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背景:如何获取高质量的种子细胞是构建组织工程血管的先决问题。
目的:改良血管组织工程种子细胞原代培养技术并观察其生物学特性。
设计、时间及地点:以细胞为培养对象,观察性实验,于2006-12/2008-03在江西省分子医学重点实验室完成。
材料:新西兰家兔,体质量2 kg左右,用于血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的原代培养。
方法:以胶原酶胰酶序贯消化法获得血管内皮细胞、快捷贴壁法培养血管平滑肌细胞。
主要观察指标:免疫细胞化学法对两者进行鉴定;流式细胞术检测第2代和第6代血管内皮细胞的增殖指数。
结果:培养的种子细胞符合各自特征,免疫细胞化学鉴定其为血管内皮细胞和血管平滑肌细胞。内皮细胞第2代和第6代细胞增殖指数分别为(20.87±2.05)%和(9.75±1.76)%。
结论:胶原酶胰酶序贯消化法和快捷贴壁法可以较稳定地获取血管内皮细胞及血管平滑肌细胞;第2代的内皮细胞较第6代更适用于构建组织工程血管。 相似文献
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目的通过小鼠胚胎干细胞定向分化出的内皮细胞和平滑肌细胞构建组织工程小口径血管。方法将小鼠胚胎干细胞诱导分化出的内皮细胞和平滑肌细胞分别种植于管状聚乳酸-羟基乙酸(polylactic glycolic acid,PLGA)管腔内面,构建出小口径组织工程血管,再将其移植入裸鼠皮下,每隔1周取1次包埋的小口径组织工程血管,共取3次;再行HE染色,免疫组化行内皮细胞、平滑肌细胞鉴定,并且在倒置相差显微镜下观察其形态。结果倒置相差显微镜下观察结果显示小鼠胚胎干细胞诱导分化出的平滑肌细胞呈长梭形,而内皮细胞呈“鹅卵石”样;HE染色显示平滑肌、内皮细胞在PLGA表面上延伸生长;动物体内移植实验结果显示,管状PLGA皮下小口径组织工程血管移植后逐渐降解、直至变薄中断,免疫组织化学和HE染色显示管腔内的血管平滑肌样细胞和内皮样细胞在PLGA上呈片状融合生长,并见大量的细胞外基质。结论胚胎干细胞诱导的平滑肌和内皮细胞与PLGA有良好亲和性,可以用胚胎干细胞与PLGA制作小口径组织工程血管。 相似文献
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目的探讨经皮经肝胆囊穿刺引流术(PTGD)用于老年危重急性胆囊炎患者的疗效及在基层医院开展的可行性。方法对45例老年危重急性胆囊炎合并胆囊结石行PTGD,比较治疗腹痛、体温、检验结果的差异,以及PTGD术中、术后情况及术后并发症发生情况。结果所有患者行PTGD均一次性置管成功,腹痛明显减轻,最高体温下降,WBC及TBil明显下降。结论PTGD是一种安全、有效的方法,对于老年危重急性胆囊炎患者显得尤为重要,基层医院开展PTGD具有重要意义。 相似文献
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目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)组织中热休克蛋白70-2(HSPA2)的表达及临床意义。方法利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和免疫组化法检测120例HCC组织和癌旁组织中的HSPA2 m RNA和蛋白的表达水平,并分析HSPA2蛋白在HCC组织中的表达水平与患者临床病理特征之间的关系。结果 RT-q PCR结果显示,HSPA2 m RNA在50例HCC组织中的表达水平明显高于癌旁正常肝脏组织中(2.82±0.19与1.18±0.14,P<0.01);免疫组化结果显示,在120例HCC标本中,HSPA2蛋白高表达有69例(57.5%),低表达有51例(42.5%),HSPA2蛋白高表达与肿瘤长径、病理分化程度和肿瘤分期有关(P<0.05),而与年龄、性别、HBs Ag状态以及血清AFP水平无关(P>0.05)。结论 HSPA2在人HCC中高表达,其高表达可能与HCC的发生、发展密切相关,可能作为HCC早期诊断和预后预测的指标。 相似文献
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背景:如何获取高质量的种子细胞是构建组织工程血管的先决问题。目的:改良血管组织工程种子细胞原代培养技术并观察其生物学特性。设计、时间及地点:以细胞为培养对象,观察性实验,于2006-12/2008-03在江西省分子医学重点实验室完成。材料:新西兰家兔,体质量2kg左右,用于血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的原代培养。方法:以胶原酶胰酶序贯消化法获得血管内皮细胞、快捷贴壁法培养血管平滑肌细胞。主要观察指标:免疫细胞化学法对两者进行鉴定;流式细胞术检测第2代和第6代血管内皮细胞的增殖指数。结果:培养的种子细胞符合各自特征,免疫细胞化学鉴定其为血管内皮细胞和血管平滑肌细胞。内皮细胞第2代和第6代细胞增殖指数分别为(20.87±2.05)%和(9.75±1.76)%。结论:胶原酶胰酶序贯消化法和快捷贴壁法可以较稳定地获取血管内皮细胞及血管平滑肌细胞;第2代的内皮细胞较第6代更适用于构建组织工程血管。 相似文献
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目的 观察微小RNA-1246(miR-1246)在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其在肝癌发生发展中的作用和意义。方法应用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测miR-1246在肝癌以及癌旁组织的表达;对人肝癌细胞株(BEL7402、SMMC7721)转染miR-1246 抑制剂后,采用MTT法观察肝癌细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果 miR-1246 在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织[(65.39±8.77)vs(10.23±2.58),P=0.002]。MTT和凋亡实验结果显示,与阴性对照组相比,转染miR-1246抑制剂后,BEL7402细胞增殖能力下降,凋亡增加(P均<0.05);SMMC7721细胞也出现增殖能力下降,凋亡增加(P均<0.05)。结论 miR-1246 在肝癌组织中高表达,并且与肝癌细胞的增殖及凋亡有关,其表达的上调可能与肝癌的发生发展有关。 相似文献
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目的 探讨细胞间粘附分子-1的表达对家兔动脉缺血后内膜增生的影响. 方法 选用健康家兔40只,每组10只,随机分成正常对照组和3个缺血组(缺血15 min组、缺血30 min组、缺血60 min组).分别解剖出右侧股动脉,以动脉夹钳夹使股动脉缺血段长2 cm,正常对照组只加解剖,不加阻断,缺血组分别钳夹阻断缺血15、30、及60 min后恢复血流.分别于饲养第7、14、28天后抽取外周静脉血以ELISA法检测家兔血清中的sICAM-1;同时于第28 d以免疫组化S-P法检测缺血段股动脉内皮细胞上粘附的ICAM-1及弹力纤维VG染色法计算缺血段动脉内膜、中膜厚度. 结果 ①正常对照组股动脉内皮细胞粘附的ICAM-1呈弱阳性表达(2.80±0.35),与缺血15 min组相比无显著性差异(P<0.05),缺血15 min与缺血30 min(26.67±0.75)相比差异显著(P<0.01),缺血30 min组明显低于缺血60 min组(35.38±0.65)(P<0.01).②正常对照组、缺血15 min组股动脉内膜无增生;缺血30 min组见动脉内膜明显增生,与缺血60 min组相比差异显著(P<0.01). 结论 动脉缺血后通过测定ICAM-1值判定内膜增生程度与ICAM-1值有关. 相似文献
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