抗醛糖还原酶单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的:制备抗醛糖还原酶(AR)的单克隆抗体(mAb),并与本室制备的抗醛糖还原酶相似蛋白(ARL-1)mAb进行比较。方法:经RT-PCR获得AR基因,将基因插入pGEX-4T-1(His)6C中,构建重组质粒pGEX-4T-1(His)6C-AR,以重组质粒转化E.coliRosetta诱导表达GST-AR蛋白。以纯化的GST-AR蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb。应用间接ELISA和Western blot方法对mAb进行筛选和鉴定。使用Clustalx和Antheprot软件,比较AR与ARL-1的同源性,表达GST-dAR[80~142氨基酸(aa)],与ARL-1差异较大;并分析AR的抗原性,表达GST-dA1(1~79aa)、GST-dA2(80~99aa)、GST-dA3(111~142aa)、GST-dA4(143~316aa)。利用AR全长及截短蛋白,采用Western blot分析制备的抗AR mAb识别AR抗原的部位。结果:获得3株稳定分泌抗AR mAb的杂交瘤细胞系ARB3、AR7B3G4和ARF10。3株抗GST-AR的mAb均为IgG1(κ型),腹水mAb效价为1∶4×105,细胞培养上清mAb效价为1∶1×104,3株mAb均可与胎盘组织中的AR蛋白起反应,而与GST-ARL-1和GST蛋白无交叉反应。它们分别为抗GST-dA1、GST-dA3和GST-dA4蛋白的mAb。结论:成功地制备了3株特异性抗AR mAb,可分别识别AR的1~79、111~142、143~316位氨基酸。将它们与抗ARL-1mAb联合应用,将有助于进一步研究AR与ARL-1蛋白的功能,并为深入探讨AR、ARL-1与相关疾病的关系及进行大规模的流行病学调查提供了有力的工具。     

云南不明原因猝死病区人群社会支持状况与生命质量的关系

目的 探讨猝死病区人群社会支持与生命质量的关系,为制定提高和改善病区人群生命质量的措施提供科学依据.方法 采用横断面入户调查方式,利用社会支持评定量表对病区人群进行社会支持调查,利用世界卫生组织生命质量评定量表简表对病区人群进行生命质量调查.结果 云南猝死病区人群的社会支持总分及主观支持、客观支持维度得分[（40.85±8.34）分、（9.58±3.58）分、（23.86±4.87）分]均低于对照组相同维度得分[（41.82±7.12）分、（10.47±3.26）分、（24.51±4.68）分]（均P＜0.05）.病区人群社会支持利用度[（7.41±2.67）分]与对照人群社会支持利用度[（6.84±2.56）分]之间差异没有统计学意义（P＞0.05）.用多重线性回归控制家庭人均收入等混杂因素后,社会支持总分、主观支持、客观支持及支持利用度分别与生命质量总分及各维度得分均呈正相关关系（社会支持总分与生命质量各维度的相关系数分别为：0.30,0.11,0.29,0.28,0.36;客观支持得分与生命质量各维度的相关系数分别为：0.15,0.05,0.13,0.14,0.19;主观支持得分与生命质量及各维度的相关系数分别为：0.18,0.06,0.21,0.23;支持利用度与生命质量各维度的相关系数分别为：0.11,0.05,0.10,0.09,0.11）（均P＜0.05）.结论 云南猝死病区人群获得社会支持较少,且对社会支持的利用度低,使得病区人群生命质量较差,要改善这一状况,必须在提供更多社会支持的基础上,加强对社会支持的利用.     

人精子蛋白17基因在大肠杆菌中的表达

目的: 克隆人精子蛋白17(hSp17)基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白. 方法: 用RT-PCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET-28a( )/hSp17,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,用特异性hSp17的mAb进行Western blot鉴定,Ni-NTA His-Bind树脂纯化重组蛋白. 结果: 克隆到hSp17 cDNA(456 bp)并经过DNA测序证实,表达和纯化得到重组蛋白hSp17(表观Mr为27 500),并经过Western blot鉴定. 结论: 成功克隆和表达hSp17 基因.     

5‘—非编码区型特异性引物检测HCV基因型

我们探索建立一种ＨＶＣ基因分型方法,用５’非编码区（５’ＮＣＲ）１,２,３,１ｂ型特异引物,应用逆转录套式ＰＣＲ,对ＨＣＶＲＮＡ阳性血汪有进行分型,对６５份ＨＣＶＲＮＡ阳性血清的分型率为９０．８％（５９／６５）。５９例中混合感染７例,１型５０例,其中１ｂ亚型４６例,３型２例。从而认为：所用的型特异性引物可成功的对ＨＣＶ基因分型,分型结果证实南京市ＨＣＶ流行优势株为１ｂ亚型。     

6号染色体杂合性丢失和肿瘤

6号染色体是肿瘤杂合性丢失好发的染色体之一 ,是参与肿瘤发生发展机制的重要染色体。本文通过对几种不同肿瘤中 6号染色体杂合性丢失的分析 ,阐述了几个频繁丢失的“热点”区域 ,并探讨了它们与肿瘤发生发展的关系     

急性早幼粒白血病细胞ATRA耐药株HL-60R、NB4R的构建及鉴定

目的：构建急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60、NB4的全反式维甲酸耐药株HL-60 R、NB4 R,并对其生物学性状进行鉴定。方法：以全反式维甲酸（ ATRA ）为诱导药物,采用浓度递增间歇诱导法构建HL-60、NB4细胞相应的ATRA耐药株。 CCK8法鉴定其ATRA耐药性,并检测耐药细胞株的生长曲线及多药耐药性。结果：成功构建了ATRA耐药细胞株HL-60 R、NB4 R,并发现与亲代细胞相比,其生长增殖速度减慢,群体倍增时间延长,且对其它多种化疗药物产生一定程度的交叉耐药。结论：成功构建的耐药细胞系HL-60R、NB4R为急性早幼粒细胞白血病多药耐药机制的进一步研究奠定了基础。     

中医医院管理模式变革与发展战略探讨

随着市场经济体制的建立,在医疗市场竞争日趋激烈又要体现公立医院的公益性的情况下,中医医院如何适应新形势,在生存中求发展?改变传统的医院管理模式和运行机制势在必行.本文重点介绍医院管理模式变革的具体措施,就医院持续发展战略作进一步探讨.     

如何帮扶乡镇卫生院

"花最少的钱,走最短的路,享受最好的服务"是雁江区卫生局为农村卫生工作设计的美好蓝图.蓝图与现实之间的最大障碍是乡镇卫生院服务能力低下,不能满足当地百姓的基本医疗需求.为此,近年来雁江区中医院在区卫生局的正确领导下,一直把提高乡镇卫生院的医疗技术水平作为农村卫生工作的重中之重,探索出了一条独其匠心的扶持之路.