响但在体内能显著抑制细胞生长。     

稳定过表达、干扰RN181的MHCC97L细胞系建立及RN181功能的初步研究

目的构建过表达和干扰RNl81基因的肝癌MHCC97L重组细胞系，并研究RNl81对该细胞体外增殖的影响。方法基于基因克隆技术，构建plncx2一GFP—IRES／RNl81重组载体，常规鉴定后，与pVSV—G共转染GP2—293细胞包装逆转录病毒。该病毒与RNl81干扰慢病毒分别感染MHCC97L细胞，流式分选表达绿色荧光的细胞，RT—PCR、Westernblotting鉴定后，CCK．8实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖情况。结果重组载体构建成功，重组细胞荧光良好，RT．PCR、Westernblotting分别证实重组细胞中RNl81的mRNA和蛋白表达水平在重组细胞系间均出现差异有统计学意义（P〈0．05）。增殖实验显示RN181上调后细胞生长减慢，克隆数也显著少于对照组（P〈0．05），而RNl81干扰后上述现象可得到逆转。结论成功构建了过表达和干扰RNl81的MHGC97L重组细胞系．初步证实了RNl81在体外对MHCC97L细胞增殖的抑制作用。