DEAD?box解螺旋酶 46基因沉默对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的分析短发夹 RNA(shRNA)介导 DEAD?box解螺旋酶 46(DDX46)基因沉默对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量逆转录 PCR(RT?qPCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)测定人正常乳腺上皮细胞系和乳腺癌细胞系中 DDX46表达差异。以慢病毒介导的 shRNA敲低乳腺癌 SK?BR?3细胞中 DDX46的表达，实验分为空白对照组、阴性对照组和 sh?DDX46组。 RT?qPCR检测各组细胞 DDX46 mRNA的表达水平，蛋白质印迹法检测 DDX46蛋白和凋亡相关蛋白的表达水平，克隆形成和四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞生长增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 DDX46 mRNA在各乳腺癌细胞系中的表达量均高于正常乳腺上皮细胞(P＜0.05)。 sh?DDX46组细胞 DDX46 mRAN和蛋白表达水平均明显低于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05)。 sh?DDX46组的细胞生长增殖能力明显低于两对照组(P＜0.05)。空白对照组、阴性对照组和 sh?DDX46组 SK?BR?3细胞凋亡率分别为(4.21±1.65)%、(5.36±1.23)%和(10.21±2.39)%，与空白对照组和阴性对照组相比， sh?DDX46组 SK?BR?3细胞凋亡率明显增加(P＝0.007；P＝0.016)。沉默 DDX46后凋亡通路蛋白 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)的表达量明显降低(P＜0.05)Bcl?2相关 X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶 ?3剪切体(cleaved Caspase?3)表达明显增高(P＜0.05)。结论 DDX46在乳腺癌中高表达，沉默 DDX46基因能够抑制乳腺癌细胞增殖并促进凋亡，凋亡信号细胞，通路可能是其作用机制之一。