血小板源性内皮细胞生长因子小干扰RNA质粒的构建和鉴定

目的构建针对血小板源性血管内皮生长因子（PDECGF）小干扰RNA（siRNA）表达质粒和阴性对照质粒pIASRC-PDECGF，并观察对PDECGF表达的影响。方法构建针对PDECGFsiRNA表达质粒pIASR-PDECGF和阴性对照质粒pIASRC—PDECGF，将沟建成功的质粒转染大肠癌细胞株GC7901，观察PDECGF蛋白表达的影响。结果成功构建针对PDECGF siRNA表达质粒pIASR-PDECGF。并发现它能够明显抑制PDECGF的表达。而阴性对照质粒则无此作用。结论血小板源性内皮细胞生长因子小干扰RNA能够特异性抑制PDECGF的表达。     

胰腺-空肠端端套入式间断U型缝合法吻合在胰腺外科中的应用

目的:探讨胰腺-空肠端端套入式间断U型缝合法吻合在胰腺外科应用的临床价值。方法:回顾性分析我院自2001年1月到2006年4月间施行的胰头十二指肠切除术83例。比较不同胰肠吻合方法对胰瘘发生的影响。结果:胰瘘总发生率为27%(22/83)。胰肠端端套入式间断U型缝合法吻合术后恢复良好,无胰瘘发生。端端吻合的胰瘘发生率为40%(10/25);端侧吻合的胰瘘发生率为27%(12/44)。比较各种吻合方式,端端套入式间断U型缝合法吻合的胰瘘发生率显著低于端端吻合(P<0.01)和端侧吻合(P<0.05),而端端吻合和端侧吻合之间胰瘘发生率无明显差异(P>0.05)。结论:胰腺-空肠端端套入式间断U型缝合法吻合降低手术所致胰肠吻合口瘘的发生率,效果满意。但因临床例数较少,其安全可靠性、实用合理性还有待进一步观察、证实。     

新发现的Livin基因在结直肠癌组织中mRNA表达及其临床意义

目的 研究Livin基因在结直肠癌组织表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链式扩增反应对30例结直肠癌组织、30例癌旁正常组织及10例正常成人大肠组织中Livin mRNA的表达进行检测。结果 10例正常成人大肠组织中Livin基因均无表达。结直肠癌及癌旁正常组织Livin基因表达阳性率均为100％，但癌旁正常组织Livin基因表达量较癌组织表达量明显下降，（P〈0．05），Livin基因表达量与患者的年龄、性别、肿瘤的分期、分级差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 Lvin基因表达升高与结直肠癌密切相关。可能参与结直肠癌的发生。     

携带HIV-1vpr基因的重组腺病毒的构建与鉴定

目的　构建携带HIV 1vpr基因的重组腺病毒 ,为进一步基因治疗的实验研究奠定基础。方法　利用AdEasy 1系统 ,通过含有目的基因片段vpr的穿梭载体pShuttle CMV/vpr和骨架质粒pAdEasy 1在细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒pAdCMV/vpr。将重组质粒转染 2 93细胞包装出重组腺病毒rvAdCMV/vpr。利用PCR等方法对重组腺病毒进行鉴定。结果　获得表达vpr蛋白的重组腺病毒。结论　成功构建出携带HIV 1vpr基因的重组腺病毒 ,为更深入的基因治疗研究奠定了基础。     

功能性胰岛素瘤的诊治（附12例）

目的 探讨功能性胰岛素瘤的诊治特点,提高对该病的认识.方法 回顾性分析2000年至2009年吉林大学中日联谊医院收治的12例功能性胰岛素瘤临床资料.结果 12例术前空腹血糖值和胰岛素阳性率分别为92%和89%,IRI/G和C-肽的阳性率达100%.术前腹部超声、CT和MRI定位诊断准确率分别是75%、36%和0%,而术中扪诊结合术中超声的定位准确率达100%.术中血糖监测,10例在肿瘤切除后1 h内血糖上升1倍以上,2例1.5 h后上升1倍以上.随访7例,均未再出现低血糖症状.3例胰瘘.结论 对疑有功能性胰岛素瘤的病例,除检测血糖、胰岛素外还应检测IRI/G、C-肽.术中扪诊及超声是肿瘤定位的有效手段.监测肿瘤切除后血糖变化,结合术中快速病理可判定肿瘤是否完全切除.     

严重脊柱后凸畸形患者腹腔镜腹部手术三例报告

目的探讨腹腔镜手术在严重脊柱后凸畸形患者中应用的安全性及临床效果。 方法近期严重脊柱后凸畸形患者腹腔镜肝肿物切除1例，腹腔镜胆囊切除1例，腹腔镜胆囊切除、胆道探查取石、T管引流1例。 结果腹腔镜肝肿物切除患者因腹腔粘连、胸廓畸形空间受限，导致手术失败，更改为射频消融治疗。腹腔镜胆囊切除、胆道探查取石患者手术顺利，术后无明显并发症，安全出院。 结论严重脊柱后凸畸形患者的腹腔镜手术针对相对简单手术，安全、可行；针对复杂手术，特别是上腹部复杂手术应慎重。术前常规多学科会诊，充分术前评估及多种手术预案，术中正确建立操作空间，保持术野清晰，仔细解剖，精准操作，保证患者手术安全、可行。     

结肠冗长症合并直肠黏膜脱垂的外科治疗

结肠冗长症是一种近十多年来才逐渐被人们认识的一种疾病，是结肠在发育过程中因基因再复制而生长过长所致的一种先天性结肠畸形；也有学者认为长期便秘与大量使用泻剂可促进结肠及其系膜的延长。随着人们生活方式的改变和临床辅助检查技术的发展。结肠冗长症的发病率呈逐年上升趋势．因此积极探讨其治疗方法具有重要临床意义。结肠冗长症最主要的症状为顽固性便秘。本研究认为便秘症状出现2年以上者必然伴有直肠黏膜脱垂，采用左半结肠切除术加直肠黏膜结扎注射固定术治疗结肠冗长症可获得良好效果。     

苯乙酸对肝癌细胞的抑制作用及其机制

目的：阐明苯乙酸(PA)对肝癌细胞系SSMC-7721细胞增殖的抑制作用及部分作用机制,探讨PA用于肝癌治疗的可行性。方法：以0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol·L^-1浓度的PA作用于对数生长期的肝癌细胞系SSMC-7721细胞,检测上述各浓度时PA在24、48和72 h对SSMC-7721细胞的抑制率。应用噻唑蓝(MTT)比色法,以0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol·L^-1的PA作用于SSMC-7721细胞,分别于24、48、72 h 对细胞增殖抑制率进行检测;流式细胞术检测2.00 mmol·L^-1PA作用36 h后的SSMC-7721细胞周期各时相的变化;使用透射电镜观察经2.00 mmol·L-1PA作用36 h后的SSMC-7721细胞超微结构的改变;用Caspase-3活性检测试剂盒检测经过和不经过PA作用的SSMC-7721细胞中Caspase-3活性的差异。结果：0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol·L^-1的PA均可以抑制SSMC-7721细胞生长,随着浓度递增24 h 细胞增殖抑制率为7.2%～73.1%,48 h 为9.1%～87.5%,72 h 为15.8%～91.9%,随PA浓度增加和作用时间延长,抑制率逐渐增加,2.00 mmol·L-1 PA 为最佳实验浓度;PA可使SSMC-7721细胞的G0/G1期和G2/M期细胞比例增加;PA可通过Caspase-3途径诱发SSMC-7721细胞凋亡,电镜下可观察到凋亡的特征性变化。结论：PA可有效抑制肝癌SSMC-7721 细胞的增殖,诱发细胞凋亡,Caspase-3活化是参与机制之一。     

Survivin反义寡核苷酸对人结肠癌细胞的促凋亡作用

目的:探讨Survivin反义寡核苷酸对大肠癌细胞的促凋亡作用。方法:用脂质体介导Survivin反义寡核苷酸转染LS174T细胞,利用RT-PCR检测Survivin mRNA的表达;利用Western blot检测Survivin蛋白的表达;检验寡核苷酸作用前后caspase 3活性的变化及细胞凋亡情况。结果:Survivin-ASODN可使大肠癌细胞中survivin mRNA和蛋白的表达下降;caspase-3活性明显增加(P<0.05);细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:Survivin反义寡核苷酸可以增强caspase-3的活性,有效诱导大肠癌细胞凋亡,反义核酸技术有可能成为临床大肠癌基因治疗的一种新途径。     

胰蛋白酶抑制剂在胰岛分离中的应用

1蛋白酶抑制剂概述 胰蛋白酶抑制剂(Trypsin inhibitor,TI)泛指具有抑制胰蛋白酶活性作用的一类物质,其分子量一般都比较小,作用机制清楚,生物体内许多重要的生理过程都受蛋白酶及其抑制剂的调控,因而在疾病的诊断、治疗和预防等方面,LI作为新型药物显示出了广阔的应用前景.