坛紫菜硫酸多糖对60Co辐射引起的小鼠体内氧化应激的作用研究

应用生物化学的方法探讨在^60Co辐射条件下，坛紫菜硫酸多糖对小鼠体内氧化应激的抑制作用。结果表明，^60Co辐射能显著降低昆明种小鼠体内不同脏器组织匀浆SOD、GSH—Px的活性，引起脂质过氧化。坛紫菜硫酸多糖可提高辐射损伤后小鼠组织匀浆SOD、GSH—Px的活性，增强总抗氧化能力，减少脂质过氧化。     

人脂肪干细胞对大鼠带真皮下血管网皮片移植的影响

目的探讨人脂肪干细胞(ADSCs)对大鼠带真皮下血管网皮片移植成活的影响及其机制。方法体外培养增殖ADSCs,流式细胞术鉴定,应用EdU标记ADSCs。于大鼠背部设计术区,实验组(n=10)局部注射EdU标记ADSCs PBS悬液,对照组(n=10)注射PBS。术后7d处死大鼠,比较两组移植皮片的成活率;取移植皮片组织行苏木精-伊红染色,光镜下观察微血管数目;免疫组织化学染色观察组织中CD31及血管内皮生长因子(VEGF)的表达;EdU标记检测ADSCs在移植皮片内的分布及分化。结果实验组大鼠移植皮片成活率、组织单位面积内微血管数目、VEGF表达均高于对照组,差异有显著性(t=3.870～14.729,P<0.05)。实验组EdU标记ADSCs阳性细胞分化为部分小血管内皮细胞,对照组检测不到EdU阳性ADSCs细胞分布。结论局部移植的ADSCs可以在组织内分化成血管内皮细胞,并促进VEGF等生长因子的分泌,从而促进大鼠带真皮下血管网皮片移植成活。     

基于环介导等温扩增技术的巴戟天检测方法的建立

目的 建立一种可快速检测中药巴戟天的环介导等温扩增(LAMP)检测方法.方法 针对巴戟天二级内部转录空间(ITS2)序列设计LAMP特异引物组,提取DNA后建立基于LAMP技术鉴别巴戟天的目视和实时定量检测方法,同时评估该方法的特异性、灵敏度及其在实践中的应用情况.结果 该检测方法具有良好的特异性,最适反应温度为63℃...     

核转录因子κB信号通路在应力调控成肌细胞分化中的作用

背景:NF-κB信号通路在细胞生长分化、炎症反应、肿瘤生长等过程中发挥重要的调节作用,也参与成肌细胞分化的调控。目的:分析NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化中的作用及其作用机制。方法:成功构建大鼠C2C12成肌细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,以0.5Hz的加载频率和10%的细胞拉伸变形幅度对细胞进行拉伸培养2,6,12,24h。结果与结论:①C2C12成肌细胞在周期性机械拉伸力作用下,NF-κB信号通路被激活。当细胞受到应力刺激6h后,胞核NF-κBp65亚基蛋白表达水平开始增强,24h内NF-κBp65亚基蛋白表达水平达到峰值。加力12,24h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。②IκBα蛋白表达水平在加力6h后表达显著下降,24h内IκBα蛋白表达水平减弱达到最低。加力12,24h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P<0.05)。③周期性张应力促进C2C12成肌细胞分化过程中Myogenin的表达,加入NF-κB信号通路特异性抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(20μmol/L)后再加力,Myogenin的表达明显降低。以上结果提示:①NF-κB信号通路可能参与应力介导的C2C12成肌细胞分化的调控过程。②当细胞受到应力刺激时,胞质IκBα发生磷酸化并降解。③NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化过程中发挥重要作用,但不是这一调控过程的惟一通路。     

三氧化二砷联合5-FU体外抗人胃癌细胞SGC-7901作用及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）与5-氟尿嘧啶（5-FU）联合应用体外抗人胃癌细胞株SGC-7901的作用及其机制。方法：用不同浓度的As2O3（终浓度依次为0．1，0．5，1．0μmol／L）和（或）5-FU（终浓度50mg／L）处理SGC-7901细胞后．采用流式细胞术观察细胞凋亡和细胞周期变化：免疫细胞化学法（PV法）观察凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-FU联合应用可显著提高诱导胃癌细胞凋亡率（q=63．9608，166．1758，51．3343，P〈0．01），与空白组相比，联合用药后S期细胞所占比例下降（q=16．0743，10．8805，12．1482，P〈0．01），G0／G1期细胞比例上升（q=8．7188，9．3309，9．8534，P〈0．01），癌细胞Bcl-2基因表达明显下降（q=10.2801，17．8456，19．0086，P〈0．01）。结论：As2O3与5-FU联合应用具有协同抗胃癌作用，其机制可能与细胞周期阻滞、增强诱导胃癌细胞凋亡以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

微小RNA－16参与上皮性卵巢癌细胞周期调控的实验研究

目的：研究微小RNA－16（miR－16）调控靶基因CCNDl及其蛋白表达产物一细胞周期相关蛋白DI（cyclinDl）在卵巢肿瘤细胞系SKOV3及其耐药株SKOV3／DDP中的表达,并初步探讨其逆转卵巢癌耐药的可能机制。方法：脂质体Lipofectamine2000介导miR－16成体模拟物（mimics）及其阴性对照片段（NC）成功转染人卵巢癌细胞顺铂耐药株SKOV3／DDP;流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化;Western blot法检测转染前后cy—clinDl表达的变化。结果：（1）成功转染miR－16后,SKOV3／DDP细胞系G1期细胞所占比例显著升高（P〈0．01）;（2）SKOV3／DDP细胞的cyclinDl蛋白相对表达量显著高于SK—OV3细胞：转染miR－16后,cyclinDl相对表达量显著下降（P〈0．01）。结论：miR－16很可能通过下调靶基因CCNDl及cyclinDl蛋白的表达,阻止细胞由C,期向S期转换,抑制肿瘤细胞无限增殖与生长。     

硫普罗宁联合奥沙利铂对抗肿瘤作用的影响

目的探讨硫普罗宁（Tio）联合奥沙利铂（L-OHP）在人胃癌裸鼠模型中对抗肿瘤作用的影响。方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为6组,每组10只动物。A组腹腔注射50 g/L葡萄糖注射液;B组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg;C组腹腔注射Tio 30 mg/kg;D组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg＋Tio 30 mg/kg;E组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg＋Tio 45 mg/kg;F组腹腔注射L-OHP 6 mg/kg＋Tio 60 mg/kg,连续用药14 d。测裸鼠体质量、瘤体积,计算抑瘤率;处死动物,查血常规,肝、肾功能,行肝、肾、肿瘤病理组织学检查。结果用药后B、D、E、F组裸鼠体质量均出现了不同程度的下降,与用药前比较差异有显著性（t=5.52~9.74,P〈0.01）。B、D、E、F组表现出了明显的抗肿瘤作用,瘤质量与A组比较差异有显著性（F=130.77,t=8.58~18.94,P〈0.01）;而D、E组之间,E、F组之间的抗肿瘤作用差异无显著性（P〉0.05）。B组血白细胞降低,D、E、F组白细胞较B组出现不同程度的升高,差异有显著性（F=13.07,t=4.32~12.20,P〈0.05）。各组肝、肾功能未见明显损害。结论 Tio可能降低了L-OHP的抗肿瘤作用,但表现出了明显的肝、肾保护作用。     

骨髓基质干细胞片层的制备及其在组织工程骨中应用的初步研究

目的：探讨骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）片层（cell sheet）的制备方法,并观察其在实验犬体内构建组织工程骨时的成骨作用。方法：密度梯度离心法获取实验犬骨髓基质干细胞,经成骨诱导培养后,利用温度感应性培养皿（temperature-responsive culture dish）制备细胞片层后在体外包裹犬同种异体脱钙骨基质（demineralized bone matrix,DBM）,相差显微镜和扫描电镜观察细胞及片层形态;将复合体植入实验犬背阔肌筋膜下,组织学方法观察术后组织工程骨的骨形成情况。结果：细胞片层成功制备,并与支架材料复合良好,术后16周组织学显示形成类似板层骨的致密骨组织。结论：利用温度反应性培养皿可成功制备BMSC细胞片层,细胞片层包裹支架材料后在实验动物体内可形成具有类似板层骨结构的组织工程骨。     

Transwell侵袭实验测定M受体对胆管癌细胞侵袭的影响

目的 探讨Transwell体外侵袭模型适用于胆管癌侵袭性研究的实验条件和方法.观察M受体兴奋剂及拈抗剂对胆管癌侵袭力的影响.方法 将不同浓度(0.5×105/mL、1.0×105/mL、1.5×105/mL、2.0×105/mL)的胆管癌细胞200μL置入Transwell小室侵袭模型,分别培养12 h、24 h、3...