代谢酶基因GSTM1和广西人群胃癌遗传易感性的关系

目的探讨代谢酶基因GSTM1多态性与广西地区人群胃癌遗传易感性之间的相关性。方法采用PCR技术检测广西地区121例胃癌患者和138例健康人的GSTM1基因多态性的分布频率,分析其与广西地区胃癌遗传易感性之间的相关性以及与吸烟、饮酒在胃癌易感性中的交互作用。结果胃癌组GSTM1（-）基因型频率（54．5％）显著高于对照组（39．1％）（X^2=6．140,P=0．013）。携带GSTM1（-）基因型的个体患胃癌的风险是携带GSTM1（＋）基因型个体的2．13倍（95％CI=1．079-1．831,P=0．013）。在吸烟者中,携带GSTM1（-）基因型的个体较携带GSTM1（＋）基因型的个体患胃癌的风险明显增加（OR=3．247,95％CI=1．067—2．328,P=0．015）。其增加程度远远高于总的胃癌风险（OR=2．129）。在饮酒者中,携带GSTM1（-）基因型的个体较携带GSTM1（＋）基因型的个体患胃癌的风险亦明显增加（OR=3．117,95％CI=1．020—2．863,P=0．033）。其增加程度远远高于总的胃癌风险（OR=2．129）。结论GSTM1（-）基因型显著增加广西地区人群患胃癌的风险,且显著增加吸烟、饮酒者患胃癌的风险。     

高通量转录组测序技术研究过表达GPC5对A549细胞基因表达影响

背景与目的磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5（glypican-5, GPC5）是一个重要的抑癌基因,然而GPC5对肺腺癌细胞增殖能力和基因表达的影响目前研究甚少。本研究拟在肺腺癌A549细胞中过表达GPC5以研究细胞增殖能力和基因表达变化情况。方法通过慢病毒载体构建稳定过表达GPC5的A549细胞株,通过Cell Counter Kit 8(CCK8)、平板克隆和EdU实验检测细胞增殖能力;通过高通量转录组测序研究基因表达变化。结果相对于空白载体组, CCK8实验发现过表达GPC5可以明显抑制A549细胞的增殖速率;平板克隆实验结果显示,过表达GPC5之后A549细胞克隆形成能力下降（181±17vs 278±23）;EdU染色结果显示过表达GPC5后阳性染色细胞比例下降。转录组测序结果提示过表达GPC5之后,2,108个基因表达发生明显变化,其中具有正性调节细胞增殖作用的基因明显下调。结论过表达GPC5可以明显抑制肺腺癌细A549的增殖能力,而且过表达GPC5后具有正性调节细胞增殖作用的基因表达下调。     

基于TLR4/NF-κB/iNOS通路的截断逆挽方药物血清对L02细胞氧化应激损伤的影响

目的 观察截断逆挽方药物血清对D-氨基半乳糖（D-GaLN）诱导的L02细胞氧化应激损伤的影响,从TLR4/NF-κB/iNOS通路探讨其作用机制。方法 体外培养L02细胞,D-GaLN诱导L02细胞损伤模型,将细胞分为正常组、模型组、截断逆挽方药物血清组、N-乙酰半胱氨酸组。CCK-8法检测细胞存活率,丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒检测细胞MDA和GSH含量,流式细胞术检测细胞活性氧（ROS）含量,Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组L02细胞存活率明显降低（P<0.01）,ROS、MDA含量明显增加,GSH含量明显减少,TLR4、NF-κB p65、iNOS蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,截断逆挽方药物血清组L02细胞存活率明显升高（P<0.01）,ROS、MDA含量明显减少,GSH含量明显增加,TLR4、NF-κBp65、iNOS蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（P<0.01）...     

脓毒症继发急性肺损伤患者肺组织和血清细胞因子变化及临床意义

目的探讨脓毒症继发急性肺损伤患者肺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)表达及血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)水平变化及临床意义。方法 60例脓毒症患者,根据脓毒症3.0标准分为2组,30例单纯脓毒症患者为脓毒症组,30例脓毒症继发急性肺损伤患者为急性肺损伤组。采用比色法检测患者肺组织MPO和SOD活性,采用免疫组织化学法检测肺组织ICAM-1和VCAM-1表达,采用ELISA法检测血清TNF-α水平,采用单克隆抗体法检测血清NF-κB水平,并进行2组间比较。结果急性肺损伤组肺组织MPO活性[(29.21±4.28)u/g]高于脓毒症组[(21.11±3.55)u/g](P0.05),SOD活性[(101.18±14.18)u/mg prot)]低于脓毒症组[(165.83±15.08)u/mg prot](P0.05);急性肺损伤组肺组织ICAM-1[(37.93±4.05)个/视野]和VCAM-1[(33.07±4.18)个/视野]表达高于脓毒症组[(25.83±3.39)、(17.22±3.08)个/视野](P0.05);急性肺损伤组血清TNF-α[(407.21±41.28)pg/L]、NF-κB[(34.22±3.26)mg/L]水平高于脓毒症组[(218.11±29.55)pg/L、(16.07±2.03)mg/L](P0.05)。结论血清TNF-α、NF-κB,肺组织MPO活性和ICAM-1、VCAM-1表达水平增高、SOD活性降低提示有可能发生脓毒症继发急性肺损伤。     

系统性鉴定长非编码RNA MALAT1调控的微小RNA

背景与目的长非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）在肿瘤的发生、侵袭转移等过程中发挥着重要的调控作用。本研究通过实验和生物信息学手段系统性研究lncRNA MALAT1调控的微小RNA（microRNA, miRNA）。方法设计特异性敲减MALAT1的反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides, ASO）,在A549细胞中敲减MALAT1,通过TqaMan Low Density Array（TLDA）芯片研究敲减MALAT1后miRNA表达变化;使用基因集富集分析（gene set enrichment analysis, GSEA）方法分析敲减MALAT1之后差异表达基因,寻找富集的miRNA。结果 ASO有效降低了MALAT1表达,敲减MALAT1之后153个miRNA表达显著变化,其中131个miRNA表达上调,22个miRNA表达下调。在A549细胞中敲减MALAT1后,458个基因发生显著差异表达,GSEA分析发现多个miRNA在差异表达基因中被显著富集。对TLDA和GSEA数据取交集并进一步分析确认28个被MALAT1调控的miRNA。结论本研究系统鉴定了MALAT1对miRNA的调控,为进一步研究提供了基础。