垂体腺瘤中雌激素受体基因的表达

目的　研究人垂体腺瘤中雌激素受体基因 (estrogenreceptorgene ,ER)mRNA与蛋白水平的表达及其与垂体腺瘤生物学特性的关系。方法　用免疫组化法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR法 ) ,检测 6 0例各种类型垂体腺瘤标本中ER蛋白的表达 ,比较不同类型垂体腺瘤ER蛋白表达的差异及ER蛋白表达与mRNA表达的差异。结果　泌乳素腺瘤、促性腺激素细胞瘤中均有ER蛋白表达 ,其表达与mRNA表达一致 ;无功能腺瘤中 2例有ER蛋白表达 ,其蛋白表达与mRNA表达不一致 ;其它类型垂体腺瘤未发现ER基因表达。结论　ER基因表达的检测可有助于评价PRL腺瘤的增殖活性及筛选抗雌激素治疗对象。ER基因的表达异常可能与PRL腺瘤及促性腺激素细胞瘤的发生、发展有关     

FISH法动态观察慢性粒细胞白血病移植治疗后早期Ph阳性细胞

目的 将间期荧光原位杂交（FISH）技术应用于慢性粒细胞白血病（CGL）移植后疗效判断及体内残留Ph阳性细胞的检测。方法 应用FISH、细胞遗传学技术、RT－PCR技术对10名正常人、7例未治疗CGL患者和11例移植后CGL患者体内Ph阳性细胞进行检测。结果 对11例CGL患者移植后1周－6年不同时期的40个样本的实验研究发现：①移植后1个月内FISH及RT－PCR技术较之常规染色体检查更易检测出Ph阳性的样本,但6个月后RT－PCR更敏感;②残留Ph阳性细胞随移植后时间延长呈线性递减,转阴的中位时间为移植后第57天（22－170天）;③1例复发患者移植后1个月Ph阳性残留细胞为33．65％,半年后复发,而染色体检查于移植后6个月方发现异常,RT－PCR检测结果持续阳性,无法观测其变化。结论 间期FISH检测比染色体核型、RT-PCR更能准确地评价移植后体内残留的白血病细胞的负荷量;采用FISH法动态观察残留白血病细胞的变化,可以判断疗效,发现早期复发,及时进行干预性治疗。     

应用间期荧光原位杂交技术评估干扰素治疗慢性粒细胞白血病的疗效

目的　探讨间期荧光原位杂交技术 (FISH)检测慢性粒细胞白血病 (CML)干扰素 (IFN)治疗后体内残留Ph阳性细胞的可行性。方法　应用间期FISH对 7例未治疗CML患者和 17例IFN α 2b长期治疗CML患者检测体内Ph阳性细胞变化情况。结果　正常对照组假阳性率为 ( 3 87± 0 94 ) % ,确定正常值为小于 6 68% (x± 3s)。未治疗组Ph阳性细胞平均为 89 2 1%。干扰素治疗组Ph阳性细胞平均为 4 4 86% ,与未治疗组相比无显著性差异 ( P >0 0 5 )。细胞遗传学有效患者 (CGR 4例 ,PGR 2例 ,共 8个标本 )Ph阳性细胞平均为 2 6 3 0 % ,与未治疗组相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。而且Ph阳性细胞的减少与INF用药总剂量具有相关性 (r =-0 666,P =0 0 0 2 )。结论　间期FISH检测比染色体核型、RT PCR技术更能准确地评价干扰素治疗后体内存有的白血病细胞的负荷量 ,评价干扰素治疗CML的疗效     

L615小鼠白血病阿糖胞苷耐药模型的建立及其生物学特性

阿糖胞苷(Ara-C)是治疗急性粒细胞白血病的首选药物,但临床相当高比例的病人对Ara-C产生耐药性,致使化疗失败。因此,我们采用逐渐提高药量和连续传代的方法,建立了L615小鼠白血病体内Ara-C耐药模型(L615/Ara-C),最终耐药剂量稳定在150mg/kg。其生物学特性表现为L615/Ara-C小鼠经Ara-C治疗比L615小鼠经Ara-C治疗组存活时间明显缩短,流式细胞术检测证明G_0/G_1期细胞增加,S期细胞减少。有意义的是L615/Ara-C细胞对辐射的敏感性比L615细胞增高。     

骨髓增生异常综合征造血细胞生物学指标检测的意义

目的 研究骨髓增生异常综合征（MDS）造血细胞的生物学特性改变及与疾病进展的关系。方法对37例MDS患者骨髓细胞进行染色体核型分析、CFU－GM体外半固体琼脂培养、增殖细胞核抗原（PCR）表达、细胞周期分析以及造血克隆性检测,观察其对MDS疾病进展的关系。 结果 （1）MDS染色体异常检出率31％,随访过程中染色体核型正常的9例中有2例,异常的5例中有3例转化为急性髓系白血病（AML）。（2）MDS患者骨髓细胞体外CFU－GM集落产率减少、集簇产率增加。43％的患者CFU－GM产率极低或无生长。随访中9例CFU－GM集簇生长为主的患者中6例疾病进展或转化为AML;6例集落、集簇不生长和3例生长基本正常者中仅1例转化为急性白血病。（3）MDS患者骨髓细胞PCNA表达明显升高,RAEB／RAEB－t的PCN表达较RA／RAS高。（4）MDS患者骨髓细胞溴脱氧尿嘧啶（BrdU)标记指数减低（5．07％）,DNA合成期时间和潜在倍增时间延长,分别为8．57h和8．69d,并与病程进展关。（5）7例女性HUMARA等位基因为杂合子的RA患者中,2例为多克隆造血,5例为单克隆造血。3例RAEB和1例MDS／AML均为单克隆造血。结论 随着MDS病程进展,骨髓中原始细胞增多,造血细胞生物学特性呈现以下的演变趋势,造血转变为单克隆性;体外培养CFU－GM接近于白血病性生长特征;PCNA表达增高;细胞周期延长。