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目的：Bmi-1是一种属于PcG家族的原癌基因，它直接参与细胞生长、增殖的调节，是成体干细胞和白血病干细胞自我更新所必需的。检测原痛基因bmi-1在不同来源CD34^＋细胞中的表达，探讨其与细胞增殖的关系。
方法：实验于200703／11在广州医学院生化教研室完成。①实验材料：白血病细胞株SHI-1由苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所薛永权教授惠赠；脐血由广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科提供。实验经产妇知情同意，并经医院伦理委员会批准：外周血采自健康成年自愿捐献者。②实验方法：以CD34免疫磁珠标记急性单核细胞白血病细胞株SHI-1，上柱分选CD3矿细胞，脐血单个核细胞以同样的方法标记CD34免疫磁珠标记和分选CD34^＋细胞，应用流式细胞仪分析分选后CD34^＋的寓集度：将分选前后的CD34^＋、CD34^SHI—1细胞以相同的密度接种于24孔板，分不同的时间点计数细胞，并绘制生长曲线。选用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞。以正常脐带血和外周单个核细胞为对照，采用半定最RT—PCR法检测bmi—1基因在不同来源CD34^＋细胞中的表达。
结果：①SHI—1细胞分选前后标记CD34^＋PE、CD38^＋FITC流式分析显示，分选后CD34^＋细胞的富集度为99％以上。②SHI-1-CD34^＋细胞旱缓慢生长趋势，不同于分选前细胞的指数生长状态。③RT-PCR检测显示，bmi-1 mRNA在SHI—1—CD34^＋细胞中的表达高于其在脐肌-CD34^＋与外周血单个核细胞中的表达（P〈0．05）。bmi-1 mRNA在SHI—1、SHI—1—CD34^＋、SHI-1-CD34^＋细胞中表达差异不显著，在脐血L—CD34^-细胞中弱表达或不表达。
结论：bmi-1基因在SHI细胞株CD34^＋与CD34^-细胞中均高表达，说明其与血液细胞的高增殖能力密切相关。 相似文献
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bmi-1原癌基因在不同来源CD34+细胞的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
目的:Bmi-1是一种属于PeG家族的原癌基因,它直接参与细胞生长、增殖的调节,是成体干细胞和白血病干细胞自我更新所必需的.检测原癌基因bmi-1在不同来源CD34 细胞中的表达,探讨其与细胞增殖的关系.方法:实验于2007-03/11在广州医学院生化教研室完成.①实验材料:白血病细胞株SHI-1由苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所薛永权教授惠赠;脐血由广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科提供,实验经产妇知情同意,并经医院伦理委员会批准;外周血采自健康成年自愿捐献者.②实验方法:以CD34免疫磁珠标记急性单核细胞白血病细胞株SHI-1,上柱分选CD34 细胞,脐血单个核细胞以同样的方法标记CD34免疫磁珠标记和分选CD34 细胞,应用流式细胞仪分析分选后CD34 的富集度;将分选前后的CD34 、CD34-SHI-1细胞以相同的密度接种于24孔板,分不同的时间点计数细胞,并绘制生长曲线.选用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞.以正常脐带血和外周单个核细胞为对照,采用半定量RT-PCR法检测bmi-1基因在不同来源CD34 细胞中的表达.结果:①SHI-1细胞分选前后标记CD34-PE、CD38-FITC流式分析显示,分选后CD34 细胞的富集度为99%以上.②SHI-1-CD34 细胞呈缓慢生长趋势,不同于分选前细胞的指数生长状态.③RT-PCR检测显示,bmi-1 mRNA在SHI-1-CD34 细胞中的表达高于其在脐血-CD34 与外周血单个核细胞中的表达(P<0.05).bmi-lmRNA在SHI-1、SHI-1-CD34 、SHI-1-CD34-细胞中表达差异不显著,在脐血-CD34-细胞中弱表达或不表达.结论:bmi-1基因在SHI细胞株CD34 与CD34-细胞中均高表达,说明其与血液细胞的高增殖能力密切相关. 相似文献
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