川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型，模型构建成功后，将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况，治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿，收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标，收集肾脏观察肾脏病理学，同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常，无明显病理特征；模型组出现肾小球增大，系膜和肾间质纤维组织增生；贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比，模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005)；SOD和GSH明显降低(P＜005)，与模型组相比，贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005)，SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比，模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005)；与模型组相比，贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能，提高血清和肾脏抗氧化指标，同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达，最终保护糖尿病肾脏损害。     

狼疮性肾炎小鼠肾脏组织中Wnt3a、β-catenin基因的异常表达

目的:探索Wnt3a、β-catenin基因在系统性红斑狼疮小鼠(MRL/lpr小鼠)狼疮性肾炎肾脏组织中的表达。方法:购买6周龄MRL/lpr小鼠15只作为模型组,C57BL/6雌性小鼠15只作为对照组,两组小鼠16周龄后,用代谢笼法收集小鼠24 h尿,在麻醉下,摘眼处死小鼠,留取小鼠血,用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)小鼠血液中抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)、抗双链DNA抗体(anti-double stranded DNA,ds DNA)浓度,应用生化仪测定小鼠24尿蛋白。取肾脏组织行HE染色、PASM染色、Masson染色,观察两组小鼠肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察两组小鼠肾脏组织中免疫复合物Ig G的沉积。运用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)技术测定模型组和对照组小鼠肾脏组织中Wnt3a及β-catenin基因的表达情况。结果:与对照组比较,模型组小鼠肾脏组织中肾小球系膜细胞增生、炎症细胞浸润,肾小球中可见免疫复合物Ig G沉积,Wnt3a及β-catenin基因表达升高(P 0. 05)。结论:狼疮肾炎小鼠组织中Wnt/β-catenin信号通路可能处于异常活化状态,Wnt/β-catenin信号通路可能参与了狼疮肾炎的发生发展。     

单孔腹腔镜胆囊切除术在有腹部手术史患者中的应用

目的:探讨Hasson法建立气腹行单孔腹腔镜胆囊切除术在有腹部手术史患者中的应用优势及操作技巧。方法:回顾分析2011年11月至2018年10月为117例合并腹部手术史患者行单孔腹腔镜胆囊切除术的临床体会。结果:113例成功完成手术,4例因腹腔内粘连严重无法显露术野及胆囊三角中转开腹,成功率96.6%。术后患者恢复良好,切口美观隐蔽,无网膜损伤及相关并发症发生。结论:Hasson法建立气腹行单孔腹腔镜胆囊切除术,可灵活选取切口部位直视下开腹,避免了粘连肠管网膜的损伤,有效松解腹腔粘连带,对于有腹部手术史的胆囊良性疾病患者是安全、可行、微创、美观的治疗选择。     

胆总管探查27例阴性原因的分析

目的：探讨胆总管探查手术中探查阴性的原因。方法：回顾135例胆囊切除加胆总管探查或胆总管切开探查加“T”管引流术中27例探查阴性的病例的原因。结果：多种原因引起黄疸或B超误诊为胆总管结石是导致探查阴性的主要原因。结论：ERCP、PTC、术中胆囊造影和MRCP等影像学检查结合运用对胆总管结石的诊断准确率高，可以减少探查阴性的发生。     

9 Survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞的抑制作用

目的:探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人肝癌细胞HepG2的抑制作用。方法:采用免疫组织化学法检测肝细胞癌（HCC）组织中survivin的表达。采用脂质体介导survivin ASODN体外转染人肝癌细胞株HepG2，Western blot检测细胞survivin蛋白的表达，FCM检测细胞的凋亡率，观察细胞在软琼脂中的集落形成能力。建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察survivin ASODN的体内抑癌作用。 结果:（1）肝癌组织中survivin表达阳性率为75.8％(25/33)，明显高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.01);（2）survivin ASODN体外转染可明显下调HepG2细胞survivin蛋白表达，ASODN组HepG2细胞凋亡率明显高于空白对照组和SODN组(P<0.01)，ASODN组HepG2细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于空白对照组和SODN组(P<0.01);（3）ASODN组瘤体生长速度较空白对照组和SODN组明显减慢(P<0.01)，ASODN组瘤体重量较空白对照组和SODN组明显减轻(P<0.05)。结论:Survivin在HCC组织中高表达;survivin ASODN可以诱导HepG2细胞凋亡，在体外实验和动物实验中对HepG2细胞生长都有抑制作用。     

两孔法胸腔镜治疗自发性气胸174例报告

自发性气胸是电视胸腔镜手术（video—assisted thoracoscopic surgery，VATS）的适应证之一，2001年3月～2006年1月，我们采用两孔法胸腔镜手术治疗自发性气胸174例，手术效果良好，现报道如下。     

不阻断肝门的肝切除术63例治疗体会

回顾性分析不阻断肝门行肝叶切除治疗63例良恶性肝病患者的临床资料，对术中出血量、手术时间、术后肝功能和并发症与阻断肝门的患者进行对比分析，结果示未阻断肝门组均能成功完成手术，术中出血量、手术时间和并发症与阻断肝门组无明显差别（P＞0.05）。作者认为，只要病例选择适当，术者切肝技术熟练，大部分病例不需阻断肝门亦能顺利完成肝切除手术。     

输尿管肾镜气压弹道碎石治疗输尿管结石的并发症及防治措施

目的探讨输尿管肾镜气压弹道碎石术治疗输尿管结石并发症的预防和处理措施。方法分析419例输尿管肾镜气压弹道碎石术患者病案资料，统计术中、术后发生的各种并发症及其处理方法。结果术中输尿管穿孔11例（0．26％），8例改开放手术，3例成功留置双J管保守治疗，随访1～3个月，平均1．5个月，3个月内结石均排净；术后肉眼血尿117例（27．9％），应用止血药物3d后多自行停止；术后腰痛57例（13．6％），其中肾绞痛7例（1．67％），分别针对引起腰痛的原因进行处理而好转；感染10例（2．4％），经抗感染治疗、拔除双J管等恢复；结石残留40例（9．5％），保留双J管行体外震动波碎石术治愈。44例并发急性梗阻性肾功能不全患者碎石后即进入多尿期，2周后复查肾功能恢复正常。结论输尿管肾镜气压弹道碎石术严重并发症较少见，仔细操作可预防并发症的出现，且绝大多数可经保守治疗得到解决。