细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白抑制狼疮肾炎患者外周血单个核细胞B7分子表达及

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA-4Ig)对活动期狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)细胞表面B7-1(CD80)和B7-2(CD86)表达的影响及其对抗双链DNA(dsDNA)抗体和免疫球蛋白产生的影响。方法将18例活动期LN患者的抗凝血标本随机分为LN的CTLA-4Ig处理组(LN-T组9例)和普通培养组(LN-NC组9例)。另以14例正常人的抗凝血标本为对照,随机分为正常人的CTLA-4Ig处理组(NC-T组7例)和普通培养组(NC-NC组7例)。用密度梯度离心法分离PBMC。处理组加入CTLA-4Ig(10ng/L)、普通培养组加入等量普通培养基37℃孵育72h后,采用流式细胞仪技术检测PBMC细胞表面B7-1和B7-2分子的表达;ELISA法检测孵育液中抗dsDNA抗体、IgG及IgM水平。结果活动期LN患者CTLA-4Ig处理组与普通培养组比较,PB-MC表面B7-2分子表达明显下降(P<0.01);B7-1分子表达无显著变化(P>0.05);孵育液中抗dsD-NA抗体、IgG及IgM的生成均明显减少(P<0.01)。而正常人的两组间各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论CTLA-4Ig可抑制活动期LN患者的PBMC表面B7-2分子的表达,并可减少其抗dsDNA抗体、IgG及IgM的分泌。     

负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响

目的探讨负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响。方法将CTLA4Ig重组腺病毒与Wistar大鼠未成熟树突状细胞于37℃共孵育6h后,经尾静脉注射该大鼠作实验组,另外分别设立Wistar大鼠未成熟树突状细胞、CTLA4Ig重组腺病毒、生理盐水经尾静脉注射为对照。1周后,用0.3%戊巴比妥麻醉各组大鼠后抽血检测CTLA4Ig。取脾脏,经流式细胞术分选出Th1、Th2细胞及CD4 T细胞,行混合淋巴细胞培养检测Th细胞的增殖。用免疫组织化学法检测Th1、Th2细胞的比例。结果实验组血清CTLA4Ig水平(0.654±0.13)显著高于CTLA4Ig重组腺病毒组(0.392±0.10,P<0.01),树突状细胞组及生理盐水组未检出。实验组Th1细胞的增殖指数(742±161)、Th1/Th2(0.16±0.05)均显著低于各对照组(分别与未成熟树突状细胞组、CTLA4Ig重组腺病毒组、生理盐水组相比,P均<0.01);而Th2细胞的增殖指数(9162±598)显著高于各对照组(P均<0.01)。结论负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞可显著抑制大鼠Th1细胞增殖,促进Th2细胞增殖,使Th细胞由Th1向Th2显著偏移,诱导有效的免疫耐受。     

负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响

目的 探讨负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响.方法 将CTLA4Ig重组腺病毒与Wistar大鼠未成熟树突状细胞于37C共孵育6h后,经尾静脉注射该大鼠作实验组,另外分别设立Wistar大鼠未成熟树突状细胞、CTLA4Ig重组腺病毒、生理盐水经尾静脉注射为对照.1周后,用0.3%戊巴比妥麻醉各组大鼠后抽血检测CTLA4Ig.取脾脏,经流式细胞术分选出Th1、Th2细胞及CD4+T细胞,行混合淋巴细胞培养检测Th细胞的增殖.用免疫组织化学法检测Th1、Th2细胞的比例.结果 实验组血清CTLA4Ig水平(0.654±0.13)显著高于CTLA4Ig重组腺病毒组(0.392±0.10,P＜0.01),树突状细胞组及生理盐水组未检出.实验组Th1细胞的增殖指数(742±161)、Th1/Th2(0.16±0.05)均显著低于各对照组(分别与未成熟树突状细胞组、CTLA4Ig重组腺病毒组、生理盐水组相比,P均＜0.01);而Th2细胞的增殖指数(9162 ±598)显著高于各对照组(P均＜0.01).结论 负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞可显著抑制大鼠Th1细胞增殖,促进Th2细胞增殖,使Th细胞由Th1向Th2显著偏移,诱导有效的免疫耐受.     

维生素B6对大鼠早期糖尿病肾病的防治作用

目的:探讨维生素B6对糖尿病肾病(DN)大鼠肾功能的保护作用及可能的机制.方法:利用链脲菌素(STZ)腹腔注射法诱导建立DN大鼠模型,将其随机分为模型组(D组)、维生素B6治疗组(B组)、氨基胍治疗组(A组),并与正常对照组(C组)比较,每组10只大鼠;A、B组每天分别用氨基胍、维生素B61g溶于1L蒸馏水中,C、D组仅给予1L蒸馏水,24 h后自由饮用.观察治疗期间大鼠的一般状况、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血三酰甘油(TG)、血总胆固醇(TC)、血肌酐(SCr)、肾小球滤过率(GFR)、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)、肾小球提取物糖基化终末产物(GTE-AGEs)、肾组织病理等改变.结果:(1)造模组大鼠均出现肾脏功能损害.(2)维生素B6对FBG及HbA1c无影响,但能降低DN大鼠的TG、TC、SCr、24h-UAER,增加GFR.(3)维生素B6能降低DN大鼠肾小球AGEs,其作用效果与氨基胍相当.结论:(1)维生素B6无降糖作用,但对肾脏功能有一定的保护作用;(2)维生素B6能降低糖尿病大鼠的高脂血症;(3)维生素B6具有与氨基胍相似的抑制肾脏AGEs在糖尿病大鼠肾脏蓄积的作用,发挥其对糖尿病肾病的防治作用.     

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白抑制狼疮肾炎患者外周血单个核细胞B7分子表达及抗体产生

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA-4Ig)对活动期狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)细胞表面B7-1(CD80)和B7-2(CD86)表达的影响及其对抗双链DNA(dsDNA)抗体和免疫球蛋白产生的影响.方法 将18例活动期LN患者的抗凝血标本随机分为LN的CTLA-4Ig处理组(LN-T组9例)和普通培养组(LN-NC组9例).另以14例正常人的抗凝血标本为对照,随机分为正常人的CTLA-4Ig处理组(NC-T组7例)和普通培养组(NC-NC组7例).用密度梯度离心法分离PBMC.处理组加入CTLA-4Ig(10 ng/L)、普通培养组加入等量普通培养基37℃孵育72 h后,采用流式细胞仪技术检测PBMC细胞表面B7-1和B7-2分子的表达;ELISA法检测孵育液中抗dsDNA抗体、IgG及IgM水平.结果 活动期LN患者CTLA-4Ig处理组与普通培养组比较,PBMC表面B7-2分子表达明显下降(P＜0.01);B7-1分子表达无显著变化(P＞0.05);孵育液中抗dsD-NA抗体、IgG及IgM的生成均明显减少(P＜0.01).而正常人的两组间各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 CTLA-4Ig可抑制活动期LN患者的PBMC表面B7-2分子的表达,并可减少其抗dsDNA抗体、IgG及IgM的分泌.     

同种异体移植肾组织中CD80和CD86表达的观察

目的观察同种异体肾移植肾组织中CD80和CD86的表达,以探讨其在急性肾移植细胞性排异反应中可能的致病作用。方法以正常肾组织(NC组)为对照,采用免疫组织化学方法观察急性细胞性排异反应组(ACR组),无急性细胞性排异反应组(N-ACR组)肾组织中CD80和CD86的表达及肾间质中浸润CD4+和CD8+淋巴细胞数。结果ACR组肾小管上皮细胞的CD80和CD86表达较N-ACR组增高,其肾间质中CD4+和CD8+淋巴细胞数也较N-ACR组和NC组明显增高,同时N-ACR组肾间质的CD4+和CD8+表达较NC组明显增高。结论肾小管上皮细胞作为抗原提呈细胞参与了同种异体肾移植急性细胞性排异反应过程。     

尾加压素Ⅱ对大鼠肾小球系膜细胞内游离钙浓度影响

目的探讨尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)对肾小球系膜细胞(GMC)内游离钙浓度的影响及其作用机制.方法以体外培养的SD乳鼠GMC为研究对象,用UⅡ刺激GMC,Fluo3/AM荧光标记细胞内游离钙离子,激光共聚焦显微技术动态测定GMC内游离钙浓度变化.结果UⅡ激发GMC内[Ca2+]i升高作用分2个时相,即瞬时峰值升高时相和缓慢持久升高时相,对峰值升高呈剂量依赖方式,在10-10mol/L～10-7mol/L范围内引起峰值升高,且随着剂量增加,幅度增大.硝苯地平和无钙缓冲液对UⅡ激发GMC内[Ca2+]i瞬时峰值升高无作用,但可完全阻止缓慢持久升高时相出现.结论UⅡ激发GMC内[Ca2+]i浓度瞬时峰值升高时相是由细胞内储存钙释放介导的,而缓慢持久升高时相是由细胞外钙流入增加引起的.     

辛伐他汀对高糖培养肾小球系膜细胞增殖和细胞周期的影响及机制

目的：研究辛伐他汀（SIM ）对高糖培养肾小球系膜细胞（GMC）增殖和细胞周期的影响,并观察其炎症因子和细胞外基质的变化。方法将大鼠 GMCs 分为4组：低糖组[LG 组,葡萄糖（Glu）5．6 mmol／L ],高糖组（HG 组,Glu 30 mmol／L ）, HG ＋ SIM （10μg／L）组和 HG ＋ SIM （25μg／L）组。采用4-甲基偶氮四唑蓝（M TT ）法检测各组细胞的增殖能力,同时比较各组细胞的 G0／G1,G2＋ M 期和 S 期细胞比例。比较各组细胞上清液中的转化生长因子β1（TGF-β1）、纤维黏连蛋白（FN）和Ⅳ型胶原（COL4）水平。结果 HG 组不同时刻的吸光度（A）高于 HG ＋ SIM （10μg／L）组、HG ＋ SIM （25μg／L）和 LG 组,差异有统计学意义（P＜0．05）。 LG 组的 G0／G1期细胞比例为（35．67±3．38）％,S 期细胞比例为（41．24±5．64）％;HG 组的 G0／G1期细胞比例为（25．88±4．02）％,S 期细胞比例为（28．65±1．88）％;HG ＋ SIM （10μg／L）组的 G0／G1期细胞比例为（28．12±2．01）％,S 期细胞比例为（35．55±2．09）％;HG ＋ SIM （25μg／L）组的 G0／G1期细胞比例为（31．85±3．52）％,S 期细胞比例为（39．82±2．23）％,差异有统计学意义（P＜0．05）。 HG 组上清液 TGF-β1、FN 和 COL4水平高于 HG ＋ SIM （10μg／L）组、HG ＋ SIM （25μg／L）和 LG组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 SIM 可以通过降低 TGF-β1水平来抑制 GMCs 的增殖并调整细胞周期,抑制 GMCs 肥大。     

尾加压素Ⅱ对大鼠肾小球系膜细胞内游离钙浓度影响

目的 探讨尾加压素Ⅱ（UmtensinⅡ，UⅡ）对肾小球系膜细胞（GMC）内游离钙浓度的影响及其作用机制。方法 以体外培养的SD乳鼠GMC为研究对象，用UⅡ刺激GMC，Fluo3／AM荧光标记细胞内游离钙离子，激光共聚焦显微技术动态测定GMC内游离钙浓度变化。结果 UⅡ激发GMC内[Ca^2＋]i升高作用分2个时相，即瞬时峰值升高时相和缓慢持久升高时相，对峰值升高呈剂量依赖方式，在10^-10mol／L～10^-7mol／L范围内引起峰值升高，且随着剂量增加，幅度增大。硝苯地平和无钙缓冲液对UⅡ激发GMC内[Ca^2＋]i瞬时峰值升高无作用，但可完全阻止缓慢持久升高时相出现。结论 UⅡ激发GMC内[Ca^2＋]i浓度瞬时峰值升高时相是由细胞内储存钙释放介导的，而缓慢持久升高时相是由细胞外钙流人增加引起的。     

益肾方与厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠肾脏尾加压素Ⅱ表达及病理改变的影响

目的:探讨益肾方与厄贝沙坦对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织中尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)表达和肾脏病理改变的影响及其意义.方法:将SD大鼠以链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病肾病大鼠模型后随机分为糖尿病肾病组(D组)、益肾方治疗组(DZ组)、厄贝沙坦治疗组(DI组),并设正常对照组.治疗8周后取肾组织,免疫组化方法检测肾组织中UⅡ表达水平,光镜及电镜观察肾脏组织结构改变.结果:与正常对照组相比,糖尿病肾病组肾组织中UⅡ表达增高,肾小球肥大,基质增多,足突融合,基底膜增厚;肾组织UⅡ表达与肾小球平均体积及基底膜厚度的关系均呈正相关.益肾方和厄贝沙坦治疗组肾组织UⅡ表达均明显减少,肾脏病理显著改善.结论:益肾方和厄贝沙坦均能减少糖尿病大鼠肾组织UⅡ的表达和改善肾脏病理改变,其保护作用可能与减少UⅡ的产生有关.