液相色谱串联质谱法检测血清载脂蛋白C的酶解效率

目的分析液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)检测载脂蛋白(apo) C-Ⅰ、C-Ⅱ和C-Ⅲ的酶解效率,为其准确定量检测提供依据。方法对不同apo C含量的混合人血清样品进行变性、还原、烷基化等前处理,经胰蛋白酶酶解,用LC-MS/MS定量检测目标肽段;分析多肽释放图谱和样品间多肽释放的相关性。结果肽段TP(apo C-Ⅰ)、TY(apo C-Ⅱ)和GW(apo C-Ⅲ)的响应值较高。酶解1 h时,肽段ES和DA即达释放峰值; 3 h时,TY释放最充分;而TP、GW和EF的释放速率相对较慢,在8 h达最高值。TP、TY和GW达峰值后,峰面积随酶解时间延长而逐步下降。apo C-Ⅰ释放出的2条肽段EF和TP在5份样品之间一致,相关系数(r)=0.993 9(3 h)和0.992 9(20 h); apo C-Ⅱ(ES和TY肽段)和apo C-Ⅲ(DA和GW肽段)的r值介于0.976 1～0.997 3。结论 apo C-Ⅰ、apo C-Ⅱ和apo C-Ⅲ肽段的酶解效率受肽段自身特性和酶解环境影响,合适地选择代表性肽段和酶解条件将有助于其准确定量检测。     

临床化学检测的标准化现状

实验室的质量管理和检验结果标准化是临床化学检测项目实现结果互认的2个重要基础。开展标准化工作,建立检验项目的标准化体系可为检验质量提供准确性依据,是确保检验结果准确、具有可比性的最有效措施。实现检验结果准确、可比的重要方法之一是建立和保证检验结果的溯源性。国际组织一般通过建立参考测量程序、参考物质和一致性方案等来解决不同项目的量值溯源性问题。正确度验证计划和能力验证的开展为临床化学检验项目的结果互认提供了依据。文章对临床化学检测标准化的现状进行综述,以期为临床实验室质量管理提供参考。     

国产全自动生化检测系统的应用评价

目的参照我国全自动生化分析仪行业标准（讨论稿）和美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）检测系统性能评价方案，对我国自主研发的全自动生化检测系统进行分析性能的评价，探讨国产检测系统的临床应用价值。方法对上海丰汇公司FH400型全自动生化分析仪、配套试剂和校准品组成的检测系统（简称丰汇检测系统），根据项目的反应原理特征选择丙氨酸氨基转移酶（ALT，零级动力学法）、尿素（Urea，一级动力学法）、总蛋白（TP，二点终点法）和胆固醇（Chol，终点法）进行精密度、线性范围、抗干扰能力实验评价，并与日立全自动生化分析仪与罗氏诊断产品有限公司试剂检测系统作患者样本比对实验。结果丰汇检测系统ALT、Urea、TP和Chol的批内精密度变异系数（CV）中值分别为1．18％、1．35％、0．62％和0．39％，高值分别为0．84％、0．97％、0．34％和0．41％。患者样本比对实验4个项目的相关方程和相关系数（r）分别为ALT：Y：1．068X-0．797，r=0．999；Urea：Y=1．006X＋0．181，r=0．999；TP：Y=0．989X＋0．629，r=0．997；Chol：Y=1．001X-0．128，r=0．998，其在医学决定水平处的偏倚均低于美国临床实验室改进修正法案（CLIA’88）允许误差范围。线性范围和抗干扰能力[维生素C（VitC）、总胆红素（TBil）、血红蛋白（Hb）和乳糜液]基本符合厂家的声明。结论被评价的丰汇检测系统各项分析性能满足临床使用要求，检测成本较低，有较高的临床应用价值。     

酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐的方法学比较

目的了解酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐结果的偏倚大小,为室间评估结果分组提供依据.方法按照美国全国临床实验标准委员会(NCCLS)EP9-A文件进行评估,将测得的数据进行相关回归分析,计算两方法间的偏倚.结果酶法和Jaffe速率法测定肌酐,其回归方程式Y=1.005X+17.9(Y为Jaffe速率法,X为酶法),相关系数r=0.998,有明显恒定偏倚.结论必须对不同方法原理的肌酐室间评估结果作分组处理.     

国际临床化学联合会酶学测定参考方法实验室网络的初步建立

目的 总结我国实验室运行国际临床化学联合会(IFCC)酶学测定参考方法情况和参加IFCC参考实验室室间质评(RELA)结果,了解我国酶学参考测量水平.方法 目前国内有8家实验室运行全部或部分IFCC酶学参考方法.各实验室按IFCC参考方法建立测量程序,评价各自程序的精密度与准确性,精密度评价按美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP-5进行,准确度评价采用国际有证参考物质.7家实验室参加2006年RELA.结果 各实验室目前能达到的批内变异系数(CV)均在1.5%以内,批间精密度在2%以内.部分实验室进行了有证参考物质分析,测定结果偏倚在给定的不确定度范围内.我国酶学实验室在2006年RELA中具有与除外组相似的室间CV,只是样本A乳酸脱氢酶(LDH)及样本B ALT的室间CV较大,但剔除可能离群值后室问CV与除外组相似.结论 中国酶学实验室经过5年的发展,现在无论从硬件配置还是技术力量上均已接近国外同类实验室,我国临床酶学参考实验室网络已初步建立.     

临床化学(血清葡萄糖)测定中测量不确定度评估的探讨

测量不确定度（uncertainty of measurement）的定义是表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果项联系的参数。这个概念的提出已经有多年了，但正式确定适用于测量领域的评估和表达测量不确定度的通用原则是在1993年，由国际标准化组织（ISO）联合了国际计量局（BIPM）、国际电工委员会（IEC）、国际临床化学协会（IFCC）、国际理论化学与应用化学协会（IUPAC）、国际理论物理与应用物理协会（IUPAP）、国际法制计量组织（OIML）等8个国际组织公布的《测量不确定度表述指南》，现已被世界上大多数国家所采用。     

DADE Moni—Trol临床化学质控品的应用性能评价

目的 了解DADE Moni-Trol临床化学质控品的瓶间差和不同贮存条件下的稳定性，为实验室正确使用提供参考依据。方法 运用连续测定多瓶样品结果的变异表示的总不精密度与用同一瓶样品进行连续测定结果的变异表示的分析不精密度之差计算质控品的瓶间差。对贮存对4℃或－15℃的2种水平质控品的稳定性用t检验进行统计分析。结果 高浓度的水平2的平均瓶间差比低浓度的水平1要小，它们分别为1.0%和2.1%。2个水平的大部分评价项目在4℃和－15℃贮存条件下分别可以稳定7d和30d，但质控品水平1、水平2的TG在4℃保存条件下第4天起测定值有上升趋势，水平2的TBIL在－15℃贮存条件下第29天起测定值有下降趋势。结论 实验室在使用该冻干质控品时必须严格按照说明书复溶要求操作贮存。     

临床化学自建检测系统的误差分析

目的通过对上海市医院实验窜使用的部分临床化学试剂的患者样本比对实验，分析临床化学检测系统误差。方法选择5家国产试剂厂家（分别为MI）、YY、KH、FH、CZ），根据厂家的校准声明校准其试剂，在日立自动生化分析仪上与罗氏诊断产品有限公司试剂进行内氨酸转氨酶（ALT）、尿素（Urea）、胆固醇（Chol）、白蛋白（Alb）4个项目的比对实验。用回归方法统计比对结果，并计算4个项目在医学决定水平处的偏倚。结果MD的ALT、试剂与罗氏试剂比对结果的相关系数（r）为0．7350。其余试剂比对结果的r均〉0．975。MD试剂ALT在20、60和300U／L，Urea在9．28和17．84mmol／L，Chol在2．33mmol／L，Alb在20g/L时的偏倚高于允许误差。其余试剂在医学决定水平处的偏倚均低于允许误差．结论5家国产试剂与进口配套试剂进行4个常规生化项目的患者样本比对实验，除一家厂家外，其余试剂质量基本符合临床使用要求。     

用6σ质量管理理论评价糖化血红蛋白A1c指标的检测性能

目的探讨6σ质量管理理论在糖化血红蛋白(HbA1c)检测性能评价中的应用。方法根据Westgard等报道的计算σ值方法,以生物学变异计算"合适"、"理想"和"最低"允许总误差(TEa)为质量目标,CV(不精确度或变异系数)取自于本室室内质控的平均累积值,bias来源于上海临床检验中心HbA1c室间质评结果。计算质量目标指数(QGI)。结果 HbA1c基于生物学变异理想、合适和最低的要求bias值分别为0.75%、1.5%和2.25%;根据本室室内质控8个月累积的平均CV值是2.15%,室间质评的平均bias为1.4%,实际平均TEa为4.95%。其中本室实际最大的CV为2.74%,TEa为5.92%,QGI=0.43<0.8,浓度1(低值)的QGI=0.34<0.8,浓度2(高值)的QGI=0.60<0.8,σ值达到了上海地区质量要求,未达到生物变异和NGSP的要求。结论 6σ质量管理理论可用于评价HbA1c的检测性能。