地高辛标记DNA探针快速筛选肿瘤细胞株基因表达差异

目的建立寡核苷酸探针正向斑点杂交技术,快速筛选不同细胞株同一基因HIF-1a表达差异,探讨斑点杂交筛选基因表达的可行性。方法将多种培养肿瘤细胞株提取总RNA后,点样于尼龙膜上,与地高辛标记的HIF-1a基因探针杂交,结果与半定量RT-PCR结果比较。结果斑点杂交实验结果与RT-PCR结果一致,无统计学差异(P>0.05)。结论用随机引物地高辛标记DNA探针可以快速筛查不同细胞株同一基因表达差异,可以作为研究肿瘤基因表达差异的工具。     

360例手足口病毒核酸检测结果分析

目的了解四川省内江地区手足口病毒流行情况,为该病的预防提供依据。方法采用实时荧光探针聚合酶链反应(RT-PCR)对360例咽拭子标本进行肠道病毒通用型(EV-U)、新型肠道埃可病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)检测。结果检出EV-U阳性病例297例,阳性率82.5%,EV71阳性病例218例,阳性率60.5%,Cox A16阳性病例70例,阳性率19.4%。结论 2010年6月20日至2011年12月30日期间该地区流行的手足口病病原体以EV71为主。     

2种标本处理方法对聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸的影响

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)ＤＮＡ的定量测定在乙型肝炎病人的临床治疗监测中有重要参考价值 ,其前提是必须具有很好的重复性。目前国内用于ＨＢＶ -ＤＮＡ定量测定的方法基本上是荧光定量聚合酶反应 (ＰＣＲ ,ＴａｑＭａｎ)技术 ,这种实时测定技术方便简单 ,且不易引起污染。影响ＰＣＲ测定重复性和准确性的因素 ,除了ＰＣＲ扩增本身以外 ,还有一个常被忽略也非常关键的因素 ,即标本处理。目前 ,国内绝大部分用于ＨＢＶ -ＤＮＡ测定的ＰＣＲ试剂盒 ,常采用直接对血清煮沸裂解以释放病毒核酸的方法处理标本 ,这种方法虽然较经典的核酸提取方法简…     

反向斑点杂交-基因芯片检测人类乳头瘤病毒及分型

目的 检测人类乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)及其分型,了解其在女性宫颈中的感染情况与宫颈癌防治方面的意义.方法 采用反向斑点杂交-基因芯片检测220例不同年龄患者宫颈中HPV感染情况与分型情况,对比分析低危型与高危型HPV亚型感染率以及其与年龄的关系.结果 220例标本中HPV感染阳性...     

动态观察血浆D-二聚体水平对人感染猪链球菌Ⅱ型病的临床价值

猪链球菌病是一种人猪共患的急性传染病,猪链球菌病败血症型发病迅速,易引起弥漫性血管内凝血(DIC),若不即时治疗,患者很快死亡。检测血浆D-二聚体是诊断DIC最敏感有效的指标。本文对住院治疗的31例猪链球菌病患者血浆D-二聚体进行了监测,现报告如下:材料与方法(1)血浆D-二聚体     

乙型肝炎e抗原在母婴垂直传播中的作用

目的 探讨乙型肝炎e抗原(HBeAg)在母婴垂直传播中的作用.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测50例新生儿脐血的HBV DNA载量,采用时间分辨技术免疫荧光分析法(IFMA)定量检测50例乙型肝炎产妇血清HBeAg和50例新生儿脐血HBeAg含量.结果 乙型肝炎产妇血清HBeAg的含量可直接影响新生...     

多种PCR-微孔板核酸杂交法同时检测三种病原体DNA的临床应用

目的：应用一种同时检测沙眼衣原体、解脲脲原体和淋病奈瑟菌三种病原体DNA的方法对临床标本进行检测方法：采用多重PCR-核酸探针杂交技术，对泌尿生殖系统传播疾病（STD）有症状者分泌物，用同一份处理标本与常规PCR法比较。结果：检测186分标本，沙眼衣原体、解脲脲原体和淋病奈瑟菌检出率分别为24.1％、50.0％和29.0％，并有25.2％的双重感染和6.6％的三重复合感染。结论：本法快捷、特异性好，同时确诊多重感染。     

采用不同方法提取血清及乳汁中HBV-DNA扩增结果分析

目的：对抽提法，热处理，碱变性法提取乙肝标志物阳性初产妇血清及乳汁中HBV-DNA方法进行评价。方法：三种方法提取50例乙肝标志物阳性初产妇血清及乳汁中HBV-DNA，用乙型肝炎病毒adw,adr,ayw共有的C基因作为靶序列，进行PCR扩增检测，结果：血清和乳汁中HBV-DNA检出率；抽提法分别为80%，60%，热处理法82%，32%，碱变性法78%，20%，结论：乳汁中HBV-DNA提取，抽提法最好，血清标本HBV-DNA提取。三种方法无明显差异。     

获得性免疫缺陷综合征患者凝血功能检测的临床研究

目的探讨获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者凝血功能情况。方法选取2010年3月至2013年3月收治的124例AIDS患者作为观察组,选取同期健康体检者120例为对照组,均在入院时抽取静脉血,观察凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、血小板(PLT)、D二聚体(D-D)等项目。观察组86例未进行高效抗反转录病毒治疗,38例进行高效抗反转录病毒治疗,治疗1个疗程后比较上述凝血指标。根据患者是否栓塞分为栓塞组与未发生栓塞组,并比较栓塞组与未发生栓塞组治疗前与对照组凝血指标的差异。结果观察组治疗前的PT、APTT、TT、FIB、PLT、D-D水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组治疗1个疗程后,高效抗反转录病毒治疗组的PT、APTT、TT、FIB、PLT、D-D明显高于未进行高效抗反转录病毒治疗组,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,栓塞组和未发生栓塞组治疗前PT、APTT、TT、FIB、PLT、D-D水平均明显升高,差异有统计学意义(P0.05),而栓塞组PT、APTT、TT、FIB、PLT、D-D水平明显高于未发生栓塞组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 AIDS患者凝血功能会出现异常,且高效抗反转录病毒治疗AIDS患者,其血液会处于高凝状态。     

手足口病患儿病毒型别及与肌酸激酶同工酶的关系

手足口病是由多种肠道病毒感染引起的临床症候群,引发手足口病的肠道病毒有20多种（型）,其中以柯萨奇病毒A16型（Cox A16）和肠道病毒71型（EV 71）最常见。多数患儿临床表现较轻,少数重症患儿出现中枢神经系统、呼吸系统损害,引起心肌炎、肺水肿等症状。各地区手足口病病毒型别差异较大,而且同一地区不同季节差异也很大,