晚期喉咽癌术后综合治疗的疗效及生存分析

目的:评价晚期喉咽癌术后辅助综合治疗的疗效,探讨提高喉咽癌患者生活质量及生存率的方法。方法:76例男性Ⅲ～IV期喉咽癌患者接受术后辅助治疗,其中44例进行术后单纯放疗,32例接受术后同步放化疗。结果:通过Kaplan-Meier法进行生存分析,其中术后单纯放疗组患者5年总生存率为25.9%,术后同步放化疗组为27.8%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后单纯放疗组3年和5年的肿瘤无复发生存率分别为36.0%和22.5%,而术后同步放化疗组分别为68.0%和45.3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。按照NCI.CTC3.0版标准评价,两组的毒性反应主要有疲乏、白细胞减少、血小板下降、局部皮肤发红脱屑、脱发等,C3/4级的毒副反应共有14例,其中9例肺部感染,2例为放射性头痛,3例为白细胞及血小板下降。术后单纯放疗组及术后同步放化疗组的C3/4级毒副反应分别为6例和8例,两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对于晚期喉咽癌,术后同步放化疗相比于术后单纯放疗可以提高患者无复发生存率,改善生活质量,同时并没有增加患者治疗的毒副反应。     

重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a的构建与表达

目的:构建针对人鼻咽癌CNE-2Z细胞Bcl-2基因pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16.1/15a真核表达质粒,转染至CNE-2Z细胞并检测其表达.方法:采用PCR法从重组质粒PGH-16-1/15a中获得16-1/15a-X2370G全长序列,在T4 DNA Ligase连接酶作用下连接入重组载体pENTR-CMV-EGFP.重组质粒经酶切及测序鉴定.将构建成功的重组质粒转染入人鼻咽癌细胞株CNE-2Z,用荧光显微镜观察转染结果.结果:重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a经酶切与测序证实构建成功,转染至鼻咽癌CNE-2Z细胞后,荧光显微镜观察证实该重组质粒能在CNE-2Z中表达.结论:成功构建真核表达质粒DENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a,并在鼻咽癌CNE-2Z细胞中得到表达,可用于进一步检测其抗肿瘤机制.     

复发鼻咽癌差异基因分析及染色体定位初步研究

目的 通过基因芯片和生物信息学来筛选复发鼻咽癌(recurrent nasopharyngeal carcinoma,rNPC)差异基因及染色体定位和功能分析.方法 选择初发鼻咽癌(primary nasopharyngeal carcinoma,pNPC)和rNPC,应用Affymetrix Gene1.0 ST芯片筛选差异基因;应用生物信息学对差异基因进行染色体定位和功能分析.结果 差异基因共44个,其中下调基因36个,上调基因8个.基因功能分类显示,下调基因大部分属于酶活性基因(10个,27.8%),其次为钙黏合基因(7个,19.4%)、蛋白结合基因(5个,13.9%),这3类基因占了下调基因总数的61.1%,另外,受体活性基因(4个,11.1%),转录因子基因和三磷酸腺苷黏合基因各2个(各占5.6%),细胞外基质黏合基因和生长因子黏合基因各1个(各占2.8%),4个基因的功能未知(11.1%);上调基因中,3个基因的功能未知(37.5%),酶活性基因(2个,25.0%),受体活性、钙黏合、电压门压通道调控基因各1个,各占12.5%.这些差异基因分布在大多数染色体上,主要分布在1和17号染色体上.1号染色体上包含10个基因(22.7%),17号染色体包含5个基因(11.3%).结论 差异基因分布在大多数染色体上,但主要分布在1和17号染色体上,酶活性、钙黏合及蛋白结合基因这三类差异基因可能在rNPC中扮演着重要的角色,需要进一步深入研究.     

软腭影像学测量与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的关系

目的:研究上气道CT矢状位软腭影像学测量及其与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的关系.方法:分析了自2008年11月至2009年8月52例OSAHS患者腭咽成形术(UPPP)术前接受上气道CT检查的资料,用图像处理软件PhotoshopCS2选择上气道CT矢状位观测软腭长度、厚度,对测量结果与30名正常健康人测量值进行比较;并对42例以腭咽水平狭窄为主OSAHS患者和10例以喉咽水平狭窄为主OSAHS患者上气道CT矢状位软腭影像学测量值进行分析、比较.结果:OSAHS患者软腭CT测量的厚度明显增厚,长度却未见明显增长;腭咽水平狭窄为主,OSAHS患者软腭CT测量的厚度明显大于喉咽水平狭窄为主的OSAHS患者,而长度亦未见明显差异.结论:OSAHS患者软腭影像学测量的厚度与OSAHS关系密切.     

miR-15a/16-1慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的：构建miR-15a/16-1过表达慢病毒载体,并对其进行病毒包装、鉴定、滴度测定与感染靶细胞。方法：利用PCR法钓取miR-15a/16-1序列片段;将目的基因miR-15a/16-1克隆到慢病毒载体LV3中,经双酶切及测序鉴定并大量抽提;利用脂质体将重组质粒和包装质粒pGag/Pol、pRev、pVSV-G共转染293T细胞包装产生慢病毒。收集病毒悬液梯度稀释,感染293T细胞进行病毒滴度检测;将所得慢病毒感染靶细胞。结果：酶切与测序结果证明成功构建重组质粒,并成功包装成慢病毒,实验组病毒滴度为1×10^9 TU/ml,对照组病毒滴度为2×10^9 TU/ml。慢病毒成功感染靶细胞,其转染效率可达到80%左右。结论：成功构建miR-15a/16-1慢病毒表达载体,可获得高效miR-15a/16-1的慢病毒颗粒。     

慢性鼻-鼻窦炎患者的肺功能及其相关性分析

目的探讨慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者的肺功能及其相关性。方法对43例慢性鼻、鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）（CRSwNP组）、17例慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉（CRSsNP）（CRSsNP组）及50例非CRS患者（对照组）进行肺功能检查,比较3组差别。CRSwNP和CRSsNP组患者进行支气管激发或舒张试验,应用视觉模拟评分、鼻腔-鼻窦结局测试20条、Lund-MackayCT评分、Lund-Kennedy内镜评分等评估疾病严重程度;利用直线或秩相关与多元线性回归分析其肺功能与上述指标的相关性。结果CRSwNP组患者第1秒用力呼气量（FEV1）、用力呼气中段流量（FEF25-75）显著高于CRSsNP和对照组患者（P〈0．05）,而CRSsNP和对照组问差别无统计学意义。然而峰值呼气流速（PEF）在3组间差异无统计学意义。3组中吸烟和不吸烟患者间3项指标差异无统计学意义。相关分析显示,CRSwNP组患者中FEV,与外周血嗜酸性粒细胞计数（PEC）、病程呈负相关（rl=-0．351,P1：0．021;r2=-0．343,P2=0．024）,PEF与病程呈负相关（r=-0．330,P=0．031）,而FEF25-75与上述指标无显著相关。CRSsNP组中FEV1、PEF、FEF25-75,与上述指标均无显著相关。CRSwNP组中支气管激发和舒张试验阳性率较低,分别为11．11％和0．00％,CRSsNP组中均为0．00％。此外,多元线性回归分析显示CRSwNP组中支气管激发或舒张试验前后FEV1变异率与PBEC呈线性相关（R2=0．318,P〈0．05）,CRSsNP组中FEV1变异率与年龄、PBEC、病程、鼻窦手术次数呈线性相关（R2=0．893,P〈0．05）。结论CRS引起最大通气及小气道功能损害与鼻息肉的存在有关,与吸烟无关,CRSwNP患者中通气功能损害与PBEC、病程正相关,且PBEC是FEV,变异率的独立预测指标。而CRSsNP患者中肺功能与上述指标无显著相关,但年龄、PBEC、病程及鼻窦手术次数是其FEV,变异率的独立预测指标。     

国产盐酸奥洛他定口服制剂质量评价

目的评价国产盐酸奥洛他定口服制剂的质量。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定奥洛他定制剂中的有关物质,控制 4个特定杂质,并与原研制剂的杂质谱对比研究。结果国产盐酸奥洛他定片的杂质种类、数量均不大于原研制剂。但胶囊剂杂质种类、数量均大于原研制剂。结论基于杂质谱等方面研究,国产盐酸奥洛他定片质量好。     

初发鼻咽癌差异基因的染色体定位及功能分析

目的利用基因芯片技术探索初发鼻咽癌（primary nasopharyngeal carcinoma,pNPC）与鼻咽黏膜慢性炎症组织（chronic nasopharyngitis tissue）差异基因的染色体定位和功能分析。方法用Affymetrix Gene1.0ST芯片检测pNPC与鼻咽黏膜慢性炎症组织基因表达谱差异,并利用生物信息学方法对差异基因进行染色体定位和功能分析。结果差异倍数3倍以上共有102个基因,其中表达上调25个,表达下调77个;差异基因染色体定位分析,发现5个差异基因未知其定位,其余97个差异基因在1号染色体上分布最多,包含16个,其次为3号染色体,包含13个;从差异基因功能分类看,属于酶活性基因最多,其余依次为蛋白结合、免疫、钙黏合等,以上4大类共占差异基因总数65.6%。结论 pNPC差异基因散在分布在各染色体,以1、3号染色体最多;4大类（酶活性、蛋白结合、免疫相关、钙黏合）相关基因异常在癌变过程中发挥重要作用。     

鼻内镜下中下鼻道上颌窦联合开窗术治疗真菌球性上颌窦炎的随机对照试验

目的 比较鼻内镜下上颌窦中鼻道开窗术及中、下鼻道上颌窦联合开窗术治疗真菌球性上颌窦炎的临床疗效.方法 采用前瞻性随机对照试验方法,将2010年1月至2011年3月在温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科住院的80例被确诊为真菌球性上颌窦炎患者分为两组,每组各40例.试验组采用鼻内镜下中、下鼻道上颌窦联合开窗术治疗,对照组采用鼻内镜下上颌窦中鼻道开窗术治疗,并随访至2013年2月28日.术前主观评估采用VAS、SNOT-20问卷调查;客观评估采用Lund-Mackay CT评分和Lund-Kennedy评分.并在术后3月、6月、1年及2年时对两组患者再次进行相同指标评估.结果 试验组术后6月、1年及2年的VAS评分、SNOT评分及Lund-Kennedy评分结果均明显优于对照组,其差异有统计学意义(P＜0.05).对照组术后1年Lund-Mackay评分高于试验组(P＜0.0l).根据海口标准对手术疗效进行评估,试验组治愈36例,好转4例,总有效率为100.0％,对照组治愈28例,好转7例,总有效率为87.5％,试验组的疗效优于对照(P=0.021).结论 鼻内镜下上颌窦中、下鼻道联合开窗术治疗真菌球性上颌窦炎的临床疗效明显优于鼻内镜下上颌窦中鼻道开窗术,且复发率更低.