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背景:胚胎干细胞具有多向分化潜能,已被用于急性肝损伤的治疗,但其在体内治疗过程中的增殖迁移情况尚不清楚。目的:利用分子影像技术监测移植胚胎干细胞在急性肝损伤修复过程中的行为。方法:利用慢病毒载体,将萤火虫荧光素酶、红色荧光蛋白以及单纯疱疹病毒胸苷激酶三融合基因转入小鼠胚胎干细胞(D3)中,筛选得到稳定整合3个报告基因的D3胚胎干细胞系。将上述胚胎干细胞或分化了6d的拟胚体细胞通过脾脏注射到急性肝损伤SVl29模型小鼠体内,利用生物发光成像技术监测移植的细胞。结果与结论:RT-PCR结果显示,三融合基因的转入并未影响胚胎干细胞Oct-4和Nanog的表达。利用小动物活体成像系统可以观察到移植细胞从脾脏迁移到肝脏的过程。移植的胚胎干细胞和拟胚体细胞都在肝脏处形成畸胎瘤,由于单纯疱疹病毒胸苷激酶同时也是自杀基因,可以与更昔洛韦作用诱导转基因细胞死亡,通过注射更昔洛韦来抑制畸胎瘤的生长并逐步将其杀死。组织学分析显示,畸胎瘤里包含来自于3个胚层的组织。提示三融合基因的转入并未影响胚胎干细胞的多向分化潜能,且胚胎干细胞用于细胞治疗有潜在的成瘤风险,影响了对肝损伤的修复,治疗策略有待进一步改进,并需要实时监控其在体内的行为。 相似文献
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背景:胚胎干细胞具有多向分化潜能,已被用于急性肝损伤的治疗,但其在体内治疗过程中的增殖迁移情况尚不清楚。
目的:利用分子影像技术监测移植胚胎干细胞在急性肝损伤修复过程中的行为。
方法:利用慢病毒载体,将萤火虫荧光素酶、红色荧光蛋白以及单纯疱疹病毒胸苷激酶三融合基因转入小鼠胚胎干细胞(D3)中,筛选得到稳定整合3个报告基因的D3胚胎干细胞系。将上述胚胎干细胞或分化了6 d的拟胚体细胞通过脾脏注射到急性肝损伤SV129模型小鼠体内,利用生物发光成像技术监测移植的细胞。
结果与结论:RT-PCR结果显示,三融合基因的转入并未影响胚胎干细胞Oct-4和Nanog的表达。利用小动物活体成像系统可以观察到移植细胞从脾脏迁移到肝脏的过程。移植的胚胎干细胞和拟胚体细胞都在肝脏处形成畸胎瘤,由于单纯疱疹病毒胸苷激酶同时也是自杀基因,可以与更昔洛韦作用诱导转基因细胞死亡,通过注射更昔洛韦来抑制畸胎瘤的生长并逐步将其杀死。组织学分析显示,畸胎瘤里包含来自于3个胚层的组织。提示三融合基因的转入并未影响胚胎干细胞的多向分化潜能,且胚胎干细胞用于细胞治疗有潜在的成瘤风险,影响了对肝损伤的修复,治疗策略有待进一步改进,并需要实时监控其在体内的行为。 相似文献
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五味子醇乙(schisandrol B, SolB)是传统中药五味子的活性单体之一。前期研究发现SolB在抵抗药源性肝损伤和促进肝再生的过程中,具有促进良性肝增大的作用,但肝增大过程中内源物质的变化尚不清楚。本研究通过脂质组学研究SolB所致肝增大过程的脂质组变化。本动物实验经中山大学动物伦理委员会批准。雄性C57BL/6小鼠腹腔注射SolB (100 mg·kg-1·d-1) 5 d后采集血清和肝脏样本进行生化和病理检测,采用基于Q Exactive UHPLCMS/MS系统的脂质组学方法对肝脏样本进行脂质组学检测与分析。结果发现SolB显著促进正常小鼠的良性肝增大(与肝损伤、炎症无关),小鼠肝脏出现脂质累积。脂质组学分析发现35种有显著差异的脂质,其中甘油三酯(triglycerides, TG)变化最为显著,其含量显著升高,提示SolB所致肝增大过程能量合成增加。本研究阐明了SolB所致肝增大的脂质组变化,初步解释了SolB促进肝增大过程对脂质的影响。 相似文献
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目的利用水凝胶作为骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植的载体,治疗2型糖尿病大鼠急性心肌梗死。方法 SD大鼠20只,3周龄,体质量50 g左右,用于制造2型糖尿病模型。将造模成功的SD大鼠随机分为水凝胶联合细胞移植组、细胞移植组、生理盐水组、假手术组,每组5只。将水凝胶联合细胞移植组、细胞移植组、生理盐水组2型糖尿病大鼠冠状动脉左前降支结扎,制造急性心肌梗死模型,同时做不结扎的假手术组。前3组分别移植100μL Matrigel和1×106 BM-MSCs的混合物、100μL含有1×106 BM-MSCs的0.9%氯化钠溶液、100μL 0.9%氯化钠溶液。术后28 d,检测大鼠血糖、血脂及血胰岛素水平;对术后28 d的大鼠心脏样本进行组织学染色评价心室重构情况;v WF(von Willebrand factor)免疫荧光染色观察大鼠心脏梗死区血管新生情况。结果 SD大鼠的BM-MSCs呈典型的长梭形且贴壁生长;经过8周高脂高糖饲料喂养后,血样生物化学指标显示,SD大鼠血液中总胆固醇、低密度脂蛋白、胰岛素等显著升高;后注射链脲霉素,大鼠空腹血糖在7.0 mmol/L以上,说明成功建立糖尿病大鼠模型;BM-MSCs移植糖尿病大鼠体内后,与不治疗组相比,BM-MSCs移植能显著改善心肌梗死后大鼠左心室重构;免疫荧光染色结果显示,BM-MSCs能促进梗死区内的血管新生。联合Matrigel移植能进一步提升BM-MSCs的治疗效果。结论联合Matrigel移植能显著提升BM-MSCs对糖尿病大鼠心肌梗死的治疗效果。 相似文献
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