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1.
目的表达和纯化福氏志贺菌毒力蛋白IpaC,研究福氏志贺菌的致病机制。方法将含有ipaC基因的pET32a-i-paC表达质粒载体转化大肠杆菌BL21(λDE3),在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,对诱导后的表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIA expressionistTM蛋白纯化系统来纯化目的蛋白。结果诱导后的表达产物经SDS-PAGE发现有一相对分子质量约为63 000的条带,其含量约占总蛋白量的11%,以350 mmol/L咪唑洗脱液洗脱,目的蛋白纯度可达90%以上。结论pET32a-ipaC重组表达质粒转入大肠杆菌后,可稳定、高效地表达目的蛋白,QIA-expressionistTM蛋白纯化系统是一种简便、高效的纯化系统,可获得高纯度的目的蛋白。 相似文献
2.
自动酶联荧光免疫分析系统检测冻肉中沙门菌的评价 总被引:6,自引:0,他引:6
目的]评价自动酶联荧光免疫分析系统(VIDAS)检测冻肉中沙门菌的灵敏度和特异性。[方法]使用VIDAS法和常规细菌培养法平行检测各种冻肉样品中沙门菌,以常规细菌培养法作参照,对VIDAS技术进行评价。[结果]155份样品中VIDAS检出沙门菌阳性10例,阴性145例;常规细菌培养法检测出VIDAS法阳性样本中的9例呈阳性,其余146例皆为阴性。VIDAS法用于冻肉沙门菌检测的灵敏度为100%,特异性为99%。[结论]VIDAS法检测冻肉中沙门菌具有很高的灵敏度和特异性,用于进出口冻肉的检测,可大大缩短检验时间,加快通关速度。 相似文献
3.
目的 制备和鉴定攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体并研究其抗乳腺癌作用。方法 MTT法检测攀登鱼藤异黄酮、大豆异黄酮和金雀异黄酮对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF7、SKBR3)增殖活性影响;克隆形成实验探讨攀登鱼藤异黄酮对三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231)克隆形成的影响;细胞划痕实验检测MDA-MB-231细胞迁移;蛋白印迹法检测MDA-MB-231细胞迁移和侵袭蛋白MMP2,MMP9表达量;薄膜水化法制备温敏脂质体及攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体;透射电子显微镜、动态光散射扫描仪以及紫外分光光度计分别鉴定攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体形貌、粒径、包封率及稳定性,并用MTT法检测攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体抗小鼠乳腺癌细胞(4T1)增殖活性。结果 攀登鱼藤异黄酮可显著抑制人乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF7、SKBR3)增殖,且效果优于大豆异黄酮和金雀异黄酮;攀登鱼藤异黄酮显著减少三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231)克隆形成量,降低其划痕面积的愈合速度,并下调MMP2和MMP9的表达。薄膜水化法制备得到的温敏脂质体呈均质不规则球形,其粒径为56.23±0.61 nm、聚合物分散指数为0.241±0.014、Zeta电位为-40.40±0.46 mV、包封率为(87.68±2.41)%、稳定性较好,且抗小鼠乳腺癌增殖活性增强。结论 攀登鱼藤异黄酮通过抑制乳腺癌细胞增殖、转移和侵袭发挥其抗癌活性,攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体具有较好的物理性能及抗乳腺癌活性。 相似文献
4.
目的研究丁酸钠(sodium butyrate,Na B)诱导结直肠癌细胞HCT-116自噬的分子机制。方法免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测Na B诱导结直肠癌细胞自噬标志蛋白微管相关蛋白1A和1B(microtubule-associated protein1A/1B-light chain 3,LC3)的蛋白与m RNA表达水平,以及免疫印迹法检测钙调素依赖蛋白激酶的激酶β(Ca~(2+)/calmodulin-dependent protein kinase kinaseβ,Ca MKKβ)的磷酸化蛋白表达水平;免疫印迹法检测RNAi下调Ca MKKβ表达对Na B诱导结直肠癌细胞自噬的影响;免疫印迹法和荧光定量PCR检测细胞内钙离子螯合剂(BAPTA-AM)对Na B诱导结直肠癌细胞自噬的影响,以及免疫印迹检测其对p-Ca MKKβ蛋白表达水平的影响。结果Na B可上调LC3-II蛋白与m RNA表达水平,即诱导结直肠癌细胞自噬;Na B可诱导Ca MKKβ蛋白磷酸化;RNAi下调Ca MKKβ表达可显著抑制Na B诱导的LC3-II蛋白的表达,即抑制Na B诱导的结直肠癌细胞自噬;BAPTA-AM预处理可抑制Na B诱导的Ca MKKβ蛋白磷酸化以及下调LC3-II蛋白与m RNA表达水平。结论 Na B可通过Ca~(2+)-Ca MKKβ信号通路诱导结直肠细胞自噬。 相似文献
5.
6.
目的研究三价铬纳米微粒对大鼠胴体组成及肌细胞胰岛素受体基因表达的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,第1组饲喂基础日粮作为对照,第2组在基础日粮上以三氯化铬形式添加300μg/kg铬,第3、4、5组在基础日粮上以三价铬纳米微粒形式分别添加150、300和450μg/kg铬,试验6w后测定胴体组成及肌细胞胰岛素受体基因表达量。结果以三价铬纳米微粒形式添加150、300和450μg/kg铬使大鼠体脂含量、血清胰岛素水平显著降低,使肌细胞胰岛素受体基因表达量显著提高;而以CrCl3形式添加300μg/kg铬对大鼠体脂含量、血清胰岛素水平和肌细胞胰岛素受体基因表达量都没有产生显著影响。结论将无机铬经纳米粒径化处理后能显著提高其改善大鼠胴体组成的能力,这种提高作用可能与三价铬纳米微粒增强胰岛素功能有关。 相似文献
7.
产毒性大肠杆菌(ETEC)中毒力岛分布的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 了解小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛在产毒性大肠杆菌中的分布,以便于进一步深入研究毒力岛在大肠杆菌中的结构的完整性和功能。方法 PCR扩增和原位杂交及基因序列分析,结果 在检测的93株产毒性大肠杆菌(ETEC)的毒力岛的检出率为32.25%(32/93),而且这些阳性菌株中的毒力岛大部分连接到asntRNA(天门冬氨酸tRNA0位点。结论 产毒性大肠杆菌是致病性较强的病原菌之一,而小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛在产毒性大肠杆菌中阳性率较高的分布。对于进一步研究产毒性大肠杆菌的毒力的变化和毒力的调控以及细菌毒力的进化具有重要意义。 相似文献
8.
目的 观察中药保留灌肠配合多环节护理治疗溃疡性结肠炎的临床疗效.方法 将42例溃疡性结肠炎患者给予中药保留灌肠,并配合多环节护理,疗程15 d,观察患者症状改善情况.结果 本组病例临床治疗,显效33例,有效9例,总有效率100 %.结论 中药保留灌肠配合多环节护理治疗溃疡性结肠炎有良好的临床疗效. 相似文献
9.
[目的]研究三氯化铬(CrCl3)和吡啶羧酸铬(CrPic)对热应激大鼠免疫功能的影响.[方法]分别以CrCl3和CrPic形式补充300 μg·kg-1铬饲喂SD大鼠6周后测定血清中免疫球蛋白、补体、溶菌酶、胰岛素、皮质醇水平以及外周血、脾脏淋巴细胞体外转化率.[结果]CrPic提高了大鼠血清中免疫球蛋白IgG、IgM和溶菌酶的水平,同时降低了血清中胰岛素和皮质醇水平(P<0.05);添加CrCl3降低了SD大鼠血清中胰岛素和皮质醇水平(P<0.05);CrPic能增强外周血和脾脏T/B淋巴细胞转化率(P<0.05),而添加CrCl3并不能提高T/B淋巴细胞转化率.[结论]补充三价铬能增强热应激大鼠的免疫功能,CrPic增进免疫的能力要强于CrCl3. 相似文献
10.