肝复康对实验性大鼠肝纤维化肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响

目的研究肝复康对实验性大鼠肝纤维化的肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及其比值的影响.方法采用四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型,于造模60 d后给予肝复康治疗3个月,以秋水仙碱及肝脾康为对照药.检测肝组织羟脯氨酸含量,苦味酸天狼星红染色法偏振光显微镜显示肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原,并结合图像分析计算Ⅰ、Ⅲ型胶原面积及面积比.结果肝复康治疗后肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量较模型对照组明显减少,Ⅰ型胶原面积明显降低(P《0.01),Ⅲ型胶原面积明显降低(P《0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的比值明显降低(P《0.01).结论肝复康可明显降低肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,降低Ⅰ、Ⅲ型胶原含量比,使细胞外基质的成分趋于正常.     

肝复康对实验性大鼠肝纤维化肝组织Ⅰ、Ⅱ型胶原含量的影响

目的 :研究肝复康对实验性大鼠肝纤维化的肝组织 、 型胶原含量及其比值的影响。方法 :采用四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型 ,于造模 6 0 d后给予肝复康治疗 3个月 ,以秋水仙碱及肝脾康为对照药。检测肝组织羟脯氨酸含量 ,苦味酸天狼星红染色法偏振光显微镜显示肝组织 、 型胶原 ,并结合图像分析计算 、 型胶原面积及面积比。结果 :肝复康治疗后肝组织 、 型胶原的含量较模型对照组明显减少 , 型胶原面积明显降低(P<0 .0 1) , 型胶原面积明显降低 (P<0 .0 1) , 、 型胶原含量的比值明显降低 (P<0 .0 1)。结论 :肝复康可明显降低肝组织 、 型胶原表达 ,降低 、 型胶原含量比 ,使细胞外基质的成分趋于正常。     

十全大补汤对荷膀胱癌小鼠大剂量化疗的减毒增效作用

Objective To investigate the toxicity attenuation and efficacy potentiation effects of Shiquan Dabu Tang (SDT) on high dose chemotherapy in T739 mice with bladder carcinoma. Methods Mouse bladder carcinoma tissue was inoculated subcutaneously into T739 mice to establish tumor-beating mice model. The tumor-bearing mice were randomly divided into a CTX group (100, 200, 400 mg/Kg respectively), a SDT group (high or low dose respectively), a high-dose SDT combined with 200 mg/Kg CTX group and a control group. The body weight, diameter of tumor nodules and complete blood count were observed subsequently. Results Different doses of SDT could effectively inhibit tumor growth in mice. SDT + CTX treatment significantly prolonged the survival time of mice by 49.4±23.3 days (P<0.01, 0.05, 0.01), compared with high dose SDT treatment (17.4±5.77) days, 200 mg/kg CTX treatment (23±14.02) days and control group (11.75±2.06) days respectively. The peripheral platelet count increased more significantly in mice treated with SDT within a week as compared to mice without SDT treatment (P<0.05). The peripheral RBC count and liB concentration increased more significantly in mice treated with SDT for 2 weeks as compared to mice without SDT treatment (P<0.05). Conclusions SDT could enhance the anti-tumor effects of high dose CTX on tumor-bearing mice and reduce toxicity in its peripheral red blood cells. The results showed that SDT combined with high dose of CTX chemotherapy had toxicity attenuation and efficacy potentiation effects in tumor-beating T739 mice.     

siRNA表达框架对TNF-α和IL-1的特异性抑制

[目的]利用siRNA表达框架研究RNA干扰技术对小鼠腹腔活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL—1的抑制作用及其干扰序列的特异性。[方法]原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,构建针对小鼠TNF—α和IL-1的siRNA表达框架,转染细胞,用ELISA方法检测TNF-α和IL-1分泌情况。[结果]TNF-α干扰组TNF-α分泌量（21．87±1．20）pg／mL较IL-1干扰组（28．02±1．03）pg／mL及对照组（27．64±1．92）pg／mL均明显降低,差异有显著性意义（P〈0．05）。IL-1干扰组IL-1分泌量（40．37±4．02）pg／mL较TNF—α干扰组（57．86±3．91）pg／mL及对照组（59．55±3．57）pg／mL均明显降低,差异有显著性意义（P〈0．05）。[结论]构建的针对TNF-α和IL-1的siRNA表达框架能够明显抑制巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1,且干扰作用具有序列特异性。     

大剂量顺铂所致大鼠急性肾损害过程中血浆内皮素-1与肾功能变化的关系

[目的]研究大剂量顺铂（cisplatin,DDP）所致大鼠急性肾功能衰竭过程中血浆内皮素（ET-1）与肾功能变化的关系。[方法]SD大鼠24只,依体重随机分为DDP用药后3、6、48h组和NS对照组,每组6只。10mg／kg DDP单次腹腔内注射,等量生理盐水对照。随后观察并记录用药后大鼠的体重、血浆尿素氮和肌酐浓度、血浆ET-1含量、肾系数等变化。[结果]大剂量DDP用药后6h大鼠体重明显降低;用药后48h大鼠血浆尿素氮（BUN）和肌酐（Cre）明显高于对照组（P〈0．05）,出现肾功能衰竭;用药后72h66％的大鼠死亡。大剂量DDP用药后6h,大鼠肾系数为11．3±1．2,与对照组9．0±0．8比较差异有显著性意义（P〈0．05）。大剂量DDP用药后3h大鼠血浆ET-1升至（213．68±28．3）ng／mL,与对照组（157．45±27．7）ng／mL比较差异具有显著性意义（P〈0．01）,DDP用药72h后存活大鼠血浆ET-1亦明显高于对照组（P〈0．05）。[结论]大剂量DDP所致的急性肾功能衰竭与血浆ET-1浓度的变化有关,但大鼠肾功能的变化与血浆ET-1的变化不一致,提示ET-1可能在DDP所致肾毒性损伤早期的发病机制中发挥重要作用。     

肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及细胞基质的影响

背景：既往的动物实验已多次证实了肝复康对肝纤维化组织具有预防及治疗作用。目的：观察中药肝复康不同浓度含药血清对肝星状细胞T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1基因表达的影响，以及探讨其抗纤维化的作用及分子机制。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005-07／2006—07在大连医科大学病理生理学教研室完成。材料：清洁级SD大鼠25只，体质量300～350g，用于制备含药血清；鼠肝星状细胞T6细胞株由上海中医药大学肝病研究所徐列明教授惠赠；中药肝复康由柴胡、当归（补血合血）、黄芪（益气）、赤芍、白芍（活血化瘀）、丹参（活血化瘀）等组成。方法：按肝复康高、中、低剂量（8．32，4．16，2．08mL／只）灌胃制备药物血清。实验分为5组，空白对照组：加含体积分数0．1正常对照血清的DMEM；模型对照组：加含体积分数0．1正常对照血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；肝复康低、中、高剂量组：分别加含体积分数0．1低、中、高剂量药物血清＋60ug／L血小板衍生生长因子的DMEM；各组均培养24h。主要观察指标：反转录-聚合酶链反应检测不同浓度肝复康药物血清干预后Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白和金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的表达。结果：空白对照组肝星状细胞T6细胞各指标表达呈相对低水平，而模型对照组表达明显升高（P〈0．01）；肝复康各剂量组则均具有能明显抑制这种升高的作用（P〈0．01），其中以中剂量组干预效果最为明显。结论：中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用，其作用机制可能是通过抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、a-平滑肌肌动蛋白及金属蛋白酶组织抑制因子1mRNA的转录，从而减少细胞外基质的形成，以达到抗纤维化的作用。     

肺癌胰岛素样生长因子-2基因印迹的研究

目的探讨胰岛素样生长因子-2(IGF2)基因印迹(genomicimprinting)与肺癌发生发展过程的关系。方法于2003年1月至2004年1月,对大连医科大学附属第一医院胸外科手术切除的标本,根据IGF2基因第9外显子具有ApaI位点多肽性,利用聚合酶链反应(PCR)技术结合限制性片段长度多态性(RFLP)技术,诊断的32例肺癌患者及其对应的癌周正常肺组织进行了IGF2基因印迹的研究。结果12例患者为杂合子信息个体(37·5%),其中10例为IGF2双等位基因表达,即发生了基因印迹缺失(LOI,83·3%),而且这10例病人中有4例的癌周正常肺组织表现为IGF2弱的双等位基因表达。结论IGF2基因的印迹缺失参与了肺癌的发生发展过程。     

老年大肠癌患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ的变化及临床意义

目的研究血清胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)在老年人大肠癌发展过程中的变化及其临床意义。方法应用放射免疫及电化学发光分析法检测48例大肠癌、32例大肠腺瘤、20例健康者血清IGF-Ⅱ、血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)的含量。结果老年大肠癌、大肠腺瘤组血清IGF-Ⅱ水平分别为(1．05±0．45)μg／L和(0．79±0．24)μg／L,明显高于健康对照组(0．50±0．15)μg／L(P<0．01),大肠癌较大肠腺瘤增高更显著(P<0．05)。大肠癌患者中,Dukes分期A、B、C 3期IGF-Ⅱ水平分别为(0．87±0．26)μg／L、(0．95±0．35)μg／L和(1．21±0．45)μg／L,较对照组显著增高(P<0．01),D期为(0．51±0．25)μg／L,增高不明显(P>0.05),并较前3期显著下降(P< 0．01);大肠癌不同肿块大小、解剖部位及分化程度间差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测IGF-Ⅱ、CEA、CA19-9较单项检测阳性率显著提高(P<0．05)．结论IGF-Ⅱ与老年人大肠癌的发生、发展有密切关系,与CEA、CA19-9联合检测,可显著提高大肠癌的诊断阳性率。     

肝复康对实验性肝纤维化转化生长因子β及层粘连蛋白表达的影响

研究复方中药肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝组织的转化生长因子 β(TGF—β1)及层粘连蛋白 (LN)表达的影响 ,探讨其治疗机制。采用 10 %的四氯化碳皮下注射制备肝纤维化模型 ,于造模 6 0天后给予肝复康治疗 6 0天 ,以秋水仙碱及肝脾康为对照药。通过光镜及电镜观察肝组织病理变化 ,检测肝组织羟脯氨酸含量 ,免疫组化法检测肝组织TGF - β1及LN表达。经肝复康治疗后 ,组织学显示肝纤维化程度明显改善 ,肝组织羟脯氨酸明显降低 ,肝组织TGF - β1阳性染色细胞数及LN阳性染色面积明显减少 (P <0 0 1)。肝复康对肝纤维化有明确的治疗作用。其部分机制为减少细胞因子TGF - β1的表达 ,减少LN的表达 ,减轻肝窦毛细血管化     

肝复康药物血清对肝星状细胞核因子-κB及I、Ⅲ型胶原表达的影响

目的:通过观察中药肝复康中剂量浓度含药血清对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞株中核因子-κB(NF-κB)、Ⅰ型胶原(TypeⅠCollagen,ColⅠ)及Ⅲ型胶原(TypeⅢCollagen,ColⅢ)基因表达的影响,探讨其抗纤维化的作用及分子机制。方法:常规方法制备肝复康中剂量浓度含药血清,并用肝复康含药血清干预,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-Blot方法观察分析NF-κB、ColⅠ和ColⅢ表达的变化并探讨其相关性。结果:经乙醛刺激后的HSC-T6细胞株NF-κB、ColⅠ和ColⅢ表达均上调,肝复康中剂量浓度含药血清处理后可明显下调上述基因的表达。结论:中药肝复康抗纤维化的机制可能与其抑制NF-κB及ColⅠ、ColⅢ的表达有关。