纸片法快速鉴定肠杆菌科细菌

肠杆菌科在发达国家临床微生物实验室,已用多种微量快速商品诊断试剂进行鉴定.主要原理是使用浸渍的纸片,小反应孔和相对大的接种量,利用细菌已形成的酶的活性,在短时间内形成可检出的足够浓度的生化产物.根据上述原理,我们自制16种生化纸片,快速鉴定临床肠杆菌科细菌,取得较满意结果.     

肠杆菌科快速生化试验的实验研究

本文报告一种用于肠杆菌科鉴定的微量快速生化试验方法.肠杆菌科快速生化试验培养基基质液制备好后,加入聚苯乙烯酸标反应板小孔内,每孔10μl,37℃2小时干燥后,塑料袋内冰箱保存.临用前每孔加入孵育18～24小时含菌量10~8～10~9个/ml细菌混悬液100μl、37℃孵育4小时后观察结果.573株临床肠杆菌科细菌试验结果表明.15项生化试验与常规的符合率均在93%以上;其中93～95.9%4项,96～97.9%4项,98～99.9%4项,100%3项,说明本法可用于肠杆菌科常规鉴定.由于本法试剂量少,酶板保存方便,有效期长,操作方便,与常规符合率高,因此不仅适用于规模较大、日常工作繁重的大医院,亦适用于人力物力相对较弱的基层医院使用,有推广应用的价值.     

巢式聚合酶链反应快速检测血液标本中

目的建立一种检测血液中伤寒沙门菌的方法.方法根据伤寒沙门菌特异鞭毛基因设计两对引物,通过巢式聚合酶链反应(PCR)扩增伤寒沙门菌DNA片断,扩增产物通过凝胶电泳进行分析.结果用伤寒沙门菌DNA系列稀释液进行试验,巢式PCR能够检出10个伤寒沙门菌.36份培养阳性标本,33份PCR阳性;6份培养阴性但临床高度可疑的伤寒病人标本PCR阳性10份其它原因引起发热的临床标本均为阴性.结论巢式PCR能够快速、特异、准确地检出血液中的伤寒沙门菌.     

应用聚合酶链反应检测泌尿生殖道淋球菌,沙眼衣原体和解脲脲原体

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对３００例性传播疾病患者进行淋球菌，沙发衣原体和解脲脲原体３种病原体的检测，共检出上述病原位２１１例，检出率７０％；其中１４２例（６７％）仅检出１种病原体，５６例（２６．５％）检出２种病原体，４例（１．９％）检出３种病原体；淋球菌，沙眼衣原体，解脲脲原体的检出率分别是３１．３％，３９．７％，１７．７％，表明ＰＣＲ技术是检测３种病原体敏感，特异，快速的方法。     

模板制备方法对聚合酶链反应检测沙眼衣原体结果的影响

沙眼衣原体 (Ｃｔ)是性传播疾病重要的病原体之一 ,感染后可以不出现症状或无特异的临床症状 ,因此需要实验室检出病原体方能明确诊断。聚合酶链反应 (ＰＣＲ)、连接酶链反应 (ＬＣＲ)等核酸扩增方法可快速扩增靶ＤＮＡ ,为检测泌尿生殖道沙眼衣原体提供了一种敏感、特异的方法[1] 。但是 ,在各种临床标本中 ,经常存在核酸扩增反应的抑制物 ,可导致核酸扩增失败而出现假阴性结果[2 ] 。因此 ,标本处理方法能否有效去除核酸扩增反应抑制物 ,是影响ＰＣＲ测定准确性的关键因素之一。国外已有含内反应质控的沙眼衣原体检测商品试剂盒 ,ＰＣＲ扩…     

人类乳头状瘤病毒与肺癌病因关系的研究(二)

目的继续研究人类乳头状瘤病毒(HOV)与肺癌发生病因的关系.简要讨论HPV的致癌机理.方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测石蜡包埋的肺腺癌、支气管肺泡细胞癌、大细胞未分化癌、小细胞癌标本各30份中的HPVDNA.结果120份标本中,HPVDNA阳性率为5.8%(7例),与肺鳞癌中的HPVDNA阳性率比较,差异有非常显著意义(P＜0.01).结论HPV在肺癌发生中起了重要的作用.     

巢式聚合酶链反应快速检测血液标本中伤寒沙门菌的实验研究

目的 建立一种检测血液中伤寒沙门菌的方法。方法 根据伤寒沙门菌特异鞭毛基因设计两对引物,通过巢式聚合酶链反应（PCR）扩增伤寒沙门DNA片断,扩增产物通过凝胶电泳进行分析。结果 用伤寒沙门菌DNA系列稀释进行试验,巢式PCR能够检出10个伤寒沙门菌。36份培养阳性标本,33份PCR阳性;6份培养阴性但临床高度可疑的伤寒病人标本PCR阳性;10份其它原因引起发热的临床标本均为阴性。结论 巢式PCR能够快速、特异、准确地检出血液中的伤寒沙门菌。     

聚合酶链反应反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌的临床意义

目的：探讨聚合酶链反应（PCR）反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌（TB）DNA的价值。方法：用PCR反向膜杂交技术检测522例结核及60例非结核患者临床标本中的TB－DNA,同时用培养,抗酸染色涂片及常规PCR法作对照。结果：PCR反向膜杂交法阳性率为80．6％（411／690）,培养为18．1％（125／690）,镜检为13．95（96／690）,常规PCR为59．6％（411／690）,PCR反向膜杂交法与常规法比较（P＜0．001）,差异有显著意义。PCR反向膜杂交法阳性检出率高于常规PCR（P＞0．05）,但差异无显著意义;该技术假阳性为零。结论PCR反向膜杂交技术检测临床标本中TB－DNA具有快速、高度特异性和敏感性,可为结核病的临床早期诊断提供一种新的病原学诊断手段。     

位相显微镜筛选菌尿症

Barbin研究证明,用位相显微镜(以下简称位相镜)直接检查新鲜未染色尿液是一种快速实用的检查方法。若中段尿培养细菌计数≥10~5个/ml,则油镜(1000×)每视野至少可见一个细菌;相反,若<10个/ml,则几个视野都可能见不到一个细菌。故通过位相镜可快速推测有否菌尿症。我们用位相镜检查了468份尿标本,并同时作了培养及细菌计数。现将结果介绍如下。材料和方法一标本 468份尿标本系我院门诊和病房送检作培养的清洁中段尿标本。标本收集后立即处理,或置4℃冰箱保存,在8小时内