内镜治疗老年总胆管结石30例体会

目的：探讨内窥镜治疗老年总胆管结石的安全性和有效性。方法：对我院普外科收治的30例70岁以上的老年总胆管结石患者进行回顾性分析，所有患者均经B超或螺旋CT明确诊断并接受内镜治疗，治疗方法包括逆行胰胆管造影（endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)，鼻胆管引流（endoscopic nasobiliary drainage,ENBD)，乳头括肌切开（endoscopic shincterotomy,est)和取石术，碎石术，测定患者内镜治疗前后的生化指标变化。结果：30例老年总胆管结石患者行ERCP检查，成功率100％，28例行EST，总胆管结石直径＜1.0cm者成功率100％，结石直径1.0-1.5cm者成功率86％，结石直径≥1.5cm者需进行机械碎石取石，成功率75％；另有2例患者植入塑料支架作长期引流。1例患者发生与内镜有关的并发症，死亡例，30例患者治疗后各项生化指标较治疗前均有明显改善（P＜0．001）。结论：内镜治疗老年总胆管结石成功率增高，避免了手术创新，安全性好，缩短住院时间，是当前治疗老年总胆管结石的首选方法。     

雷公藤属药用植物的研究进展

雷公藤属药物植物具有抗炎、抗免疫、抗肿瘤、抗H IV等多种药理活性。临床上广泛用于治疗类风湿性关节炎、慢性肾炎等自身免疫性疾病。其化学成分复杂,主要包括倍半萜类(包括倍半萜生物碱)、二萜类、三萜类和少量木质素等。综述近年来雷公藤属药用植物化学成分、药理作用等方面的研究成果,指出雷公藤类药物具有广阔的发展前景。     

心肌脂质过氧化反应程度对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤的影响

目的测定链脲佐菌素(STZ)诱导的不同周期精尿病大鼠对心肌缺血／再灌注(I／ R)损伤的影响及其与心肌脂质过氧化反应程度及血浆一氧化氮(NO)变化的关系。方法阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I／R模型。用TTC染色测定大鼠心肌 I／R后梗死面积;用T／BARS法测定脂质过氧化反应程度;用硝酸还原酶法测定NO含量结果 STZ处理后2周,糠尿病组(2WD)心肌梗死面积比对照组(2WC)明显缩小,STZ处理后16周(16WD),梗死面积比对照组(16WC)增加;心脏组织的脂质过氧化物反应产物 2WD组较2WC组低,但是在16WD组中较16WC组显著增加;血浆NO水平2WD组较 2WC组增高,但是16WD组较16WC组显著减少。结论 STZ诱导的大鼠急、慢性期糖尿病对心肌I／R损伤呈现相反的作用。这可能是由于大鼠急、慢性期糖尿病相反的心肌脂质过氧化反应程度及NO改变而引起。     

不同疝修补术治疗腹股沟疝的疗效对比分析

目的　研究腹股沟疝传统疝修补、平片无张力式疝修补与疝环充填式疝修补的手术效果。方法　对642例腹股沟疝行传统疝修补术534例(583侧,传统组),平片无张力式疝修补术57 例(60 侧,平片无张力组),疝环充填式疝修补术51例(54侧,疝环充填组)。比较3 种术式的手术时间、术后并发症和术后复发率等指标。结果　传统组平均手术时间为(34.26±4.56) min,明显少于平片无张力组的(40.35±6.24) min (P<0.05)和疝环充填组的(49.12±8.69) min(P<0.01); 而平片无张力组又明显少于疝环充填组(P<0.01)。传统组、平片无张力组及疝环充填组并发症分别为6 例(1. 12%)、1 例(1. 75%)及0 (P>0. 05) 。传统组术后疝复发率为5. 99%(32/534),明显高于平片无张力组(0)和疝环充填组(0),P<0.05。传统组、平片无张力组及疝环充填组的平均住院时间分别为(7.11±3.06) d、(5.38±2.53) d及(6.19±3.61) d,各组间差异无显著性意义。恢复正常活动时间传统组为(16.98±4.35) d,明显迟于平片无张力组的(7.26±2.46) d和疝环充填组的(8.02±3.35) d (P<0.01)。结论　疝环充填式与平片无张力疝修补较传统疝修补能明显降低术后疝复发率,值得推广使用。     

Xaf1与TNFα协同诱导细胞凋亡机制的初步探索

 [目的]利用Xaf1诱导细胞株,检测Xaf1与一些细胞凋亡激动剂协同诱导肿瘤细胞凋亡的能力,初步探索Xaf1诱导凋亡的机制.[方法]Xaf1与细胞凋亡激动剂协同诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示,免疫荧光显微镜检测法与细胞核浆分离法检测Xaf1诱导细胞中Xaf1与XIAP的亚细胞分布,免疫沉淀法检测Xaf1与XIAP的关联性.[结果]流式细胞术DNA含量检测发现Xaf1与TNFα显著协同诱导细胞凋亡,凋亡峰值为49%,而Xaf1与阿霉素无协同作用,凋亡峰值为27%,免疫荧光显微镜检测及细胞核浆分离法结果显示Xaf1位于细胞核内,而XIAP却位于细胞质.[结论]Xaf1与TNFα显著协同诱导细胞凋亡,其协同机制可能不是解除XIAP对胱冬肽酶活性的抑制.     

T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏Th1/Th2平衡的影响

【目的】 观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠脾脏淋巴细胞Th1/Th2平衡&#65380;T-bet及GATA-3 mRNA表达的影响&#65377; 【方法】 将C57BL/6小鼠32只随机分为4组,每组8只,分别为正常对照组(A组)&#65380;哮喘模型组(B组)&#65380;空质粒干预组(C组) 和T-bet质粒干预组(D组)&#65377;卵白蛋白(OVA) 抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模&#65377;空质粒组和T-bet质粒干预组OVA激发24 h前,分别经鼻滴入50 μg空质粒&#65380;重组T-bet质粒,对照组用生理盐水代替OVA&#65377;最后一次滴鼻激发48 h后处死小鼠,流式细胞仪检测各组实验小鼠的脾脏淋巴细胞的Th1/Th2, RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞的T-bet及GATA-3mRNA表达&#65377; 【结果】 哮喘小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒后:①流式细胞仪检测发现,脾脏Th1百分率较哮喘模型组显著升高[(2.29 ± 1.55)% vs. (1.93 ± 1.14)%,P﹤0.05],Th2百分率显著降低[(0.93 ± 0.64)% vs. (1.63 ± 0.59)%];②RT-PCR检测发现脾脏淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著增加(0.53 ± 0.027 vs. 0.28 ± 0.035,P﹤0.05), GATA-3 mRNA表达水平显著降低(0.24 ± 0.022 vs. 0.58 ± 0.038,P﹤0.05)&#65377;而pcDNA3空质粒干预后与哮喘模型组比较无显著差异&#65377;【结论】 气道内转导pcDNA3-T-bet质粒后,可显著上调哮喘小鼠体内T-betmRNA表达,下调GATA-3 mRNA表达,有效改善哮喘小鼠体内Th1/Th2比例失衡,从而抑制哮喘小鼠的气道炎症,为哮喘的T-bet基因治疗提供依据&#65377;     

心肌eNOS表达和NO的改变对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤的影响

【目的】测定不同周期链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠心肌eNOS表达、NO变化及其对缺血/再灌注（I/R）损伤的影响。【方法】阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I/R模型,用TTC染色,测定大鼠心肌I/R后梗死面积;免疫印迹分析测定心肌eNOS表达;形态测定（Morphometric）法测定硝基酪氨酸（Nitrotyrosine,NT）的水平;用硝酸还原酶法测定NO含量。【结果】在STZ处理后2周,糖尿病组（2WD）心肌梗死面积比相应周期对照组（2WC）明显缩小,STZ处理后16周（16WD）,梗死面积比相应对照组（16WC）增加;内皮一氧化氮合酶（eNOS）在心肌的表达在2WD比2WC组增加34%,然而在16WD比16WC明显减少;超氧亚硝酸根离子（Peroxynitrite,ONOO-）生成的标志性产物硝基酪氨酸（nitrotyrosine,NT）在2WD组中较2WC组低约49%,但在16WD组中较16WC组显著增加;血一氧化氮（Nitric oxide,NO）水平2WD组中较2WC组增高,但是16WD组较16WC组显著减少。【结论】STZ诱导糖尿病早期、晚期对心肌I/R损伤呈现相反的作用。这可能是由于早、晚期糖尿病相反的心肌eNOS表达及NO改变而引起的。     

干扰素α、5-AZA-CdR对白血病细胞HL-60和K562的作用

 [目的]探讨细胞因子干扰素α（INFα）和甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞嘧啶核苷（5-AZA-CdR）对白血病细胞HL-60和K562的作用机制。[方法]1000U/mL INFα和不同剂量的5-AZA-CdR作用于HL-60和K562 48h,通过RT-PCR检测Xaf1和XIAP mRNA的表达,流式细胞技术检测Bcl-2家族成员、线粒体膜电位（Δψm）和细胞凋亡的情况。[结果]INFα和5-AZA-CdR使HL-60和K562 Xaf1 mRNA表达增加,且与5-AZA-CdR呈剂量依赖性,其中5-AZA-CdR（5μmol/L）的作用最明显;XIAP mRNA表达无变化。INFα使HL-60和K562 Bax表达增加,Bcl-2和Bcl-xl表达无改变;5-AZA-CdR降低HL-60 Bcl-2、Bcl-xl、Bax表达,增加K562 Bax表达,不影响K562 Bcl-2和Bcl-xl。INFα和5-AZA-CdR都能使线粒体膜电位降低、细胞凋亡增加。除细胞凋亡外INFα和5-AZA-CdR对HL-60和K562的Xaf1 mRNA、Bcl-2家族成员以及Δψm无协同作用。[结论]INFα和5-AZA-CdR促进HL-60和K562细胞凋亡,其作用机制可能与上调Xaf1 mRNA的表达,下调Bcl-2（Bcl-xl）/Bax和降低线粒体膜电位有关。     

建立doxycycline诱导表达Xaf1的肿瘤细胞株

【目的】为探索XIAP相关因子1（Xaf1）调节肿瘤细胞凋亡的机制，利用基因开关调节系统（Tet-on），拟建立由doxycycline调控表达的Xaf1诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1和pWZL-Hyg质粒用基因转染技术转入稳定表达nTA的Saos-2细胞中。经过hygromycin的抗性筛选，挑出并扩增表达Xaf1的细胞株。在8例实验组中加入doxycycline，和不加doxycycline的8例对照组比较，重复3次实验用免疫印迹法和免疫荧光显微镜检测doxycycline对Xaf1表达的调控。Xaf1诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示。【结果】在30个抗hygromycin的细胞株中，免疫印迹法筛选出5个明显由doxycychne调控诱导表达Xaf1的细胞株，免疫荧光显微镜检测显示doxycycline诱导Xaf1表达于细胞核内。流式细胞检测Xaf1于8h开始诱导Saos细胞凋亡，凋亡率最高约20％，而且不影响细胞周期。【结论】Xaf1-Saos诱导细胞株是研究Xaf1调节肿瘤细胞凋亡机制的良好细胞模型；Xaf1是一种核蛋白，能独立诱导肿瘤细胞凋亡。     

雷公藤属药用植物的研究进展

雷公藤属药物植物具有抗炎、抗免疫、抗肿瘤、抗H IV等多种药理活性。临床上广泛用于治疗类风湿性关节炎、慢性肾炎等自身免疫性疾病。其化学成分复杂,主要包括倍半萜类(包括倍半萜生物碱)、二萜类、三萜类和少量木质素等。综述近年来雷公藤属药用植物化学成分、药理作用等方面的研究成果,指出雷公藤类药物具有广阔的发展前景。