CMVpp65基因修饰的树突状细胞刺激自身T细胞活化

巨细胞病毒（CMV）感染易发生于慢性移植物抗宿主病（cGVHD）患者，其特异性免疫依赖于T细胞活性。本研究探讨CMVpp65基因修饰的树突状细胞（DC）对自身T细胞的活化作用。采用具有高效转染非分裂细胞的慢病毒系统将CMV全长pp65基因导入鼠源性DC；采用CpG—DNA诱导DC细胞成熟；采用流式细胞术及免疫荧光方法测定T淋巴细胞抗原及IFNγ表达。结果表明：慢病毒感染DC的感染复数（multiplicity of infection，MOI）为50，最佳感染效率可达30％-40％；表达pp65基因的成熟DC能刺激自身naiveT细胞表达CD69；表达PP65蛋白的成熟DC能够刺激自身CD4^＋或CD8^＋T细胞分泌IFNγ。结论：pp65基因修饰、CpG—DNA诱导成熟的DC能体外激活CMV特异性T淋巴细胞。     

抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体8F8轻链可变区基因的克隆及序列分析

本文用基因工程技术,从8F8杂交瘤细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因V_L,并对8F8单抗V_L的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。 1 杂交瘤细胞系 抗HFRSV血凝素McAb 8F8株培养于RPMI-1640培养液(含20％小牛血清)中。     

抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体8F8轻链可变区基因的克隆和序列分析

作者从抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体(单抗)8F8杂交瘤细胞提取RNA,逆转录成cD-NA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因(V_L)。并对8F8单抗V_L的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。     

抗HFRSV血凝素3G1单克隆抗体重链可变区基因的表达及初步鉴定

本文利用基因重组技术,在成功地克隆抗HFRSV血凝素抗原3G_1单抗重链可变区基因的基础上,对其在原核表达单域抗体进行了初步尝试。将3G_1单抗重链可变区基因亚克隆到原核高效表达质粒pBV220中,经转化E coli DH5a受体菌,42℃诱导6h后,在E、coli中有分子量约15kD的3G_1重链可变区基因产物表达。经测得表达产物占菌体总蛋白量的10％。IFA和ELTSA阻断试验表明,重组菌裂解上清对亲本鼠3G_1完整单抗与HFRSV抗原的结合有较明显的阻断作用。从而初步表明3G_1单抗重链可变区基因在E、coli DH5a中能表达有抗原结合活性的单域小抗体     

单克隆抗体3D8可溶性单链抗体的表达

单克隆抗体３Ｄ８可溶性单链抗体的表达闫岩，汪美先，徐志凯，尹文，汪力亚，王海涛，祝道成，张劲翼（第四军医大学微生物学教研室，西安７１００３２）３Ｄ８是本室研制的具有高血凝抑制活性、高中和活性和高保护性的抗肾综合征出血热病毒血凝素小鼠单克隆抗体。作者已...     

c—myc,c—erbB—2等原癌基因在人甲状腺癌中的高水平表达

用~(32)P-dATP标记的c-myc、c-erbB-2、v-sis DNA探针,与15例人甲状腺癌、3例甲状腺瘤、1例甲状腺癌旁组织及5例正常甲状腺组织的细胞总RNA打点杂交表明:所有标本均有c-myc、c-erbB-2基因的表达,其中9例甲状腺癌c-myc RNA较正常组织增高3～11倍,7例甲状腺癌c-erbB-2表达增高10～50倍,未检测至v-sis RNA。c-myc、c-erbB-2探针与上述组织DNA Southernblot杂交表明:4例甲状腺癌出现c-myc重排,其中1例伴有明显扩增。未发现c-erbB-2扩增与重排。提示:c-myc、c-erbB-2的激活可能与甲状腺癌的发生有关。     

应用PCR技术特异扩增抗HFRS病毒血凝素McAb8F8V_H基因的克隆和序列分析

自本室近期克隆出抗肾综合征出血热病毒(HFRSV)血凝素单克隆抗体(McAb)3 G1重链可变区(V_H)基因,并进行了表达和鉴定后;我们又选用对野鼠型和家鼠型HFRSV感染鼠均具有保护作用的抗血凝素McAb 8F8株,采用聚合酶链反应(PCR)技术,克隆了8F8 McAb V_H基因,以期制备出对家/野鼠HFRSV感染均     

抗癌胚抗原鼠/人嵌合抗体的体内及体外活性

由于鼠源性McAb在人体长期反复应用可产生人抗小鼠抗体(HAMA),近年来人们采用构建鼠/人嵌合抗体以降低鼠McAb的免疫原性。本文作者用基因工程方法构建了抗癌胚抗原(CEA)鼠/人嵌合抗体基因,并在小鼠骨髓瘤细胞中表达出嵌合抗体。活性检测结果表明;所制备的嵌合抗体既保持了亲代鼠McAb的特异性亲和力。又具有更强的体内及体外生物学活性。