T管引流胆汁回输1例失败教训

患某,女性,７０岁,因右上腹疼痛１年余,经Ｂ超证实为胆总管及左肝内胆管结石。术中切开胆总管上段取出一２ｃｍ×１８ｃｍ结石并于左肝内胆管中取出两粒黄豆大结石,胆总管内经约０８ｃｍ,术中将一１４号导尿管经胆总管十二指肠乳头插入十二指肠内,连同“Ｔ”型管引出体外,作胆汁回输备用。术后前三天“Ｔ”管引流,胆汁约７０ｍｌ／日,术后第四天,将“Ｔ”管与导尿管相连通,次日见胆汁从引流口周围渗出,且出现右上腹胀痛,并有轻微腹膜刺激症。即解除“Ｔ”管与导尿管的连接,接引流袋引流,见引流胆汁约５００～７００ｍｌ…     

糖皮质激素受体在结肠癌中的表达及临床意义

目的:研究糖皮质激素受体(GR)在结肠癌组织中的表达及其与核转录因子(NF-κB)和临床病理参数的关系。方法:运用免疫组化染色法检测61例结肠癌(包括42例不伴、19例伴淋巴结转移的原发灶)GR和NF-κB的表达情况。结果:在61例结肠癌组织中GR表达阳性率为57.4%(35/61),在高、中分化的结肠癌GR阳性率64.6%(31/48),明显高于低分化的30.8%(4/13);NF-κB在结肠癌中的阳性率为65.6%(40/61),与GR表达呈正相关(r=0.352,P=0.005)。结论:GR在结肠癌中表达可能与肿瘤的分化相关,与患者性别、年龄、肿瘤部位、Dukes分期及淋巴转移无关。GR将可能作为结肠癌病情发展和指导临床药物治疗的标记物之一。     

希罗达与草酸铂治疗老年中晚期胃癌疗效分析

目的观察希罗达与草酸铂治疗老年中晚期胃癌的近期疗效和不良反应。方法治疗组希罗达2000mg/m2·d分两次口服,1～14d、草酸铂85mg/m2静脉滴注第1d,21d为1周期,对照组将希罗达改为5-氟脲嘧啶600mg/m2·d静脉滴注,第1～5d,并加用亚叶酸钙增敏,其余同治疗组。结果两组均无CR,治疗组PR20例,总有效率55.6%,总临床受益69.4%;对照组PR18例,总有效率52.9%,总临床受益67.6%;不良反应主要是消化道反应、骨髓造血功能抑制、末梢神经炎、肝功能受损,治疗组分别是22例、17例、16例、11例,各占61.1%、47.2%、44.4%、30.6%;对照组分别是29例、30例、16例、13例,各占80.6%、88.2%、47.1%、38.2%。结论希罗达与草酸铂组治疗老年中晚期胃癌疗效较5-氟脲嘧啶组略高,不良反应轻,是一种安全、简便、有效、可行的治疗方案,但P〉0.05,无统计学差异。     

单侧外固定架结合辨证用药治疗股骨干骨折39例体会

作者采用单侧外固定架结合骨折三期辨证用药治疗股骨干骨折 39例 ,结果全部愈合 ,平均愈合时间 3.5月 ,半年后随访 ,肌肉无委琐 ,膝关节伸屈活动自如     

shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰对人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达的抑制作用

目的探讨shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰技术对人结肠癌LoVo细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因表达的抑制作用。方法合成编码shRNA的特异性DNA序列，连接到质粒pGenesil-1，采用脂质体Lipofectamine^TM 2000转染LoVo细胞，G418筛选4周。根据转染质粒的不同，实验分为3组：A组（正常对照组）为未转染的正常培养LoVo细胞，B组（阴性对照组）为转染pGenesil-1空载体质粒，C组（阳性实验组）为转染质粒pGenesil-1-mTOR。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测LoVo细胞mTOR基因mRNA表达，免疫印迹（Western blot）法检测mTOR蛋白表达。结果双酶切产物琼脂糖凝胶电泳显示，重组质粒pGenesil-1-mTOR和空载体质粒pGenesil-1分别切出一条410、350bp大小的片段。G418筛选的转染细胞在倒置荧光照相显微镜下可观察到绿色荧光。C组LoVo细胞mTOR基因mRNA表达水平明显低于A组（P〈0.05），表达抑制率为73．0％。C组LoVo细胞mTOR蛋白表达水平明显低于A组（P〈0．05），表达抑制率为72．5％。结论shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰可明显抑制人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达。     

高锰酸钾溶液保留灌肠在痔上黏膜环切术后的应用效果

目的探讨痔上黏膜环切术（PPH）术后高锰酸钾溶液保留灌肠的临床价值。方法对2012年3月～2014年3月符合条件需要行PPH者200例随机分为高锰酸钾溶液组（100例）和九华痔疮栓组（100例）,比较两组并发症发生情况、术后住院时间及药物费用。结果两组术后5 d、1个月的并发症发生率比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;两组术后6个月的并发症发生率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;两组术后住院时间及术后药物费用比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 PPH术后高锰酸钾溶液保留灌肠具有疗效确切、使用方便、治疗费用低的优点。     

RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定

目的 构建Neuropilins-2(NRP2)基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法 以NRP2为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构件重组体,根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析.重组pGenSil-NRP2载体转染LOVO细胞48 h,收获细胞,采用Western blotting检测其NRP2蛋白表达.结果 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功.重组体pGenSil-NRP2转染LOVO细胞48 h后NRP2蛋白表达显著降低.结论 利用RNAi技术可成功构建抑制NRP2表达的小干扰RNA重组体.     

抑制NRP2表达对淋巴管内皮细胞小管成型的影响

目的 探讨抑制神经纤毛蛋白质2(NRP2)基因表达对人淋巴管内皮细胞(LECs)体外形成小管能力的影响.方法从人新鲜包皮中分离纯化LECs,并进行鉴定.实验设NRP2-RNAi/LECs组、mock/LECs组和hECs组,三组分别转染pGensil-NRP2(携带NRP2 siRNA的真核表达载体)、pGensil-1(空载体)及正常LECs细胞.采用RT-PCR和Western blotting检测NRP2 mRNA和蛋白的表达;绘制细胞生长曲线以观察各组细胞生长的差异.对细胞进行三维胶培养,计数小管样结构的数量,并测量小管外径、内径和管壁厚度.结果 与hECs组和mock/LECs组比较,NRP2-RNAi/LECs组NRP2表达水平明显下调(P<0.05),而前两组间无显著差异(P>0.05).生长曲线显示三组细胞的增殖能力无显著差异,均于接种后3～5d进入对数生长期,6～7d进入停滞期.三维胶培养形成的管样结构在NRP2-RNAi/LECs组很少见,其管样结构的数量及小管外径、内径、管壁厚度都明显低于mock/LECs组和hECs组(P<0.05),而后两组间无显著差异(P>0.05).结论 抑制NRP2的表达可抑制LEGs在体外形成小管的能力,并可能抑制肿瘤淋巴管的生成.     

VEGF-C基因RNA干扰真核表达载体的构建及其效果鉴定

目的:构建VEGF-C基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法:以VEGF-C为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的VEGF-C基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pGenSil-VEGF-C质粒转染LOVO细胞48小时,检测其对LOVO细胞VEGF-C蛋白与mRNA表达的影响。结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低Lovo细胞VEGF-C的蛋白和mRNA表达,重组载体构建成功。结论:利用RNAi技术可成功构建抑制VEGF-C表达的小干扰RNA重组体。     

mTOR信号通路调控HK-Ⅱ表达对结肠癌细胞增殖的影响

目的：探讨mTOR信号通路是否可通过调控HK—Ⅱ蛋白表达的途径来影响结肠癌细胞增殖。方法：Western印迹检测结肠癌细胞mTOR、HK—Ⅱ蛋白表达水平，并观察抑制mTOR信号通路对HK—Ⅱ蛋白表达的影响。采用MTT法检测mTOR和HK—Ⅱ特异性抑制剂作用后结肠癌细胞增殖的变化。结果：mTOR、HK—Ⅱ蛋白在4种结肠癌细胞中均明显表达；抑制mTOR可阻断结肠癌细胞HK—Ⅱ蛋白表达；抑制mTOR和抑制HK—Ⅱ均可明显控制结肠癌细胞增殖，且两者有协同效应。结论：mTOR信号通路可能通过调控HK—Ⅱ的表达影响结肠癌细胞增殖。