姜黄素联合美罗培南对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵表达的影响

目的 本课题旨在研究姜黄素（CUR）联合美罗培南（MEM）对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌（CRPA MexAB-OprM外排泵过表达的抑制作用。方法 微量肉汤法检测MEM的MIC,并通过MIC逆转倍数筛选出外排泵高表达的菌株;微量肉汤检测CUR的MIC;棋盘滴定法测定MEM和CUR的最佳联合浓度;PCR技术检测7株菌的mexA、mexB、oprM和mexR、nalC、nalD基因;qRT-PCR技术检测7株菌的mexB、oprM基因的表达水平;利用260nm处吸光度检测细菌细胞膜的完整性;溴化乙锭（EB）荧光累积和直接外排含量来观察MexAB-OprM外排泵的表达;qRT-PCR技术检测CUR-MEM联合和MEM单药处理细菌24h后mexA、mexB、oprM基因和调控基因mexR、nalC、nalD的表达水平。结果 30株CRPA筛选出7株外排泵MexAB-OprM高表达的菌株;微量肉汤法确定CUR的MIC为512～1024μg/mL;棋盘滴定法发现CUR显著降低了MEM的MIC值,两者有明显的协同作用,FIC指数为≤0.5;PCR技术均检测到mexA、mexB、oprM、mexR、na...