溶血对两种发光免疫分析法检测心肌肌钙蛋白I结果的影响

目的评价溶血对两种发光免疫分析法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)结果的影响。方法用已知浓度的cTnI标本与不同程度的溶血标本以1∶9混合,使cTnI浓度分别为0.04和0.5 ng/mL,Hb终浓度分别为0、2、4、6、8、10 g/L,用Beckman CoulterAccess化学发光免疫分析仪和Siemens Advia Centaur CP免疫分析仪分别检测标本中cTnI含量,观察溶血对cTnI检测结果的影响。结果在cTnI浓度为0.04 ng/mL时,溶血对两种发光免疫分析法检测cTnI均有明显影响;而在浓度为0.5 ng/mL时,溶血对两种免疫发光法检测cTnI影响较小,偏差均<10%。结论为保证结果的可靠性,检测cTnI标本应避免溶血。     

尿蛋白SDS-琼脂糖凝胶电泳方法建立及临床应用

目的　建立应用于临床的尿蛋白十二烷基硫酸钠 (SDS) 琼脂糖凝胶 (AGE)电泳方法。方法　分别对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型 4种琼脂糖、不同的缓冲对、电压和电泳时间进行实验 ,确定最佳的分离条件 ,建立测定方法。结果　当Ⅳ型琼脂糖凝胶浓度为4 0g/L ,SDS含量为 1g/L ,在pH 7.0的AMP 咪唑 HCl缓冲体系下进行电泳 ,可以有效地将尿蛋白按分子量大小进行分离。 5 7份临床尿蛋白阳性标本电泳结果表明 ,生理性蛋白尿 2 4例 ,中、高分子蛋白尿 5例 ,小分子蛋白尿 11例和混合型蛋白尿 17例。结论　本法具有分离效果好、操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点 ,可以将尿蛋白按分子量大小分为小分子、中分子以及混合型 ,对肾脏疾病的受损部位和损伤程度的判断具有较高的价值 ,适于基层实验室的常规开展。     

不同全自动血凝分析仪检测APTT结果的一致性

目的初步探讨不同血凝仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)结果的一致性。方法按照EP-2A方案,以ACL-Ad-vance仪及配套ACL试剂检测40例枸橼酸钠抗凝标本APTT结果为Y,CA-7000仪及CA试剂检测APTT结果为X1,CA-7000仪及ACL试剂检测APTT结果为X2,分别进行相关性分析,并判断两个医学决定水平(25 s、50 s)处的临床可接受性。用ACL-Advance仪(ACL试剂)和CA-7000仪(ACL试剂)检测80例不同肝素浓度标本及20例用肝素抗凝治疗患者标本的APTT,并比较差异是否有统计学意义。结果 Y=0.843 5X1-0.318 5,r2=0.928 0;Y=0.984 6X2+0.333 9,r2=0.989 5;各仪器均使用ACL试剂时APTT结果临床均可接受。两台仪器统一使用ACL试剂检测不同肝素浓度标本及临床肝素抗凝治疗患者标本APTT,结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论同一科室不同血凝仪应使用相同APTT试剂,以保证结果的一致性和可比性。     

儿童血清CK-MB活性升高66例分析

目的：分析儿童血清CK-MB活性假性升高原因。方法：用干式化学分析仪检测儿童血清CK、CK-MB活性,对其中CK活性正常,而CK-MB/CK〉30%的66例标本,应用化学发光法检测CK-MB质量。结果：66例CK活性正常,CK-MB/CK〉30%的标本,其CK-MB质量均在正常范围。结论：应用免疫抑制法测定儿童患者CK-MB活性存在假性升高,可使用化学发光法检测CK-MB质量。     

D-二聚体试剂在不同全自动血凝分析仪上的性能评价及结果比对

目的探讨D-二聚体（DD）试剂在不同全自动血凝仪上的性能以及检测结果的一致性。方法按照临床和实验室标准协会（CLSI）相关文件,进行精密度试验、回收实验及线性实验,对日本积水DD试剂在ACL-TOP和CA-7000血凝分析仪的性能进行评价;根据EP9-A2文件,对积水DD试剂在两台血凝仪上的结果进行可比性分析,同时对ACL-TOP血凝仪使用积水试剂和配套试剂检测DD结果进行比较。结果积水DD试剂在CA-7000血凝仪和ACL-TOP血凝仪上日内和日问精密度均〈10％,平均回收率分别为105．42％和9244％,线性范围分别为0-58．9μg／ml和O-574／μg／ml。线性回归方程为Y=0．9528X-0．0158,R^2=0．9766,相对偏差均〈10％,ACL-TOP血凝仪使用积水试剂和配套试剂的结果差异无统计学意义。结论积水DD试剂在ACL-TOP和CA-7000上的性能达到临床应用要求,且在两台血凝仪上的检测结果具有一致性和可比性。     

超薄琼脂糖凝胶的简易制备技术

超薄琼脂糖凝胶由于电泳时产生焦耳热少,因而具有分离效果好、灵敏度高,且电泳结果可以长期保存的优点,已广泛应用于血清蛋白、尿蛋白、同工酶、脂蛋白等电泳中。国外已有商品化试剂盒供应。由于琼脂糖凝胶容易凝固,制板难易程度与凝胶的厚度有关,凝胶越薄制作的难度越大。我们     

乳糜血样对血液分析仪测定血红蛋白结果的影响及消除

目的探讨乳糜血样的脂浊程度对血液分析仪测定血红蛋白(Hb)结果的影响及相关分析,对乳糜血样采取血浆置换的方法,使血液分析仪能够准确测定血红蛋白。方法健康体检者75例并随机分成3组,每组25例,血浆置换等量的25μl,50μl,75μl脂肪乳,模拟不同程度的乳糜标本,观察脂肪乳对血液分析仪测定Hb的影响;临床输入脂肪乳住院患者乳糜血样70例,分别直接上机测定和低速离心后进行血浆置换后上机测定,观察血浆置换等量生理盐水的方法,消除乳糜因素对血液分析仪测定Hb的影响。结果本次实验中75例健康体检者加入不同量的脂肪乳后引起Hb假性增高,置换后增加比为3.77%、6.41%、10.73%,差异均有统计学意义(P0.05),随着脂肪乳含量的增加,对Hb的影响也增大。70例乳糜血样患者,低速离心进行血浆置换前后检测Hb,降低比例4.25%,差异有统计学意义(P0.05)。结论血液分析仪测定乳糜血样血红蛋白假性增高,随着脂肪乳含量的增加对Hb的影响也增大,可用生理盐水置换等量血浆的方法消除脂浊影响,保证血红蛋白检测结果的准确性。     

胃癌微环境中M2亚型巨噬细胞对胃癌间充质干细胞促肿瘤作用的影响

目的 探讨胃癌微环境中M2亚型巨噬细胞对人胃癌间质干细胞(GC-MSCs)发挥促胃癌作用的影响.方法 采用氯磷酸盐脂质体清除BALB/c裸鼠体内巨噬细胞,观察并记录巨噬细胞清除前后GC-MSCs与胃癌细胞共注射组裸鼠的肿瘤体积和质量.收集各组裸鼠及胃癌患者肿瘤组织,反转录PCR (RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测M2亚型相关基因转录及蛋白表达情况.体外共培养实验验证GC-MSCs对巨噬细胞极化的调节作用.结果 体内巨噬细胞清除可明显抑制GC-MSCs共注射组肿瘤的生长(P=0.009).此外,GC-MSCs共注射组裸鼠及胃癌患者肿瘤组织中M2亚型巨噬细胞相关蛋白的转录与表达水平均明显高于对照组或对应癌旁组织.与GC-MSCs直接接触培养72 h后,THP-1来源人巨噬细胞中M2亚型巨噬细胞相关蛋白表达明显上调.结论 胃癌微环境中M2亚型巨噬细胞在GC-MSCs的促胃癌效应中发挥关键作用.     

外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶诊断再生障碍性贫血的价值

目的探讨用流式细胞术检测再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者外周血中性粒细胞膜碱性磷酸酶(m NAP)变化的临床意义。方法病例对照研究。收集2014年8月至2015年12月连云港市第一人民医院收治的初诊全血细胞减少患者198例,其中明确诊断为AA者52例,对照组为非AA导致的全血细胞减少患者146例和体检健康者100例,用流式细胞术检测m NAP,ROC曲线评价其对AA的诊断效能。结果 AA、非AA疾病对照组及健康人对照组m NAP检测结果[M(P25~P75)]分别为13 931(11 128,21 605)、1 875(1 119,3 119)、1 831(1 371,2 411)AB/c,AA组m NAP表达水平明显高于非AA疾病对照组及健康人对照组,差异有统计学意义(P0.01),而非AA组与健康人对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。m NAP诊断AA的ROC曲线下面积为0.95,在最佳切点为6 388AB/c时,诊断AA的敏感性为90.90%(95%CI 0.83~0.96),特异性为96.10%(95%CI 0.86~0.99)。结论检测外周血m NAP值对AA的鉴别诊断可能具有重要的辅助价值。