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目的 探讨负载超顺磁性氧化铁(SPIO)纳米囊泡体外标记人结肠腺癌细胞株(Lovo)进行MR成像的可行性.方法 制备负载SPIO纳米囊泡,培养人Lovo细胞.分别取含有5×105、1×106的细胞量与含不同量(50μl和500μl)的负载SPIO纳米囊泡的培养液共同培养,经培养1、3和6 h后,分别取所培养的细胞进行电镜超微结构观察和MR T1WI、T2WI成像,未标记的Lovo细胞株为对照组.结果 Lovo细胞与负载SPIO纳米囊泡培养后6 h,电镜下见SPIO进入Lovo细胞的细胞质内.MR T1WI图像上,实验组各组间、实验组与对照组间的信号无明显差异.T2WI图像上,培养1 h后,实验各组、实验组与对照组间信号无明显差异 培养3 h后,500μl SPIO标记1×106 Lovo细胞组出现轻度信号下降 培养6 h后,实验各组的信号均出现明显下降.结论 负载SPIO纳米囊泡可以标记人Lovo细胞,应用MR可以对其进行监测. 相似文献
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目的 制备集靶向siRNA传递及MRI显像功能于一体的多功能靶向纳米载体,并验证其对神经母细胞瘤的靶向性及MRI示踪性.方法 制备PEG-PEI-SPION,scAbGD2 -PEG-PEI-SPION并检测其基本特性.利用凝胶阻滞检测纳米载体与siRNA的复合能力;以CLSM及MRI验证纳米载体的靶向性.结果 PEG-PEI-SPION,scAbGD2-PEG-PEI-SPION平均粒径分别为(60.0±2.3)nm及(90.0±7.8)nm.氮磷比(N/P)≥2.2时siRNA与PEG-PEI-SPION,scAbGD2 -PEG-PEI-SPION完全复合.CLSM实验及MRI结果证实scAbGD2-PEG-PEI-SPION具有靶向性.结论 scAbGD2-PEG-PEI-SPION对神经母细胞瘤具有靶向传递siRNA及MRI显影的功能. 相似文献
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目的 探讨MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物治疗人胃癌裸鼠移植瘤的疗效.方法 采用裸鼠BGC-823胃腺癌动物模型,每组6只,随机分配至设立的生理盐水对照组、载体材料组、紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组、MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组.采用尾静脉给药方式,动态观察并测定肿瘤的体积、瘤质量抑瘤率,评价治疗效果,并观察实验期间动物的全身情况及相对体质量变化,评价毒副作用.结果 MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组人胃癌移植瘤表现出明显的体积抑制和瘤质量抑制,抑瘤率分别为84.6%和84.5%,显著高于紫杉醇常规药物组(45.1%,48.7%)和非靶向紫杉醇纳米药物组38.7%,42.2%),而且MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的小鼠体质量与其它各组比较相对平稳,且饮食活动正常,对正常组织的毒副作用明显减轻.结论 MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物具有良好的高效低毒体内抗肿瘤作用,作为一种新型药物载体显示了良好的应用前景. 相似文献
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目的探讨MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物治疗人胃癌裸鼠移植瘤的疗效。方法采用裸鼠BGC-823胃腺癌动物模型,每组6只,随机分配至设立的生理盐水对照组、载体材料组、紫杉醇常规药物组、非靶向紫杉醇纳米药物组、MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组。采用尾静脉给药方式,动态观察并测定肿瘤的体积、瘤质量抑瘤率,评价治疗效果,并观察实验期间动物的全身情况及相对体质量变化,评价毒副作用。结果MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组人胃癌移植瘤表现出明显的休积抑制和瘤质量抑制,抑瘤率分别为84.6%和84.5%,显著高于紫杉醇常规药物组(45.1%,48.7%)和非靶向紫杉醇纳米药物组38.7%,42.2%),而且MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物组的小鼠体质量与其它各组比较相对平稳,且饮食活动正常,对正常组织的毒副作用明显减轻。结论MG7抗体靶向紫杉醇纳米药物具有良好的高效低毒体内抗肿瘤作用,作为一种新型药物载体显示了良好的应用前景。 相似文献
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目的 检测肝细胞靶向性Gal-PEG-PEI纳米基因载体介导psiRNA转染HepG2细胞的效率.方法 纳米粒径仪和透射电镜测定Gal-PEG-PEI/psiRNA复合物的粒径和形态,转染HepG2细胞,48 h后用流式细胞仪测定转染效率.转染前加入1 mg半乳糖观察其半乳糖竞争拮抗结果.结果 Gal-PEG-PEI/psiRNA复合物的粒径随N/P的增大而减小,最小粒径为81.1 nm;Gal-PEG-PEI载体的转染效率为(37.34±2.50)%,明显高于PEG-PEI、LipofectamineTM 2000及裸psiR-NA;加入竞争拮抗剂半乳糖后Gal-PEG-PEI的转染效率下降至3.60%.结论 Gal-PEG-PEI纳米基因载体对HepG2细胞有较高的转染效率,具有良好的肝细胞靶向性. 相似文献
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背景:对聚乙二醇-聚乙烯亚胺进行半乳糖化修饰,可使其成为具有肝细胞靶向性的纳米基因载体半乳糖化聚乙二醇-聚乙烯亚胺[Galactosylated poly(ethylene glycol)-graft-polyethylenimine, Gal-PEG-PEI]。
目的:合成Gal-PEG-PEI,考察其基本理化特征,为下一步的转染研究提供参考。
设计、时间及地点:对比观察基因工程实验,于2007-10/2008-06在中山大学生物医学工程中心完成。
材料:两步法合成Gal-PEG-PEI。
方法:应用纳米粒径-zeta电位仪、透射电镜、凝胶阻滞实验和EB结合实验测定Gal-PEG-PEI与psiRNA复合物的理化性质,CCK-8法检测其细胞毒性,纳米复合物转染HepG2细胞并观察其转染效率。
主要观察指标:Gal-PEG-PEI/psiRNA的粒径、zeta电位及形态;包覆效率;细胞毒性实验结果;肝脏靶向性转染结果。
结果:Gal-PEG-PEI/psiRNA复合物的粒径随N/P的增大而减小,最小粒径为81.1 nm,而zeta电位随Gal-PEG-PEI中氨基与psiRNA磷酸基比例的增大呈上升趋势;Gal-PEG-PEI对siRNA质粒有较好的包覆效率。Gal-PEG-PEI载体的细胞毒性小于聚乙烯亚胺而其转染效率高于聚乙烯亚胺。
结论:成功合成Gal-PEG-PEI纳米基因载体,表现出良好的肝细胞靶向性,且细胞毒性较小。 相似文献
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Objective To investigate the preparation method and characteristics of polyethyleneimine- polyethylene glycal (PEI- PEG) siRNA nanocomplex to improve the cell transfection efficiency of siRNA. Methods PEI-PEG copolymer was synthesized as gene carrier and complexed with siRNA targeting to CD44v6 to form PEI-PEG-siRNA nanoparticle. The size and zeta potential was measured. The morphology of the complex was observed by scanning electron microscopy. The complex abilities of the nanocomplex were validated by gel retardation assay. And the transfection efficiency of nanocomplexes at different N/P ratios was measured by flow cytometry. Results The nanoparticles appeared spherical,uniform in size, and well-dispersed. When N/P ratio was over 10, the size of nanocomplex decreased as N/P value increased. Meanwhile, the zeta potential was positive and increased. At this time, siRNA was completely complexed with PEI-PEG, producing a fluorescence quenching phenomenon. The flow cytometry showed that the transfection efficiency of nanocomplexes was improved as N/P value increasied. When N/P was 30, the transfection efficiency was (75.6±9.2)%. Conclusion PEI-PEG may be a promised gene carrier and can provide evidences for related research of PEI-PEG-siRNA nanoparticles in animals and in vitro experiments. 相似文献
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目的 研究聚乙二醇—聚乙烯亚胺(PEG-PEI)作为非病毒纳米载体介导小干扰RNA(siRNA)体外转染C17.2 NSCs的效果。 方法 采用自行设计合成的PEG-PEI与靶向Nogo受体复合体基因的siRNA形成复合物,通过粒径与电位的测定、凝胶阻滞电泳实验等方法观察PEG-PEI/siRNA纳米复合物的表征及复合效果。以脂质体复合体系Lipofectamine 2000/siRNA为对照,采用流式细胞仪检测不同N/P比(PEG-PEI中氮原子和siRNA中磷原子的摩尔比)的PEG-PEI/siRNA复合物对NSCs的转染效率。 结果 PEG-PEI和siRNA形成粒径为纳米级别的复合物,随着N/P比增大,复合物的粒径逐渐减小,而表面电位逐渐增大。凝胶阻滞电泳实验表明siRNA与PEG-PEI可以通过静电相互作用而稳定结合。流式细胞仪检测细胞转染率后发现,N/P=15时,PEG-PEI/siRNA复合物转染率最高,可达(78.72±8.18)%。 结论 PEG-PEI是一种有良好发展前景的非病毒型siRNA转运载体,对神经干细胞基因治疗具有潜在的应用价值。 相似文献
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目的 制备负载油性、水性超顺磁性氧化铁(SPIO)颗粒聚合物纳米囊泡,并观察其表征和MRI成像特点.方法 经多步化学反应得到共聚物聚乙二醇-聚(D,L-丙交酯)(PEG-PDLLA),通过多次乳化及溶剂挥散法使共聚物在水溶液中自组装成囊泡,并分别负载油性和水性SPIO.使用扫描电镜和透视电镜观察负载油性、水性SPIO聚合物纳米囊泡的直径、形态、分布,并用MRT2 mapping软件测量单纯SPIO水溶液、负载油性、水性SPIO聚合物纳米囊泡的T2弛豫率(1/T2).溶液浓度分别取原液、原液的1/2、1/4、1/8、1/16、1/32.结果 负载油性SPIO和水性SPIO聚合物纳米囊泡的的平均直径分别为( 182.2 ±23.9) nm、(191.7 ±28.7) nm.电镜显示油性SPIO均匀地分散于囊泡的中心膜上;水性SPIO以团簇的形式被包裹在囊泡的内腔中.负载SPIO的聚合物囊泡比单纯SPIO水溶液表现更高MRI敏感性.在相同铁离子浓度下,负载水性SPIO聚合物囊泡的T2弛豫率(1/8浓度时为4.60)高于负载油性SPIO聚合物纳米囊泡(1/8浓度时为2.85).结论 负载SPIO聚合物纳米囊泡比单纯SPIO水溶液表现出更高的MRI敏感性,负载水性SPIO聚合物囊泡的T2弛豫率高于负载油性SPIO聚合物纳米囊泡. 相似文献