毕赤酵母表达系统

毕赤酵母表达系统是一种优秀的重组蛋白表达系统,近年来被广泛应用于重组蛋白的表达。现就巴斯德毕赤酵母表达系统的特点及其用于外源蛋白表达的基本策略作一综述。     

一氧化氮对HaCaT细胞迁移功能的影响

目的 了解外源性NO对HaCaT细胞迁移功能的影响及其机制.方法 以硝普钠作为NO的供体,在HaCaT细胞培养液中加入0.1、1.0、10.0、100.0、1000.0 μmol/L硝普钠,分别于划痕0 h(划痕即时)及划痕后6、12、24、48 h观察并计算细胞迁移率.根据该结果筛选出硝普钠最佳作用浓度及作用时间,以此为实验刺激条件,应用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变,采用蛋白质印迹法、PCR等方法检测实验组(加入10.0 μmol/L硝普钠培养24 h)及阴性对照组整合素β_1、RhoA、cdc42、Rac1蛋白及RhoA、cdc42、Rac1 mRNA表达情况.对各实验结果行单因素方差分析和重复测量的方差分析.结果 加入硝普钠处理后各浓度组细胞迁移率随划痕时间的延长而逐渐增加.加入10.0 μmoL/L的硝普钠划痕后6～48 h与划痕0 h比较,差异均有统计学意义(F=31.002,P值均小于0.05).激光共聚焦显微镜显示,阴性对照组细胞纤毛稀少,胞内应力纤维束纤细,而实验组纤毛明显增多,胞内应力性纤维束增粗.实验组整合素β_1蛋白表达水平明显低于阴性对照组(F=8.25,P=0.015);而RhoA的蛋白表达水平为0.92±0.04,高于阴性对照组的0.64±0.04(F=7.25,P<0.05),cdc42、Rac1蛋白表达也高于阴性对照组(F值分别为14.10、6.50,P值均小于0.05).实验组RhoA、cdc42、Rac1的mRNA水平均高于阴性对照组(F值分别为23.67、10.39、9.52,P值均小于0.05).结论 适宜浓度的外源性NO可促进HaCaT的增殖及迁移,提示其在皮肤创面修复中起重要作用.其机制可能与整合素β_1表达下降、细胞骨架的改变有关.     

法尼酯X受体对脂肪酸合酶表达的影响

目的 探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对脂肪酸合酶(fatty acid synthetase,FAS)表达的影响.方法 用FXR激动剂CDCA作用人肝癌细胞株(HepG2),应用RT-PCR和Western blotting分别从mRNA水平和蛋白质水平检测FAS的表达情况.结果 用不同浓度的CDCA(25、50、75 μmol/L)分别作用于HepG2细胞,6、12、24、48 h后,FAS mRNA和蛋白质水平呈时间和剂量依赖性下调.结论 FXR激动剂可抑制脂肪酸合酶的表达.     

“一带一路”沿线留学生康复医学教育存在的问题及思考

自2013年我国提出“一带一路”倡议以来,“一带一路”沿线国家来华留学学生数量逐年增加。据相关统计,2010~2017年期间来我国学习的留学研究生总数达37万余人,其中“一带一路”沿线国家来华留学研究生达21万余人,占比超过50%[1]。因此重视“一带一路”沿线国家留学生教育培养质量将有利于提高整体留学生教育质量,增加我国国际影响力。医学教育是留学生选择的第二大专业[2],康复医学教育作为医学教育的重要分支,提高康复医学教育对于促进我国留学生教育具有重要的现实意义。     

等离子体灭菌柜使用与维护

随着医疗技术的发展,微创手术的增加,有一部份医疗器械,如腹腔镜、关节镜、脑室镜、电动锯、电动钻、电线等物品的消毒。不能用高温、高压和液体浸泡。又要快速灭菌,副作用小的设备。目前有环氧     

人可溶性CD40L表达及其生物学活性初步分析

目的将已构建好的重组表达质粒pET28a -sCD40L进行优化条件表达,并将其目的蛋白纯化,对目的蛋白进行初步的活性分析.方法利用已构建好的重组表达质粒pET28a -sCD40L进行目的蛋白的表达,优化表达的条件,利用Western-blot鉴定目的蛋白,在最适条件下进行目的蛋白的表达,利用Ni2 -NTA柱纯化目的蛋白,MTT法检测重组蛋白对人外周血淋巴细胞增殖活性的影响.结果利用 Ni2 -NTA柱将目的蛋白进行了分离纯化,且纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞的增殖.结论成功优化了重组表达质粒pET28a -sCD40L的表达条件,生物学活性的初步分析显示Ni2 -NTA柱纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞增殖活性.     

规范和监控抗菌药物在医院临床中的使用

抗生素不合理使用与细菌的耐药性密切相关，因此，加强抗生素的使用与管理，规范临床抗感染治疗具有非常重要的意义。实施有效手段，从加强医护人员合理使用抗菌药物的理论培训、完善医院细菌耐药性监测体系、发挥医院药事管理与药物治疗委员会的监管职能、建立处方和医嘱的医疗质量考评等方面入手，规范医院抗菌药物的使用管理。     

视黄醇结合蛋白的研究进展

视黄醇结合蛋白（RBP）是体内负责结合并转运维生素A的一种血浆转运蛋白，在调节机体维生素A的分布、摄取及利用中具有关键性作用，并与营养及多种疾病有关。     

鹅脱氧胆酸(CDCA)在巨噬细胞中增加细胞间黏附分子-1的表达

目的 通过检测鹅脱氧胆酸(CDCA)刺激下,小鼠巨噬细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达变化,探讨胆汁酸对巨噬细胞中相关炎性反应分子表达的影响.方法 采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)及Western blot测定在不同浓度CDCA刺激下,小鼠巨噬细胞株RAW264.7中ICAM-1的mRNA和蛋白水平的变化情况.结果 同对照组相比,在CDCA浓度为25、50 μmol/L的刺激下,ICAM-1的mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.05),两者的表达变化趋势较一致.结论 在CDCA的刺激下,小鼠巨噬细胞中ICAM-1的表达明显增加,对于CDCA作为药物在临床上使用的作用研究方面具有重要意义.     

氯雷他定致肝功能异常1例

患者男,25岁。因颈部、腋部、腹股沟周围、胭窝多处出现散在大小不等皮疹就诊。诊断为皮肤过敏,口服氯雷他定片,每天1次,每次10mg,服用1周后停药。但3天后症状复发,改为2～3天服用1次,每次10mg。连续服用2．5个月后,发现巩膜轻度黄染,总胆红素42．5μmol／L,丙氨酸转氨酶48U／L。建议停药观察,4个月后复查肝功能恢复正常。