大分子BAC基因打靶载体转染鸡胚原始生殖细胞

背景：利用原始生殖细胞技术可以方便地将各种外源基因转入鸡体内,以较快的速度获得转基因鸡,但到目前为止原始生殖细胞的转染效率仍然很低,且很难进行较大基因片段的转染。 目的：拟实现大分子BAC载体对鸡胚原始生殖细胞的转染。 设计、时间及地点：基因水平的细胞学体外观察,于2006-08/2008-07在广东省佛山大学完成。 材料：种蛋来自华南农业大学鸡场粤黄鸡群,受精蛋在37.5 ℃、相对湿度为65%的条件下孵化68~72 h。BAC-TDN-GID载体由佛山大学分子生物学实验室保存。 方法：以rRNA基因及其间隔序列作为同源重组引导序列,构建含GFP基因和hIFN基因的大分子BAC基因打靶载体,将鉴定为阳性的载体进行扩增培养并大量抽提。取课题组孵化至第19期的粤黄鸡胚,挑取其生殖嵴或性腺,胰酶消化法获得原始生殖细胞,并辅以饲养层和生长因子进行培养。采用脂质体介导法在原始生殖细胞内进行基因转移,对存活的细胞进行目的基因DNA水平和RNA水平鉴定。 结果：第19期鸡胚性腺原始生殖细胞体外培养48 h呈桑椹状或者椭圆状,72 h形成细胞集落,过碘酸染色呈紫红色。分子量达30 kb的大分子转基因载体BAC-TDN-GID转染鸡胚原始生殖细胞48 h可见荧光细胞,表明转染成功。经PCR和RT-PCR鉴定,证实扩增的产物大小与预期结果大致相吻合,目的基因hIFN已经整合进入原始生殖细胞基因组,并已开始表达。 结论：实验成功将大分子BAC载体上的外源基因转染入体外分离培养的鸡胚原始生殖细胞。     

安哥拉兔遗传改良的最佳结构(下)

CMM是第i级年龄组j的公兔对r级第一个年龄组的公兔的贡献 Ur是r级繁殖兔子的使用年限 PMMIir-1=nlj/Nr_j nij是在该时期来源于i级j年龄组的公兔用于r级的兔数 Nr_1是年龄组j用于r级繁殖所需公兔的总数     

安哥拉兔遗传改良的最佳结构(上)

安哥拉兔的最佳育种结构分核心群、种兔增殖群、繁殖群和生产群4级。假设公、母兔的成熟年龄为5个月,母兔每年产16仔,1只公兔的配种能力为7只母兔,并且繁殖个体的年龄分配大致均匀,那么要取得最大的遗传进展,核心群公兔的育种使用期限应为4个月,母兔为6个月。 本文描述了把核心群的遗传进展传递到其它群的计算方法,确定了由上一级公母兔生产下一级公、母兔的最佳比例。在改良规划达到稳定阶段以前,进入增殖群和繁殖群的最佳兔数是不定的,稳定以后,4个级群每单位时间的遗传获得量一样。 《如果生产群规模稳定,遗传改进的传递速度与核心群规模有直接关系。 为经济有效地取得遗传进展,增大核心群的最低成本应等于因缩短了时间间隔而增加了的经济收入。     

粤黄鸡分化品系血液蛋白质多态性基因频率的变化

本试验采用醋酸纤维薄膜电泳和聚丙烯酸胺凝胶电泳方法测定了粤黄鸡4个分化品系(群体)以及石歧杂鸡和杏花鸡的血液蛋白质多态性,观察了多态性血液蛋白质基因频率的变化,根据基因频率计算出6个群体相互之间的相似系数和标准遗传距离及各群的平均杂合度,分别以系统聚类分析和主分量分析方法对这种变化进行研究。结果表明,4个粤黄鸡分化品系大多数多态性血液蛋白质基因频率相近,少数出现品系(群体)间差异,而相似系数和遗传距离说明品系(群体)间分化与选育目的相符;系统聚类分析显示4个粤黄鸡分化品系(群体)与石歧杂鸡间关系较为密切;与杏花鸡相对地较为疏远,主分量分析却清楚地表明了粤黄鸡从石岐杂鸡中的分化以及与杏花鸡的区别。这两种分析方法结果相互补充,而两者的不一致有待进一步研究。另外,平均杂合度似乎也表明了品系(群体)选育程度的差异。     

大分子BAC基因打靶载体转染鸡胚原始生殖细胞

背景:利用原始生殖细胞技术可以方便地将各种外源基因转入鸡体内,以较快的速度获得转基因鸡,但到目前为止原始生殖细胞的转染效率仍然很低,且很难进行较大基因片段的转染.目的:拟实现大分子BAC载体埘鸡胚原始生殖细胞的转染.设计、时间及地点:基因水平的细胞学体外观察,于2006-08/2008-07在广东省佛山大学完成.材料:种蛋来自华南农业大学鸡场粤黄鸡群,受精蛋在37.5℃、相对湿度为65%的条件卜孵化68～72 h.BAC-TDN-GID 载体由佛山大学分子生物学实验室保存.方法:以rRNA基因及其间隔序列作为同源重组引导序列,构建含GFP基因和hlFN基因的大分子BAC基因打靶载体,将鉴定为阳性的载体进行扩增培养并大昔抽提.取课题组孵化至第19期的粤黄鸡胚,挑取其生殖嵴或性腺,胰酶消化法获得原始生殖细胞,并辅以饲养层和生长因子进行培养.采用脂质体介导法在原始生殖细胞内进行基因转移,对存活的细胞进行目的基因DNA水平和RNA水平鉴定. 结果:第19期鸡胚件腺原始生殖细胞体外培养48 h呈桑椹状或者椭圆状,72 h形成细胞集落,过碘酸染色呈紫红色.分子量达30 kb的大分子转基冈载体BAC-TDN-GID转染鸡胚原始生殖细胞48 h可见荧光细胞,表明转染成功.经PCR和RT-PCR鉴定,证实扩增的产物大小与预期结果大致相吻合,目的基囚hlFN已经整合进入原始生殖细胞基因组,并已开始表达.结论:实验成功将大分子BAC载体上的外源基因转染入体外分离培养的鸡胚原始生殖细胞.     

家兔酯酶多态现象及其意义

酯酶在不同家兔个体中存在不同的变异类型,即表现出多态现象(或者叫多态性)。Grunder(1965)等首先对家兔红细胞酯酶多态现象进行了研究,随后不少学者也相继开展了这方面的研究。到目前为止,已经发现家兔体内有E_(s-1);、E(s-2)、E(s-3)、Es_(t-1)、Es_(t—2),Es_(t—3)、Es-(t—4)、Es_(t—5)和Es_(—x)9个酯酶位点显现出多态性。本文谨对近年来家兔酯酶多态现象的研究情况作一介绍。     

华南黄牛血液蛋白多态性及其应用研究

本试验采用淀粉凝胶、醋酸纤维薄膜和聚丙烯酰肢凝胶电泳法测定了海南牛、雷州牛和隆林牛的血红蛋白、血清白蛋白、血液碱性磷酸酶,血清转铁蛋白、血清后转铁蛋白和血清后白蛋白等6个多态位点的基因型和基因频率。为分析华南黄牛在中国黄牛中的地位,利用有关资料,计算了我国10种黄牛间的遗传距离;用类平均法对我国的主要黄牛品种进行聚类分析,绘出10个品种的树状聚类图;用主分量分析方法绘出各品种的三维空间分布图。结果表明,华南黄牛明显与北方及中原黄牛不同,华南地区黄牛是华南地区固有的品种,由当地驯化而来,形成过程渗入其他黄牛血液的结果。     

奶蛋白浓度变异与遗传多态性及环境因素的关系

研究主要奶蛋白的变异对营养学家来说是十分有意义的,因为不同酪蛋白和乳清蛋白在其氨基酸组成上差别较大。奶蛋白的营养价值取决于奶中各种蛋白的含量。对那些关心奶蛋白特殊功能特性的食品专家来说,不同蛋白质浓度的变异对奶的加工特性影响是很大的。与大量有关遗传和环境因素影响牛奶中总蛋白量和总酪蛋白量的报告比较,