反向PCR—SSOP技术行HLA—AB分型与临床应用

建立快速,准确的DNA分型技术并用于临床移植前HLA-AB配型,以弥补血清学分型技术的局限性。采用反向聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针杂交技术（反向PCR-SSOP）进行DNA分型,可检出HLA-A（*0101-8001）和B（*07021-8201）等等位基因。结果表明,发现利用反向PCR-SSOP技术对所有样本分型均获成功,无假阳性和假阴性结果出现;美国洛杉矶加州大学（UCLA）质控细胞DNA分型结果与UCLA公布的测序结果一致。血清学与基因分型相比。血甭学结果HLA-A错检率6.4%和HLA-B错检率为7.4%。2例白血病病人分别有一个HLA抗原血清学方法不能检出。结论提示,反向PCR-SSOP技术用于HLA分型分辨率高,简单快速。结果直观、准确。分型结果较血清学方法更加精确,可适用于临床应用。     

微卫星位点检测在异基因干细胞移植中的应用研究

目的：利用PE－377型DNA测序仪对来自不同染色体上的微卫星D3S1358，vWA,FGA,D8S1179,D21S11,D18S51,D5S818,D13S317,和D7S820共9个位点及性别位点Amelogenin进行基因型检测，并探讨其在异基因造血干细胞移植中作为供造血干细胞植活证据的可行性。方法：用多重PCR和四色荧光自动化检测技术分析9个微卫星位点，并比较供和受移植前，后的基因型，结果和结论：本研究所选用的9个微卫星位点可作为异基因造血干细胞移植中供干细胞植活的证据。     

广东汉族人群MICA和MICB微卫星多态性分布

目的　调查广东地区汉族人群 MICA基因第 5外显子和 MICB基因第 1内含子微卫星多态性分布。方法　应用聚合酶链反应和荧光 ( 6 - FAM)自动化检测技术 ,对广东地区共 10 6名无亲缘关系样本进行 MICA和 MICB微卫星基因分型 ,并计算这两个微卫星的基因频率、基因型频率、个体鉴别力、期望杂合性、多态性信息含量和非父排除率。结果　MICA和 MICB微卫星基因型分布符合 Hardy- Weinberg平衡。MICA A5基因频率最高为 0 .2 877,A4基因频率则最低为 0 .132 1;A5 - 5 .1( 14 .15 % )和 A5 - 5 ( 10 .38% )基因型分布频率较高。 MICB CA14等位基因频率最高为 0 .32 5 5 ,CA19、CA2 8等位基因频率最低为0 .0 0 4 7,未检出 CA2 7。 CA14 - CA14 ( 14 .15 % )基因型分布频率较高。结论　 MICA基因第 5外显子和MICB基因第 1内含子微卫星适合作为中国人群的遗传标志 ,用于人类学、遗传疾病基因连锁分析、法医学亲子鉴定和个体识别等研究领域     

中药封包结合推拿预防股骨粗隆间骨折术后下肢深静脉血栓等并发症临床研究

目的：观察中药封包结合推拿预防股骨粗隆间骨折术后下肢深静脉血栓等并发症的临床疗效。方法：按随机数字表法将108例股骨粗隆间骨折术后患者分为对照组和观察组各54例。对照组采用低分子肝素钙治疗预防下肢深静脉血栓,观察组在对照组基础上予以中药封包结合推拿治疗。比较2组术前、术后凝血指标及D-二聚体（D-D）水平、患肢大腿周径,并比较2组下肢深静脉血栓发生率。结果：术后7 d、术后2周,2组凝血酶原时间（PT）、部分凝血酶活酶时间（APTT）水平均逐渐升高（P<0.05）,且同一时间点观察组高于对照组（P<0.05）。术后7 d,2组D-D水平升高（P<0.05）,但观察组低于对照组（P<0.05）;术后2周,2组D-D水平较术后7 d降低（P<0.05）,且观察组仍低于对照组（P<0.05）。术后3 d、7 d、2周,2组患肢大腿周径均较术前增大（P<0.05）,但呈逐渐减小趋势（P<0.05）,且同一时间点观察组小于对照组（P<0.05）。观察组下肢深静脉血栓发生率为1.85%,低于对照组12.96%(P<0.05)。治疗后,2组...     

PCR-SSP行HLA-DR分型在脐血库中的应用

目的 寻找一种简便、有效的方法对脐血样本作HLA-DR分型。方法 采用异硫氰酸胍法抽提DNA,应用PCR-SSP方法进行HLA-DR分型。结果 检出DRB1等位基因15个,未见DRl3．2。结论 异硫氰酸胍法抽提DNA快速、简便,PCR-SSP方法行HLA-DR分型准确、可靠,能用于脐血标本的HLA-DR分型。     

中华(上海)骨髓库北方人群HLA多态性调查

调查中华(上海)骨髓库北方人群HLA多态性及其频率分布特征。用微量淋巴细胞毒试验检测11995名无关供者HLA-A、B抗原,并用PCR-SSP和反向PCR-SSOP技术对疑难标本进行复检。计算其中3 736名北方人群 HLA-A、B的抗原频率、基因频率和HLA-A、B位点单倍型频率、连锁不平衡参数。调查中共检出A位点抗原26种,B位点抗原54种,最常见HLA-A、B抗原包括A2,A11,A24,A30,A33,B13,B46,B51,B58,B60,B61,B62等。连锁不平衡参数大于0.0005的单倍型有40多种,最常见的单倍型有A2-B46,A30-B13,A33-B58等。结果显示中华(上海)骨髓库北方人群HLA多态性有自身特点,频率分布介于南、北汉族之间。     

20596名汉族造血干细胞供者HLA多态性统计学分析

目的了解中国汉族人群中HLA-A,B,DRB1基因和单体型频率分布特征。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物和序列特异性寡核苷酸探针技术,对20596名健康汉族无关供者进行HLA基因分型,并翻译为相应的抗原特异性;采用最大数学预期值算法(expectation-maximization,EM)计算HLA基因和单体型频率,并统计相关的遗传参数。结果20596名汉族无关供者中,频率>0.1的A、B、DRB1座位特异性分别为A2、A11、A24,B46、B13、B60,DR9、DR12、DR4、DR15;频率>0.05的A-B、B-DRB1单体型为A2-B46、A33-B58、A30-B13、B46-DR9、B13-DR7,频率>0.03的A-B-DRB1单体型为A30-B13-DR7、A2-B46-DR9、A33-B58-DR17;频率>7.27×10-5的有意义两座位单体型中,A30-B13、A69-B52、A33-B58、B8-DR17连锁不平衡强度最高(RLD>0.8)。结论中国汉族人群HLA基因和单体型多态性较为丰富,其频率分布数据和相关遗传参数为临床移植供者的选择、资料库志愿者招募策略的制定提供了重要参考。     

应用中高分辨率分型方法分析中国人群HLA-B15组的多态性

目的　了解人类白细胞抗原(HLA)系统中最常见、最复杂且最难分型的B15组的多态性情况，并探讨其是否影响移植时供的选择。方法　对194名随机健康人群用反向PCR—SSO方法做HLA—AB分型，同时，对部分样品作HLA—AB血清学分型，以期得到与等位基因对应的血清学特异性。结果　本研究共得到7种属于B15组的等位基因，包含了4种血清学特异性。在中国人群HLA—B15组中，B^*1501占绝大多数，B^*1502，B^*15ll，B^*1518，B^*1527的分布频率相似。结论 B^*1527较常见，其与B^*1501(两均为B62)在供受间错配、是否能导致移植物抗宿主反应(GVHD)等方面，需要作进一步的研究。结果提示在移植时对于HLA—B15组如仅做低分辨率分型是不够的。     

除痹舒筋通络方熏蒸治疗对老年股骨头坏死全髋关节置换术后髋关节功能的影响

股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)是多种因素导致的股骨头结构改变、股骨头塌陷,继而出现髋关节功能障碍的疾病,是临床上常见的难治性骨科疾病[1].老年人因为骨质疏松、骨性关节炎、外伤、营养状态下降等原因,相对于年轻人群ONFH的发病率更高[2].全髋关节置换术(total ...     

中华（上海）骨髓库的HLA分布报告

目的 报告中华（上海）骨髓库中HLA血型资料,了解中国人群HLA分布特点。方法 用微量淋巴细胞毒试验检测11995名志愿者的HLA－A、B抗原,并用序列特异引物聚合酶链反应（PCR－SSP）进行DNA水平的质控和对有颖问结果作复查。结果 共检出A座位特异性25种,B座位抗原特异性52种,有显著意义的连锁不平衡单型有62种,其中以A2－B46、A30－B13、A33－B58、A11.1－B60、A24-B62、A24－B60等为最常见;检索HLA－A、B、DR抗原（基因）匹配志愿者的“命中率”约为1‰。结论 中国人群HLA分布有自身特点,而现有骨髓库HLA－A、B基因的遗传特征介于南、北方汉族之间,但偏向于北方人群。