FoxC2与肿瘤

Fox(叉头框)是一个拥有相似的DNA结合域的蛋白家族,对DNA的转录起着至关重要的作用.目前研究发现这个蛋白家族在肿瘤的发生和发展的许多方面起着决定性的作用.而FOX家族成员FoxC2在肿瘤中的作用近年来也受到广泛的关注,本文对FoxC2在肿瘤血管生成、转移以及预后评估中的作用的研究进展进行综述.     

Sirt1在缺氧条件下对心肌细胞线粒体融合与分裂中的作用

目的 探讨缺氧条件下线粒体动态学变化及Sirt1在其中的作用.方法 ①收集2014年于新桥医院心血管外科行手术治疗的先心病患儿29例,其中非紫绀型先心病14例,紫绀型先心病15例,取术中所切除的右室流出道心肌组织为心肌标本,Western blot检测促线粒体分裂蛋白Drp1与Fis1表达情况.②将H9c2心肌细胞置入缺氧培养箱(94％N2,5％ CO2,1％ O2)中进行培养,检测缺氧0、2、4、8、12 h后促线粒体分裂蛋白Drp1与Fis1的表达水平.③将线粒体靶向质粒分别同空载质粒、Sirt1过表达质粒和Sirt1干扰质粒共转染H9c2细胞,常氧或缺氧培养箱中培养12 h后,激光共聚焦显微镜下观察线粒体融合、分裂情况;④运用腺病毒Ad-Sirt1和慢病毒Lv-Sh-Sirt1分别在H9c2细胞中过表达或干扰Sirt1后,将细胞置于缺氧培养箱中培养12 h,检测Drp1与Fis1表达水平;⑤分别转染空载质粒、Sirt1过表达质粒和Sirt1干扰质粒至H9c2细胞后,缺氧培养12 h,LDH试剂盒检测细胞毒性.结果 ①同非紫绀组相比,紫绀组心肌中Drp1与Fis1表达显著增高,Drp1相对灰度值:[(0.47±0.11)vs(0.76±0.12)、Fis1相对灰度值(0.53 ±0.02)vs (0.83 ±0.03),P＜0.05];②细胞水平研究结果显示Drp1与Fis1的蛋白表达随缺氧的时间的延长呈递增趋势;③激光共聚焦结果表明,Sirt1过表达后能够一定程度地缓解缺氧诱导的线粒体分裂(P＜0.05),而当Sirt1受到干扰后,缺氧所诱导的线粒体分裂水平明显提高(P＜0.05);④在缺氧条件下,过表达Sirt1能够抑制Drp1与Fis1蛋白表达水平(P＜0.05),而Sirt1被抑制后,Drp1与Fis1蛋白表达水平增加(对照组,过表达组,低表达组Drp1相对灰度值依次为[(0.47 ±0.02)vs(0.36±0.02) vs (0.78 ±0.04);Fis1相对灰度值依次为(0.64±0.02) vs (0.42±0.02) vs (0.80±0.04),P＜0.05];⑤Sirt1过表达能够降低缺氧刺激后H9c2心肌细胞的死亡率.结论 Sirt1可能通过调控促线粒体分裂蛋白Drp1与Fis1表达水平促进心肌细胞在缺氧条件下的适应.     

气管腺样囊性癌二例

病例1女,19岁。5个月前家人发现患者于入睡后出现呼吸困难,可闻及鼾声,每夜出现3～5次。在当地医院行纤维支气管镜检查示:声门下2～3 cm、气管上段后壁可见一新生物,大部分阻塞管腔,管腔狭窄约为正常的20%,未能通过支气管镜,新生物表面有溃疡、坏死,触之易出血。     

心室压力超负荷早期心肌纤维化的动态病理学变化

目的 通过主动脉弓缩窄建立小鼠心室压力超负荷模型,探讨在心室压力超负荷早期心肌纤维化的动态病理学变化.方法 选用10周龄、体质量23 ～ 25 g的雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为4组(n=10):(①假手术组(SHAM组)、②缩窄3d组(TAC3D组)、③缩窄7d组(TAC7D组)、④缩窄14 d组(TAC14D组).各缩窄组小鼠行主动脉弓缩窄术,假手术组除不缩窄主动脉弓部,其他操作同各缩窄组.心脏导管检测小鼠心脏功能变化情况;采用心脏体质量比、心肌细胞直径大小等指标评价小鼠心肌结构代偿性变化情况;Masson染色观察小鼠心肌纤维化变化情况.结果 ①与假手术组相比,各缩窄组射血分数无显著改变(P＞0.05);②与假手术组相比,各缩窄组心体比显著增加,心肌细胞直径显著增大[SHAM组、TAC3D组、TAC7D组、TAC14D组心肌细胞直径依次为(13.56 ±0.24)、(18.02±0.52)、(18.76±0.96)、(21.20±1.85) μm,P＜0.05].③与假手术组相比,各缩窄组心肌管周纤维化程度显著增加,且随缩窄时间延长而加重[SHAM组、TAC3D组、TAC7D组、TAC14D组血管周围纤维化面积与血管面积比依次为(0.18±0.02)、(0.37±0.02)、(1.22±0.08)、(2.05±0.12),P＜0.05].结论 在心室压力超负荷早期,心肌纤维化主要出现于血管周围,且纤维化程度随缩窄时间延长而逐渐加重.     

MiR-17-5p调控STAT3信号通路在心肌慢性缺氧适应中意义的研究

目的 探讨心肌慢性缺氧环境下,miR-17-5p的表达变化以及miR-17-5p对STAT3信号通路的调控对于缺氧心肌细胞的影响.方法 ①选取新桥医院心外科2014年8月至2015年4月期间先心病患儿20例,其中紫绀型(年龄61.5±46.5月,术后诊断为法洛氏四联症)与非紫绀型(年龄43.2 ±32.1月,术后诊断为室缺伴右心室流出道狭窄)各10例.术中取右室流出道心肌组织作为标本,采用RT-PCR检测两组先心病患儿心肌组织miR-17-5p的表达情况.②建立大鼠源H9c2心肌细胞慢性缺氧适应模型,分为缺氧0、12、24、48、72 h组(n=5),RT-PCR分别检测各组miR-17-5p的表达.③脂质体转染antagomir miR-17-5p和agomir miR-17-5p至H9c2心肌细胞,建立过表达miR-17-5p和沉默miR-17-5p的H9c2心肌细胞系,慢性缺氧培养48 h,CCK8实验检测细胞增殖情况,TUNNEL实验检测细胞凋亡情况,Western blot检测STAT3,p-Tyr-705-STAT3及其下游调控蛋白c-myc蛋白表达.结果 ①与非紫绀组(0.482 ±0.163)相比,紫绀组(1.450±0.705)患儿miR-17-5p表达明显升高(P＜0.01).②慢性缺氧细胞模型研究结果显示慢性缺氧时H9c2细胞miR-17-5p表达逐渐增高(P＜0.01).③缺氧环境下miR-17-5p过表达明显抑制p-Tyr-705-STAT3、STAT3、c-myc表达,引起心肌心肌细胞增殖受抑制,凋亡增加(P＜0.01);而抑制miR-17-5p对p-Tyr-705-STAT3、STAT3、c-myc表达改变不明显,且对于心肌细胞的增殖和凋亡改变也不明显(P＞0.05).结论 在心肌慢性缺氧过程中,miR-17-5p可能参与调控STAT3-c-myc信号通路,对于心肌细胞的存活和功能调节有重要意义.     

慢性缺氧诱导小鼠心肌细胞自噬及其机制

目的 观察慢性缺氧对小鼠心肌细胞自噬水平的影响,并初步探讨AMPKα2敲除对该过程的作用.方法 采用野生型与AMPKα2-/-雄性C57小鼠均分为野生型常氧组、野生型缺氧组、敲除型常氧组和敲除型缺氧组(n=10).常氧组于空气环境中饲养,缺氧组于10％ O2的低氧舱内饲养.4周后野生型小鼠取静脉血标本,测红细胞及血红蛋白水平;取心脏标本用Western blot检测AMPKα2及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与p62的变化,用免疫荧光染色法检测心肌冰冻切片LC3变化.敲除型小鼠取心脏标本用Western blot检测心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值变化.结果 ①野生型小鼠中,与常氧组比较,缺氧组红细胞与血红蛋白水平显著增加[红细胞:(9.33 ±0.15)×1012/L vs(12.78±0.66)×1012/L,P ＜0.05;血红蛋白:(135 ±3)g/L vs (192 ±4)g/L,P＜0.05];②野生型小鼠中,与常氧组相比,缺氧组心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加[(0.49 ±0.29) vs(1.70 ±0.24),P＜0.05];p62表达明显降低[(1.32±0.57) vs (0.71 ±0.19),P＜0.05];免疫荧光结果显示,缺氧组心肌组织LC3荧光较常氧组增多;③在常氧条件下,与野生型小鼠比较,AMPKα2-/-小鼠心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低,但差异无统计学意义[(0.78 ±0.08) vs (0.73 ±0.34),P＞0.05];在缺氧条件下,与野生型小鼠比较,AMPKα2-/-小鼠心肌组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低[(2.08±0.72) vs (1.01 ±0.21),P＜0.05];④野生型小鼠中,与常氧组比较,缺氧组AMPKα2蛋白表达水平并无显著增加[(1.14±0.13) vs(1.25±0.19),P＞0.05].结论 慢性缺氧可能通过AMPKα2依赖的途径增强心肌细胞自噬,该自噬可能是心肌细胞对慢性缺氧的适应机制.     

脐尿管未闭致下腹部手术切口感染不愈的诊治一例

患者女,40岁,患者因"腹壁窦道两年余"于2011-07-03入院。两年前曾行子宫切除术(横切口),术后切口长期愈合不良,形成腹壁窦道,于多家医院行窦道引流术或窦道切除术,仍无法完全愈合。既往体健。入院查体:下腹部可见多个手术瘢痕,正中瘢痕可见约2cm×2cm窦道外口,少许浑浊渗液。辅助检查:     

压力诱导的心力衰竭演变过程中的心脏结构、血流动力学和肺部大体观的动态改变

目的通过小鼠主动脉弓缩窄诱导心力衰竭,观察心衰进展过程的心脏结构和血流动力学动态变化,为进一步相关机制研究提供模型平台。方法 6~8周雄性C57小鼠50只,随机分为正常对照组(10只)和主动脉弓缩窄术组(40只)。经胸部正中切口暴露主动脉弓,并于右侧头臂干动脉和左侧颈总动脉之间缩窄主动脉弓建立心肌肥厚致心力衰竭模型。于术后当日经胸部多普勒评价缩窄效果;将缩窄效果好且存活的小鼠38只分为术后第一周(n=9)、第二周(n=9)、第四周(n=10)、第八周(n=10)分别复查心脏彩超测量左心室后壁舒张末厚度(LVPWd)、左心室后壁收缩末厚度(LVPWs)、射血分数(EF)和缩短分数(FS),进行血流动力学检查、测量左室收缩末压(LVESP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室内压力上升最大速率(dp/dt max),并取材行病理学检测心脏、肺脏重量和心肌纤维病理变化程度。结果主动脉弓缩窄手术成功率为95%;与正常对照组比较,缩窄1周后,LVEDP和LVESP明显升高(P0.05),纤维化程度明显增加(P0.05)。缩窄2周后,缩窄组小鼠EF、FS显著降低(P0.05),LVPWd明显增加(P0.05),dp/dt max明显增加(P0.05),心脏体重比和肺脏体重比明显增加(P0.05),肺水肿明显加重。而在缩窄8周时LVPWd、LVPWs、LVEDP和dp/dt max均较前明显降低(P0.05)。缩窄8周时,在光镜下心肌细胞肥大、排列紊乱,小血管壁增厚,间质纤维增生明显。结论通过多时间点观察小鼠主动脉弓缩窄模型的心脏结构和血流动力学动态改变,有效模拟了心力衰竭发生和进展的动态变化过程,为进一步相关机制研究提供了模型平台。     

循环环状RNA_hsa_circ_0029642与成人先天性心脏病肺动脉高压的关系

目的 检测血清中环状RNA hsa_circ_0029642的含量,明确其与肺动脉高压是否有密切关系,探讨循环环状RNA hsa_circ_0029642作为肺动脉高压血清标志物的可能性.方法 收集2016年3-7月入院的先天性心脏病伴肺动脉高压患者血清20例(A组),先天性心脏病不伴肺动脉高压患者血清20例(B组),风湿性心脏病伴肺动脉高压患者血清20例(C组),各组从血清中提取总RNA并进行质量检测,进行反转录反应,获得相应的cDNA,以GAPDH作为内参进行标定,进行实时荧光定量PCR反应,根据各样本的定量PCR结果计算RQ值,绘制ROC曲线.结果 3组样本的总RNA均有较好的质量,A组与C组的RQ值差异无统计学意义(P＞0.05),A组与B组的RQ值差异有统计学意义(P＜0.05),B组与C组的RQ值差异有统计学意义(P＜0.01).即A组和C组的RQ值显著低于B组,而A组与C组的RQ值差异无统计学意义.ROC曲线(曲线下面积AUC=0.752,P＜0.01,95％ CI:0.624 ～0.884).结论 先天性心脏病肺动脉高压患者血清中环状RNA hsa_circ_0029642明显下调,循环环状RNA hsa_circ_0029642可作为肺动脉高压新的血清标志物.