Smad3基因缺失加快的小鼠皮肤创面收缩速度机制研究

目的:研究Smad3基因剔除小鼠皮肤创伤愈合速度加快的机制。方法:利用不同基因型的Smad3基因剔除小鼠及对照小鼠进行皮肤缺失型创伤试验,观察组织病理变化;分离不同基因型小鼠胚胎成纤维细胞,观察其胶原收缩能力的变化。结果:Smad3基因剔除小鼠在皮肤创伤愈合时表现出重上皮化进度快;成纤维细胞胶原收缩试验中,Smad3缺失的细胞在有血清的培养条件下胶原收缩速度快于野生型细胞,而在无血清培养条件下,有无转化生长因子β1(TGF-β1)两者变化不显著。有血清培养时Smad3缺失的成纤维细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)增加。结论:SMAD3通过抑制α平滑肌肌动蛋白在成纤维细胞中的表达调节成纤维细胞的收缩能力,以致Smad3缺失小鼠皮肤创面收缩速度加快。     

Smad3基因缺失加快的小鼠皮肤创面收缩速度机制研究

目的：研究Smad3基因剔除小鼠皮肤创伤愈合速度加快的机制。方法：利用不同基因型的Smad3基因剔除小鼠及对照小鼠进行皮肤缺失型创伤试验，观察组织病理变化；分离不同基因型小鼠胚胎成纤维细胞，观察其胶原收缩能力的变化。结果：Smad3基因剔除小鼠在皮肤创伤愈合时表现出重上皮化进度快；成纤维细胞胶原收缩试验中，Smad3缺失的细胞在有血清的培养条件下胶原收缩速度快于野生型细胞。而在无血清培养条件下，有无转化生长因子β1(TGF-β1)两者变化不显著。有血清培养时Smad3缺失的成纤维细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)增加。结论：SMAD3通过抑制α平滑肌肌动蛋白在成纤维细胞中的表达调节成纤维细胞的收缩能力，以致Smad3缺失小鼠皮肤创面收缩速度加快。     

StreamlineSP扩张柱层析在重组人尿型纤溶酶原激活剂中试生产中的应用

尿型纤溶酶原激活剂 (ｕｒｉｎａｒｙｔｙｐｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ,ｕ ＰＡ)包括单链型和双链型两种形态 ,以单链形态为主的ｕ ＰＡ具有很好的选择性溶血栓作用。1985年 ,Ｈｏｍｅｓ等在大肠杆菌中获得了ｕ ＰＡ的表达并纯化[1] 。近几年 ,用哺乳动物细胞表达糖基化ｕ ＰＡ取得了很大进展[2 ,3] 。本实验室成功地建立了工艺简便、效率高的重组人ｕ ＰＡ的中试生产纯化工艺。工程细胞表达的ｕ ＰＡ ,经阳离子交换层析、亲和层析和凝胶过滤层析 ,纯度大于 95% ,年生产量大于 50ｇ ,收率大于 6 0 %。目前 ,还未见到优于此…     

小鼠胚胎干细胞体外定向心肌细胞分化的研究

目的：小鼠胚胎干细胞（embryonic stem cell,ES细胞）体外定向心肌细胞分化模型的建立。方法：通过悬滴培养技术定向诱导ES细胞分化为拟胚体,进而分化为心肌细胞,并用RT－PCR对四种肌肉肌动蛋白在EBs中的表达进行了鉴定。结果：在拟胚体和进一步分化的ES细胞中观察到自发节律性收缩的心肌细胞,α－平滑肌肌动蛋白（血管和胃肠道平滑肌）以及纹状肌肉肌动蛋白（心肌和骨骼肌）在这些心肌细胞样的细胞中均能表达。结论：小鼠胚胎干细胞体外定向心肌细胞分化模型的建立,可用于研究相关基因在心肌发育过程中的直接或间接作用,有助于胚胎干细胞衍生的心肌细胞用于临床治疗作用的研究。     

Smad5 基因敲除对小鼠前庭功能的影响

目的 观察Smad5基因敲除对小鼠前庭功能的影响,探讨Smad5基因是否为前庭功能相关基因.方法 参照Petrosini报告的动物失衡行为评分方法,观察28只实验小鼠的平衡状态.对头偏,躯干卷曲,肢体外展,强迫环形运动,头震等五项前庭失衡症状进行综合评分.20只Smad5基因缺陷小鼠(+/-)和15只野生鼠(+/+)进行颈髓硬膜表面短声诱发电位检测前庭功能.结果 动物失衡行为评分方法 进行综合评分,两组实验小鼠得分均为0分,表明两组动物在平衡功能粗测上无明显异常.颈髓硬膜表面短声诱发电位(CDM-CEP)检测Smad5(+/-)小鼠峰值潜伏期在85 dB SPL、95 dB SPL和105 dB SPL分别为6.85±0.23 ms、6.78±0.20 ms和6.70±0.43 ms.Smad5(+/+)小鼠峰值潜伏期在85 dB SPL、95 dB SPL和105 dB SPL分别为6.15±0.23 ms、6.12±0.20 ms和6.37±0.43 ms.结论 Smad5基因敲除导致CDM-CEP的潜伏期延长,表明Smad5基因敲除对小鼠的前庭功能有一定影响.