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目的构建一种无标记检测CD4~+T淋巴细胞的免疫传感器。方法采用葡萄球菌A蛋白(SPA)法定向固定单克隆抗体于金叉指微阵列电极表面以捕获CD4~+T淋巴细胞,并用循环伏安法(CV)扫描对金叉指微阵列电极表面的修饰情况进行表征,最后通过电化学交流阻抗谱法(EIS)对免疫传感器捕获的CD4~+T淋巴细胞进行阻抗检测,通过等效电路拟合获得的阻抗值变化绘制标准曲线。结果该免疫传感器检测CD4~+T淋巴细胞的线性范围是(5.0×103-5.0×106)/mL,检测下限为5.0×102/mL。结论该免疫传感器的结果准确可靠,检测过程简便,价格低廉,有望用于实时检测系统,为实现快速、准确、价廉的CD4~+T淋巴细胞分类计数提供帮助。 相似文献
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目的:研究白细胞介素-17(IL-17)与同型半胱氨酸(Hcy)和胱抑素C(Cys-C)联合检测在2型糖尿病肾病肾损伤中的诊断价值。方法将107例糖尿病肾病患者随机分为无清蛋白尿组,微量清蛋白尿组和临床清蛋白尿组,对照组选取同期门诊的健康体检者40例,比较其中 Hcy,Cys-C和IL-17的水平变化。结果糖尿病肾病组患者 Hcy,Cys-C 和IL-17水平明显升高,与对照组差异有统计学意义(P<0.05),且随着蛋白尿排泄量的增加,IL-17,Hcy和Cys-C水平不断升高;IL-17与 Hcy、Cys-C水平呈正相关(分别为r=0.75、r=0.59,P<0.05);对照组IL-17与 Hcy、Cys-C的综合阳性检出率为5.0%,而微量清蛋白尿组和临床清蛋白尿组的联合检测阳性率分别为88.6%和91.9%,联合检测的阳性率明显高于对照组(P<0.05),表明3项联合检测可显著提升2型糖尿病的检出率。结论 IL-17与 Hcy和Cys-C检测对糖尿病肾功能损伤较为敏感,联合检测阳性检出率高于各单项检出率,在预防、延缓糖尿病肾病中有较重要的临床价值。 相似文献
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目的 分析临床分离的鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药特点及耐药机制.方法 采用K-B纸片法测定33株鲍氏不动杆菌对喹诺酮类等21种抗菌药物的耐药性;用PCR技术扩增33株鲍氏不动杆菌的gyrA基因的耐药决定区,PCR产物经纯化后测序与GenBank中的标准序列比较,分析其突变情况.结果 33株鲍氏不动杆菌中,8株对环丙沙星耐药,占24.2%,4株对左氧氟沙星耐药占12.1%;对环丙沙星耐药的8个菌株均有gyrA基因突变,导致氨基酸变异为Ser-83→Leu,其中包括对左氧氟沙星耐药的4个菌株;所有对环丙沙星敏感的菌株未出现gyrA基因突变.结论 gyrA基因突变决定鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药. 相似文献
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利用特色化的中心复合设计,以香豆素-6为模型药物,通过控制特定的因素和指标,制备粒径不同而其他性质相同的纳米脂质载体(NLCs),并对其形态、Zeta电位和包封率等理化性质进行研究。通过体外稳定性实验考察NLCs在K-R液和PBS缓冲液中的稳定性,同时以透析法研究制剂的体外释药行为特性。采用MTT法研究空白NLCs和载药NLCs的细胞毒性,活体成像技术考察NLCs在小鼠胃肠道中的滞留时间。结果显示:制备所得的粒径分别为100,200及300 nm的香豆素-6纳米脂质载体,分散性良好,在K-R液和PBS缓冲液中可以稳定存在,并且体外24 h香豆素-6的累积释放量均不超过总量的7%。MTT实验表明:空白NLCs和载药NLCs对Caco-2毒性较小。小鼠肠内滞留试验显示:NLCs在灌胃给药6 h后仍然能够在胃肠道中检测到。因此,制备得到的不同粒径NLCs可以作为模型制剂,用于细胞水平和动物水平上研究NLCs粒径对口服吸收的影响。 相似文献
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目的研究氨基糖苷乙酰胺转移酶基因的突变形式aac(6′)-Ib-cr在肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床株中的分布状况;分析携带该基因菌株对环丙沙星、氨基糖苷类和头孢菌素类的耐药特征。方法利用多聚酶链式反应检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床分离株中aac(6′)-Ib-cr基因携带情况,采用BtsCI酶切消化,经DNA测序确认aac(6′)-Ib-cr基因;统计分析aac(6′)-Ib-cr基因与环丙沙星、头孢菌素类和氨基糖苷类耐药性关系。结果aac(6′)-Ib-cr基因在肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率分别为12.6%(30/238)和18.8%(13/69);aac(6′)-Ib-cr阳性株与阴性株对环丙沙星的耐药率分别为72.1%(31/43)和48.1%(127/264),差异有统计学意义(x2=8.52,P〈0.05)。肺炎克雷伯菌aac(6′)-Ib-cr基因阳性株对阿米卡星的耐药率高于aac(6′)-Ib-cr基因阴性株(x2=4.25,P〈0.05)。aac(6′)-Ib-cr基因阳性株和阴性株对庆大霉素的耐药率、常用的头孢菌素类的耐药率和多重耐药率均较高,无统计学差异。结论本地区肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床分离株中,aac(6′)-Ib-cr基因均有检出;aac(6′)-Ib-cr基因阳性株对环丙沙星耐药率明显高于阴性株,肺炎克雷伯菌中aac(6′)-Ib-cr基因阳性株对阿米卡星的耐药率明显高于阴性株,具有统计学意义。aac(6′)-Ib-cr基因阳性株和阴性株对常用头孢菌素类的耐药率和多重耐药率均较高,无统计学意义。 相似文献
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目的 总结陆军军医大学第二附属医院检验住院医师规范化培训(简称“住培”)经验,为持续改进规范化培训工作奠定基础,为培养高素质检验医师团队提供参考。方法 结合科室住培教学开展情况,从课程体系设置及考核评估方面分析培训内容,总结教学经验,探讨存在的问题和可行的解决方案。结果 科学合理安排轮转顺序可保证同质均衡水平的培训效果;多维度精细化的教学模式能充分调动住培医师学习的积极性,丰富知识储备,建立临床及科研思维;将住培大纲学习内容科学合理的分散在实体运行岗各阶段,使住培医师更容易掌握操作技能;严格的考核评估制度是保证教学质量的关键环节,同时需注重保障教师教学能力,提高教学质量。提出结合实际制订培养计划、问题导向式教学及个性化分层培养方案的建议。结论 我国检验专业住培尚无统一的培训及考核标准,培养体系多注重过程考核,忽视了成果评价。各基地应结合自身实际制订培养计划,完善培养体系,各住培基地可采取优势互补,相互合作的培养方式。 相似文献
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目的 构建一种基于单壁碳纳米角(single-walled carbon nanohorns,SWCNHs)与空心纳米铂链(hollow Pt chains,HPtCs)复合物(SWCNHs@HPtCs)的电化学适配体传感器.方法 将单壁碳纳米管(single-wall carbon nanotubes,SWCNTs)溶液滴加在洁净的玻碳电极上(glassy carbon electrode, GCE),使之在电极表面形成一层膜,通过循环伏安法(cyclic voltammetry,CV)在电极表面电沉积纳米金(Au nanoparticles,AuNPs),得到AuNPs/SWCNTs/GCE.进一步通过金硫键将穿孔素适配体固载在电极表面.制备SWCNHs@HPtCs复合物,固载穿孔素抗体和氨基二茂铁(aminoferrocene,AFc),当目标物穿孔素存在时,可与适配体和抗体形成夹心结构,使标记有AFc的SWCNHs@HPtCs复合物连接到电极表面,通过示差脉冲伏安法(differential pulse voltammetry,DPV)检测AFc还原峰电流值变化,实现对穿孔素的定量检测.结果 成功制备了SWCNHs@HPtCs复合物.反应底液的最佳pH值为6.5,复合物最佳孵育时间为60 min.在优化实验条件下,连续扫描50圈,峰电流值下降6.3%.穿孔素浓度在1~20 nmol/L范围内与DPV峰电流值呈良好的线性关系,检出限为0.56 nmol/L.结论 该电化学传感器具有电流响应快,灵敏度高,稳定性好,选择性好的特点,可应用于穿孔素的检测. 相似文献