龙虾壳聚糖干预后糖尿病小鼠血糖和糖耐量的变化

目的:观察龙虾壳聚糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。方法:实验于2005-04/12在江苏大学医学技术学院生化研究室和江苏大学医学部实验动物中心完成。实验动物选用45d的健康雄性ICR清洁级小鼠100只。①龙虾壳聚糖对正常小鼠空腹血糖的影响:取正常小鼠20只,禁食3h后测定空腹血糖,按血糖水平的高低随机抽签法分成龙虾壳聚糖组和正常对照组,每组10只。龙虾壳聚糖用10g/L醋酸配制,龙虾壳聚糖组小鼠按剂量200mg/(kg·d)连续灌胃;正常对照组以10g/L醋酸20mL/kg灌胃,连续30d。30d后禁食3h测定其空腹血糖值。②制备糖尿病模型:取正常小鼠80只,用四氧嘧啶生理盐水溶液尾静脉注射制备糖尿病小鼠模型,剂量100mg/kg,容积10mL/kg,6d后测定禁食3h后各小鼠的空腹血糖,以血糖值≥25mmol/L者确定为高血糖模型成功动物。③龙虾壳聚糖对尿病小鼠空腹血糖的影响:取高血糖模型成功大鼠40只,随机分成龙虾壳聚糖50,100和200mg/kg3个剂量组和高血糖模型对照组,每组10只。模型对照组给予10g/L醋酸灌胃,剂量20mL/kg,连续30d;龙虾壳聚糖50,100和200mg/kg剂量组分别给予龙虾壳聚糖50,100和200mg/(kg·d)(用10g/L醋酸配制),连续30d。第31天禁食3h后测定各组小鼠的空腹血糖值,比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率=[(实验前血糖值一实验后血糖值)/实验前血糖值]×100%。④龙虾壳聚糖对糖尿病小鼠糖耐量的影响:在各组小鼠测定空腹血糖值后,龙虾壳聚糖50,100和200mg/kg剂量组分别继续给予龙虾壳聚糖50,100和200mg/(kg·d);模型对照组给予10g/L醋酸灌胃,剂量20mL/kg。15～20min后经口给予葡萄糖溶液2.0g/kg,于0,0.5,2h分别测定各组小鼠的血糖值。观察模型对照组与龙虾壳聚糖50,100和200mg/kg剂量组在给予葡萄糖后各时间点血糖曲线下面积的变化。血糖曲线下面积=0.25×(0h血糖值 4×0.5h血糖值 3×2h血糖值)。结果:实验小鼠100只均进入结果分析,无脱失值。①龙虾壳聚糖在50,100和200mg/kg的剂量下,糖尿病小鼠的空腹血糖值明显低于模型对照组(P<0.01,P<0.001),血糖降低百分率分别达16.08%、19.05和25.00%,模型对照组小鼠的血糖值仅降低9.92%。②龙虾壳聚糖100和200mg/kg剂量组均具有不同程度地增强糖尿病小鼠的糖耐量作用,血糖曲线下面积:模型对照组为(57.6±3.69)mm2,龙虾壳聚糖100和200mg/kg剂量组分别为[(52.1±3.06),(49.2±2.52)mm2],明显低于模型对照组(P<0.05和P<0.001)。③龙虾壳聚糖对正常小鼠的血糖水平无明显影响(P>0.05)。④模型制备和行为学结果:糖尿病小鼠模型制备6d测定禁食3h后各小鼠的空腹血糖值为25～28mmol/L,并出现了明显的多饮多尿消瘦等糖尿病症状。结论:龙虾壳聚糖对糖尿病小鼠具有降血糖和增强糖耐量的作用,且不影响正常糖代谢。     

溴甲酚绿法测定壳聚糖的含量

壳聚糖(chitosan)是由氨基葡萄糖和N-乙酰基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接起来的直链多糖,在医药、食品、日化、环保等领域具有广泛的应用前景[1],已成为相关领域研究的热门课题.目前,测定壳聚糖含量的方法有:酸水解间接比色法[2]、滴定法[3,4]和分光光度法[5,6 ].酸水解间接比色法操作比较繁琐,且不适于微量样品的分析.滴定法可分为酸碱滴定法[3]和水解滴定法[4],酸碱滴定法以甲基橙作指示剂,方法简单,但由于是胶体溶液,因此终点时变色不明显,且易产生沉淀,干扰测定;水解滴定法样品需水解20 min,滴定要求高,操作烦琐,且不适合微量样品的分析.分光光度法用茜素红[5]或锌试剂[6]与壳聚糖在一定酸度条件下的显色反应测定壳聚糖的含量,但测定的线性范围只有0～0.2 mg/mL,且色素会吸附比色杯.     

壳聚糖对实验大鼠降血脂作用的初步研究

目的探讨壳聚糖的降脂作用及其机理。方法用SD雄性大鼠,随机分为高脂对照组和低、中、高三个壳聚糖剂量实验组,观察实验组与对照组给养高脂饲料28 d前后大鼠血清总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的变化。结果中、高剂量实验组大鼠血清总胆固醇与高脂对照组相比有非常显著性差异(P<0.01);低、中剂量实验组大鼠血清甘油三酯与高脂对照组相比有非常显著性差异(P<0.01),高剂量实验组的差异极为显著(P<0.001);低剂量实验组大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇与高脂对照组相比有非常显著性差异(P<0.01),中、高剂量实验组的差异极为显著(P<0.001)。结论壳聚糖具有显著降低高血脂大鼠的血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇的作用和提高血清高密度脂蛋白胆固醇的作用。     

壳聚糖体外吸附血清胆固醇的作用及其影响因素

目的：探讨应用壳聚糖在体外吸附血清胆固醇的作用及其影响因素，为临床应用壳聚糖吸附法治疗高脂血症提供依据。方法：将不同分子量、不同脱乙酰度和不同粒径的壳聚糖，分别加入到含高胆固醇的血清中，在限定条件下作用一定时间，用胆固醇氧化酶法分别测定加入壳聚糖前后的血清胆固醇含量，计算其吸附量。结果：壳聚糖分子量为53～55万时，吸附胆固醇量达到最大值；随壳聚糖脱乙酰度的提高，壳聚糖对胆固醇的吸附量也提高；壳聚糖粉末粒径越小越利于吸附。结论：壳聚糖用作体外血清胆固醇吸附剂具有优良血液相容性和吸附性，其吸附行为与分子量、脱乙酰度和粒径有关。     

地产龙虾壳甲壳素的提取和壳聚糖的制备

目的:以地产龙虾壳为原料,探讨其甲壳素的提取和壳聚糖的制备方法,以开发壳聚糖制备的新原料资源。方法:用脱蛋白、除钙、脱色、脱乙酰基、纯化等方法制备壳聚糖,研究其壳聚糖的脱乙酰度、分子量等性质,并与市售生化级壳聚糖的红外光谱进行比较。结果:地产龙虾壳中的甲壳素和壳聚糖的产率分别为14.8%和8.9%;龙虾壳聚糖的红外光谱与市售生化级壳聚糖的图谱基本一致;其它技术指标与文献记载基本一致。结论:用本法从地产盱眙龙虾的虾壳中提取甲壳素和制备壳聚糖工艺设备简单,操作简易,具有较强的推广性;地产盱眙龙虾的虾壳含甲壳素较高,是一种制备壳聚糖不可多得的天然资源,值得开发利用。     

壳聚糖质量标准的研究与建立

目的：研究并建立壳聚糖的质量标准,为不同资源获得的壳聚糖提供质量依据。方法：参照甲壳素的标准并结合壳聚糖的特点,从性状、鉴别、理化性质、特征性检查、含量测定等几个方面研究壳聚糖的质量标准。结果：建立了壳聚糖的主要质量标准。结论：壳聚糖标准的建立,有助于壳聚糖制备过程中的质量控制。并为其相关标准的建立提供了依据。     

龙虾壳聚糖抗皮肤浅表真菌的实验研究

目的 探讨龙虾壳聚糖对皮肤浅表真菌的抗菌作用, 检测其对真菌的最低抑菌浓度.方法 采用琼脂稀释平板培养法.结果 龙虾壳聚糖对红色毛癣菌、断发毛癣菌的最低抑菌浓度值均为2 500 mg/L,对须发毛癣菌、石膏样小孢子菌和白色念珠菌的最低抑菌浓度值均为5 000 mg/L;醋酸液对红色毛癣菌、断发毛癣菌的最低抑菌浓度值均为630 mg/L, 对须发毛癣菌、石膏样小孢子菌和白色念珠菌的最低抑菌浓度值均为1 260 mg/L.结论 龙虾壳聚糖及醋酸液对皮肤受试浅表真菌均具有抗菌作用;龙虾壳聚糖的最低抑菌浓度为2 500～5 000 mg/L.     

龙虾壳聚糖干预后糖尿病小鼠血糖和糖耐量的变化

目的：观察龙虾壳聚糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。方法：实验于2005-04／12在江苏大学医学技术学院生化研究室和江苏大学医学部实验动物中心完成。实验动物选用45d的健康雄性ICR清洁级小鼠100只。①龙虾壳聚糖对正常小鼠空腹血糖的影响：取正常小鼠20只，禁食3h后测定空腹血糖，按血糖水平的高低随机抽签法分成龙虾壳聚糖组和正常对照组，每组10只。龙虾壳聚糖用10g/L醋酸配制，龙虾壳聚糖组小鼠按剂量200mg／（kg&;#183;d）连续灌胃；正常对照组以10g/／L醋酸20mL／kg灌胃，连续30d。30d后禁食3h测定其空腹血糖值。②制备糖尿病模型：取正常小鼠80只，用四氧嘧啶生理盐水溶液尾静脉注射制备糖尿病小鼠模型，剂量100mg／kg，容积10mL／kg，6d后测定禁食3h后各小鼠的空腹血糖，以血糖值≥25mmol／L者确定为高血糖模型成功动物。③龙虾壳聚糖对尿病小鼠空腹血糖的影响：取高血糖模型成功大鼠40只，随机分成龙虾壳聚糖50，100和200mg／kg 3个剂量组和高血糖模型对照组，每组10只。模型对照组给予10g／L醋酸灌胃，剂量20mL／kg，连续30d；龙虾壳聚糖50。100和200mg／ks剂量组分别给予龙虾壳聚糖50，100和200mg／（kg&;#183;d）（用10g/L醋酸配制），连续30d。第31天禁食3h后测定各组小鼠的空腹血糖值，比较各组动物血糖值及血糖下降百分率。血糖下降百分率=[（实验前血糖值-实验后血糖值）／实验前血糖值]&;#215;100％。②龙虾壳聚糖对糖尿病小鼠糖耐量的影响：在各组小鼠测定空腹血糖值后，龙虾壳聚糖50，100和200mg／kg剂量组分别继续给予龙虾壳聚糖50，100和200mg／（kg&;#183;d）；模型对照组给予10g／L醋酸灌胃，剂量20mL／kg。15-20min后经口给予葡萄糖溶液2．0g/kg,于0，0．5，2h分别测定各组小鼠的血糖值。观察模型对照组与龙虾壳聚糖50，100和200mg／kg剂量组在给予葡萄糖后各时间点血糖曲线下面积的变化。血糖曲线下面积=0．25&;#215;（0h血糖值＋4&;#215;0．5h血糖值＋3x2h血糖值）。结果：实验小鼠100只均进入结果分析，无脱失值。①龙虾壳聚糖在50，100和200mg／kg的剂量下，糖尿病小鼠的空腹血糖值明显低于模型对照组（P〈0．01，P〈0．001），血糖降低百分率分别达16．08％、19．05和25．00％，模型对照组小鼠的血糖值仅降低9．92％。②龙虾壳聚糖100和200mg／kg剂量组均具有不同程度地增强糖尿病小鼠的糖耐量作用，血糖曲线下面积：模型对照组为（57．6&;#177;3．69）mmz，龙虾壳聚糖100和200mg／kg剂量组分别为[（52．1&;#177;3．06），（49．2&;#177;2．52）mml，明显低于模型对照组（P〈0．05和P〈0．001）。③龙虾壳聚糖对正常小鼠的血糖水平无明显影响（P〉0．05）。④模型制备和行为学结果：糖尿病小鼠模型制备6d测定禁食3h后各小鼠的空腹血糖值为25～28mmol/L。并出现了明显的多饮多尿消瘦等糖尿病症状。结论：龙虾壳聚糖对糖尿病小鼠具有降血糖和增强糖耐量的作用，且不     

壳聚糖体外抗幽门螺杆菌的作用及其影响因素

目的:研究壳聚糖在体外抗幽门螺杆菌的作用及其影响因素,为临床应用壳聚糖治疗胃病提供实验依据.方法:采用打孔法检测不同浓度和不同pH值壳聚糖对Hpylori标准菌株SSl和两株患者体内分离出的Hpylori菌株的抑菌作用.并采用抑菌试验探讨不同分子质量壳聚糖及金属离子对壳聚糖抗Hpylori作用的影响.结果:壳聚糖对3种Hpylori菌株均有抑菌作用,且在3株不同Hpylori菌株间无差异(P>0.05);在pH8.5-5.5范围内,随着pH值降低,壳聚糖的抗Hpylori作用增强(P<0.01);不同浓度的壳聚糖对Hpylori的抑菌作用有非常显著差异(P<0.01),在40g/L时达高峰.壳聚糖分子质量在400ku以内,随着分子质量的升高,其抑菌活性为先升高后降低.分子质量为10-200ku的抗Hpylori作用最强,抑菌时间长达134h.NaCl、MgCl2等金属离子对壳聚糖的抗Hpylori作用有影响,且随浓度的增大,其抑菌百分率下降.结论:壳聚糖在体外对Hpylori有抑菌作用,并且此作用在酸性条件下明显加强.不同分子质量壳聚糖及金属离子对壳聚糖抗Hpylori作用有影响.