小鼠CXCR4基因慢病毒载体构建与真核表达

本研究旨在克隆小鼠CXC型趋化因子受体4（CXCR4）基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的CXCR4重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）以C57BL／6小鼠骨髓细胞为模板克隆全长型CXCR4基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,经限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移载体,构建携带EGFP及CXCR4双顺反子结构的自身失活型重组慢病毒表达质粒;同时构建LV-IRES-EGFP作为对照质粒;通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,采用荧光显微镜和流式细胞术（FCM）检测EGFP的表达,Western blot鉴定CXCR4蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠CXCR4基因,构建重组慢病毒转移质粒LV-IRES-EGFP-CXCR4及对照质粒LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度可达到10^8TU／ml。以重组慢病毒颗粒感染293Fr细胞后第3天,在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测显示感染效率可达95％,FCM及Western blot结果显示感染后293Fr细胞表达CXCR4蛋白。结论：成功构建自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-CXCR4,并在真核细胞中获得表达。     

不同胎龄早产儿血清蛋白生化指标临床研究

目的 通过测定不同胎龄早产儿血清白蛋白、前白蛋白生化指标的变化,探讨其作为评价早产儿成熟度、营养状况及营养支持的临床意义.方法 早产儿组30例为入院时生后24h内的早产儿,入院后给予防治早产儿并发症、尽早给予胃肠道喂养和部分或完全静脉营养,补充水-能量-氨基酸等各种营养成分.分别于出生后24h内及治疗后2周采集股静脉血2ml测定血清白蛋白(albumin,ALB)、前白蛋白(pre albumin,PA)水平.结果 1)早产儿组治疗前血清ALB、PA水平均低于治疗后,两者之间比较存在显著性差异(P＜0.01).2)大于等于28周小于32周的早产儿血清ALB和PA水平均低于大于等于32周小于37周的早产儿水平,两组之间比较存在显著性差异(P＜0.01).结论 1)PA可做为临床评价早产儿成熟度及营养状况的敏感指标,在早产儿出现重度黄疸、水肿时,ALB为临床注射白蛋白提供治疗依据.2)早产儿血清ALB、PA对于早产儿临床营养支持等方面有一定指导作用.     

窒息早产儿血清电解质检测及其意义

目的：探讨早产儿窒息后血清电解质变化及其临床意义。方法：对窒息早产儿30例（窒息组）入院后48 h内采集股静脉血,测定血清Na^＋、K^＋、Cl^-、Ca^2＋,并与无窒息组早产儿20例（对照组）进行比较。结果：窒息组血清Na^＋、Ca^2＋低于对照组,两者差异具有统计学意义（分别为P〈0.01,P〈0.05）。窒息组28-31周早产儿血清N^a＋、Ca^2＋低于32-36周早产儿,两者差异具有统计学意义（分别为P〈0.01,P〈0.05）。结论：早产儿窒息可造成血电解质紊乱,胎龄较小的早产儿窒息后更易出现低Na＋、低Ca2＋血症;检测窒息早产儿血清电解质变化有助于早期诊断电解质紊乱,为临床治疗提供参考依据。     

婴儿巨细胞病毒肝炎治疗前后血清IL-18及TNF-α水平变化及其意义

目的 分析婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎治疗前后血清白介素-18(IL-18)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化及意义.方法 选取CMV肝炎婴儿120例,测定血清学、尿液及B超指标.分析血清IL-18、TNF-α和肝功能指标的相关性.结果 治疗有效组患儿治疗后的血清IL-18、TNF-α较治疗无效组显著降低(P<0.05).CMV肝炎患儿治疗前血清IL-18和ALT、AKP呈正相关(P<0.05),TNF-α和ALT、AKP呈正相关(P<0.05).结论 血清IL-18、TNF-α水平对于CMV肝炎婴儿的肝功能损害程度具有一定的评价意义,同时可用于预测抗病毒疗效.     

婴儿巨细胞病毒肝炎治疗前后血清IL-18及TNF-α水平变化及其意义

目的分析婴儿巨细胞病毒（CMV）肝炎治疗前后血清白介素-18（IL-18）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平变化及意义。方法选取 CMV 肝炎婴儿120例,测定血清学、尿液及 B 超指标。分析血清 IL-18、TNF-α和肝功能指标的相关性。结果治疗有效组患儿治疗后的血清 IL-18、TNF-α较治疗无效组显著降低（P ＜0.05）。CMV 肝炎患儿治疗前血清 IL-18和 ALT、AKP 呈正相关（P ＜0.05）,TNF-α和 ALT、AKP 呈正相关（P ＜0.05）。结论血清 IL-18、TNF-α水平对于 CMV 肝炎婴儿的肝功能损害程度具有一定的评价意义,同时可用于预测抗病毒疗效。     

影响新生儿坏死性小肠结肠炎的发病因素

目的　探讨影响新生儿坏死性小肠结肠炎 (NEC)的发病因素。方法　详细地追寻记录4 6例NEC患儿围产期和发病前的病史、一般情况、喂养情况、有无并发症及孕母妊娠期患病状况等可能影响NEC发病的因素 ,用Logistic多元回归法进行统计学分析和处理所得资料。 结果　NEC的发病与出生体重、胎龄、快速超量喂养密切相关 (P <0 .0 0 1) ,也与有窒息缺氧、感染和配方奶喂养相关 (P<0 .0 5 ) ,均具有统计学意义 ;而与性别、母乳喂养、孕母妊娠并发症无关 (P >0 .0 5 ) ,均无统计学意义。结论　NEC的防治关键在于提高对本病的充分认识 ,对具有影响NEC发生因素的患儿 ,采取综合预防措施 ,有利于降低发病率。NEC一旦发生 ,则进展迅速 ,早期诊断、早期治疗 ,积极有效地控制病情恶化 ,对降低病死率有重要的临床意义     

不同胎龄早产儿血脂生化指标的临床意义

目的通过测定不同胎龄早产儿血脂生化指标的变化,探讨其作为评价早产儿成熟度、营养状况及营养支持指标的临床意义。方法早产儿组30例在入院后12 h内（出生后24 h）采集股静脉血2 ml,采血前2 h未喂养及输液。足月儿组30例在胎儿娩出、清理呼吸道后即刻采脐带血2 ml。测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（ApoA1）、载脂蛋白B（ApoB）等生化指标。结果早产儿组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB水平均低于足月儿组,2组之间差异具有统计学意义（P〈0.01）。28～31周的早产儿组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB水平均低于32～36周的早产儿组,2组之间差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论血脂生化指标可作为评价早产儿成熟度及营养状况的依据。检测血脂水平变化,对临床合理营养支持具有指导意义。     

早产儿多项血清酶活性变化及其临床意义

目的　研究早产儿有并发症时多项血清酶活性的变化及其临床意义 ,为临床诊断和采取综合防治措施提供帮助。方法　早产儿 56例 ,其中有并发症者 3 1例作为实验组 ,无并发症者 2 5例作为对照组。生后 72h内采血 ,使用全自动生化分析仪做血清酶检测。结果　实验组早期多项血清酶活性指标显著高于对照组 (P均 <0 .0 1)。结论　多项血清酶活性测定可作为有并发症早产儿心脏、肝脏等多器官损伤的依据之一     

早产儿窒息后血清酶活性变化的临床意义

目的探讨早产儿窒息后血清酶活性变化的临床意义。方法选择50例早产儿,其中有窒息者30例（观察组）,无窒息者20例（对照组）;均于出生48 h内检测血清门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（AKP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、ɑ-羟丁酸脱氢酶（ɑ-HBDH）活性。结果观察组血清AST、ALT、AKP、GGT、CK、CK-MB、LDH、ɑ-HBDH活性均高于对照组（P均〈0.01）。观察组28~31周早产儿血清AST、ALT、AKP、GGT、CK、CK-MB、LDH、ɑ-HBDH活性均高于32~36周早产儿（P均〈0.01）。结论早产儿窒息后血清酶活性升高可作为临床判断心肌、脑、肝脏等重要器官损伤的依据之一;不同胎龄窒息早产儿血清酶活性变化可作为临床评估脑损伤程度的指标。     

学龄期儿童偏头痛影响因素的临床研究

目的探讨学龄期儿童偏头痛的影响因素,为采取预防措施提供依据。方法36例儿童偏头痛病例均详细询问病史和进行一系列理化检查,排除了上呼吸道感、中枢神经系统等器质性疾病引起的头痛,并排除了眼、耳鼻喉科疾病。收集了全部偏头痛儿童的病史、生活饮食习惯、心理因素、家庭环境因素等,并进行非条件logistic多元回归分析。结果按α=0.05水平入选logistic回归模型的因素有过度疲劳、睡眠不足、心理因素、使用电脑或看电视过久、头痛家族史、环境因素,均有统计学意义。结论针对影响儿童偏头痛的主要因素,临床采取心理治疗、养成良好的学习生活习惯等措施,有助于缓解儿童偏头痛的症状。