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牛m1和m5受体内环3区的克隆及主动脉内皮细胞上两种受体mRNA表达的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :克隆牛m1和m5受体亚型特异性区域内环 (innerloop) 3区 ,并检测牛主动脉内皮细胞上两种受体mRNA的表达。方法 :根据人、小鼠的m1和m5受体序列 ,设计并合成针对两种受体内环 3区的特异性引物。采用RT_PCR法从牛海马组织中扩增牛m1和m5受体内环 3区 ,并通过半定量RT_PCR法检测两种受体mRNA在传代培养前后的牛主动脉内皮细胞中的表达。结果 :序列测定与对比表明克隆得到了牛m1和m5受体内环 3区。半定量RT_PCR结果显示 ,原代牛主动脉内皮细胞表达m1受体mRNA而未检测到m5受体mRNA ,两种受体mRNA在传 10代的培养牛主动脉内皮细胞中均未检测到有表达。结论 :本研究为探讨血管内皮细胞上介导乙酰胆碱诱发血管舒张反应的受体与M受体的关系提供了线索 相似文献
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目的在早期和晚期动脉粥样硬化模型上研究新化合物哌芳安他抗动脉粥样硬化的机制.方法大鼠或家兔随机分为正常对照、模型对照和哌芳安他给药组,其中模型对照和哌芳安他给药组动物给予高胆固醇饲料,检测的指标包括:兔颈动脉HE染色;大鼠或兔血清TC, LDL-CHO, HDL-CHO, IL-8, ET-1, PGI2, TXA2 和NO水平;兔颈动脉MCP-1和 IL-8 mRNA表达量.结果哌芳安他能明显抑制早期和晚期动脉粥样硬化中TXA2的过量表达,在大鼠早期动脉粥样硬化中可见哌芳安他给药组动物血清NO增加而IL-8含量减少;在兔晚期动脉粥样硬化中可见IL-8和MCP-1 mRNA表达降低;哌芳安他对血脂水平、MDA 和SOD无明显影响.结论哌芳安他抗动脉粥样硬化机制与其升高血清NO水平,降低TXA2含量及抑制IL-8 和MCP-1过度表达相关. 相似文献
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介导乙酰胆碱诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 针对血管内皮细胞上是否存在M受体的疑点 ,从基因水平和信号转导机理上探讨介导乙酰胆碱 (ACh)诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性。方法 以新鲜分离和传代培养的牛主动脉内皮细胞为实验材料 ,比较两种内皮细胞M1~M5受体mRNA的分布状况、ACh诱发细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)、环腺苷酸 (cAMP)含量变化。①设计高选择性、特异性寡核苷酸探针 ,采用点杂交方法对内皮细胞M1~M5受体mRNA进行分析 ,并通过反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、DNA序列测定及同源性分析确证点杂交的实验结果 ;②以Fluo 3和Fura 2为荧光探针 ,用共聚焦和荧光光度仪测定内皮细胞 [Ca2 + ]i 变化 ;③内皮细胞cAMP含量采用12 5I放射免疫分析方法测定。结果 在新鲜分离的牛主动脉内皮细胞存在M1~M4 受体mRNA ,内皮细胞经传代培养后仅检测到M4 受体mRNA ;1和 10μmol·L- 1ACh能够引起原代培养内皮细胞 [Ca2 + ]i增加 ,最大增加量为 12和 19nmol·L- 1;ACh激活原代培养内皮细胞的钙离子信号 ,表现为单次或连续2次的钙振荡 ,具有异时性和快速耐受的特点 ;此外 ,随ACh浓度增加 ,原代培养内皮细胞cAMP含量均呈微弱增加趋势 ;ACh不引起传代培养内皮细胞[Ca2 + ]i 浓度的改变 ,但能浓度依赖地降低cAMP含量。结论 新鲜分? 相似文献
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目的:构建新型噬菌体展示载体,评价其展示效果,为构建scFv库寻找新的展示体系。方法:PCR分离、扩增M13KO7中pⅨ蛋白编码基因,克隆入噬菌体展示载体PHB-gⅢ,替换原载体中的gⅢ-CT段,构建载体PHB-pⅨ,并将相对分子质量约50×103的碱性磷酸酶的编码基因分别克隆入两展示载体,观察其展示碱性磷酸酶能力的差别。结果与结论:成功构建了展示载体PHB-pⅨ,该载体具有与PHB-gⅢ相当的展示碱性磷酸酶的能力,且相同滴度的PHB-gⅢ噬菌体DNA含量略高于PHB-pⅨ噬菌体DNA含量,提示PHB-gⅢ系统展示外源蛋白时存在感染能力下降。PHB-pⅨ系统具有用于展示噬菌体抗体库的良好应用前景。 相似文献
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目的 探讨甲磺酸双氢麦角毒碱治疗急性一氧化碳中毒迟发性脑病(DEACMP)的临床疗效及作用机制.方法 138例确诊为DEACMP的患者随机分为治疗组(71例)和对照组(67例).治疗组用甲磺酸双氢麦角毒碱0.6 mg 加入5%葡萄糖500 mL静脉滴注,20 d为1个疗程.对照组用胞二磷胆碱750 mg、维脑路通600 mg加入5%葡萄糖500 mL静脉滴注,20 d为1个疗程.在用药第0、5、10、20天监测血清过氧化脂质(LPO)、溶血磷脂酸(LPA)、溶血磷脂酸极性相似的磷脂(AP).结果 治疗组治疗后LPO、LPA、AP较治疗前明显降低(P<0.05),而对照组治疗前后无明显变化(P>0.05).结论 甲磺酸双氢麦角毒碱治疗DEACMP可提高治愈率,降低后遗症和病死率,且不良反应少. 相似文献
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rhBMP-2复合透明质酸钠凝胶诱导成骨的实验研究 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 为重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)在种植牙中的应用寻找一种新型、有效的复合材料。方法 将20~30mg雄性小白鼠16只随机分为2组,每组4只。其中一组为空白对照组,其余各组小鼠肌囊内分别植入透明质酸钠凝胶(Healon GV)、rhBMP-2、rhBMP-2与HealonGV复合物,21d后进行X线片观察、组织学观察及BMP定量测定。结果 空白对照、Healon GV组无骨组织生长 相似文献