海绵体内注射shIGFBP-3对糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的影响

目的:观察海绵体内注射shIGFBP-3后大鼠阴茎海绵体内压和海绵体平滑肌密度的变化,评价其对大鼠糖尿病性勃起功能障碍的治疗效果.方法:30只SD大鼠随机分为3组,每组10只.造模成功后,各组分别海绵体内注射pGPU6/GFP/Neo shIGFBP-3,pGPU6/GFP/Neo-randomer shRNA和生理盐水.注射3个月后测量大鼠海绵体内压评价大鼠勃起功能,Masson法检测大鼠阴茎海绵体平滑肌密度的变化,Western blot检测阴茎海绵体中IGFBP-3蛋白的表达.结果:shIGFBP-3组大鼠海绵体内压为(112±16) mmHg,高于randomer shRNA组(63±11) mmHg和对照组(59±12) mmHg,差异有统计学意义(P＜0.05).与randomer shRNA组和对照组相比,shIGFBP-3组大鼠阴茎海绵体平滑肌的密度明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05);Western blot显示shIGFBP-3组中IGFBP-3蛋白表达较其他两组明显减少.结论:shIGFBP 3基因注射可能提高糖尿病性勃起功能障碍大鼠的阴茎海绵体内压及改善阴茎海绵体平滑肌的密度.     

输精管逆向注射30%乙醇引起大鼠精子活力低下的实验研究

目的:探讨输精管逆向注射30%乙醇至附睾导致大鼠精子活力低下的原因以及机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为注射组(n=15)、假手术对照组(n=15)和正常对照组(n=10),注射组在输精管靠近附睾2 cm处用1 m l注射器注射30%乙醇0.5 m l;假手术组只在输精管管壁相同部位用注射针刺一小孔;对照组未作任何处置。术后1个月,比较3组大鼠精子活力,苏木精-伊红(HE)染色观察输精管管壁的变化,检测附睾组织匀浆中白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)和肉碱的含量变化。结果:1个月后,注射组的精子活动率为(30±14)%,假手术组(64±11)%,正常组为(68±9)%。注射组精子活力明显降低,与假手术对照组和正常对照组比较差异有极显著性(P<0.01)。IL-6、IFN-γ含量注射组分别为(772.7±211.0)、(350.7±39.0)pg/m l,假手术组分别为(308.5±121.0)、(172.2±61.0)pg/m l,正常对照组分别为(287.8±143.0)、(163.8±21.0)pg/m l,注射组显著高于假手术组和对照组(P<0.05)。注射组肉碱含量[(491.1±48.0)mol/L]显著低于假手术组[(664.6±45.0)mol/L]和对照组[(605.5±99.0)mol/L],P均<0.05。结论:输精管逆向注射低浓度乙醇能干扰附睾中的精子成熟环境,并激活生殖系统的免疫细胞分泌细胞因子,导致精子活力低下。     

薄荷醇抑制前列腺癌DU145细胞的增殖和迁移

目的探讨薄荷醇对雄激素非依赖性前列腺癌DU145细胞增殖和迁移能力的影响。方法通过RT-PCR、免疫组织化学和Western blot方法检测TRPM8和TRPA1的表达;MTT和划痕试验检测薄荷醇对DU145细胞的增殖和迁移能力的影响;流式细胞术检测TRPM8对DU145细胞周期和凋亡的影响。结果 RT-PCR、免疫组织化学和Western blot提示TRPM8在DU145细胞中高表达而TRPA1在DU145细胞中不表达;薄荷醇能诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,与未经薄荷醇处理的细胞相比,经100μmol/L薄荷醇处理的细胞培养24、48和72h后,G0/G1期细胞显著增加（49.12%±1.92%vs61.71%±2.70%、77.65%±1.63%、71.81%±2.46%,P〈0.05,P〈0.01）,进而抑制细胞增殖（P〈0.05）,并抑制细胞迁移（P〈0.05）,流式细胞术检测显示薄荷醇并不引起细胞凋亡。结论 TRPM8可能成为前列腺癌治疗的一个新靶点,对于高表达TRPM8的雄激素非依赖性前列腺癌针对TRPM8通道的药物治疗可能比TRPM8基因治疗更为实用,因此,薄荷醇作为一个潜在的抗肿瘤药物也拥有很大的发展前景。     

薄荷醇抑制前列腺癌DU145细胞的增殖和迁移

目的探讨薄荷醇对雄激素非依赖性前列腺癌DU145细胞增殖和迁移能力的影响。方法通过RT-PCR、免疫组织化学和Western blot方法检测TRPM8和TRPA1的表达;MTT和划痕试验检测薄荷醇对DU145细胞的增殖和迁移能力的影响;流式细胞术检测TRPM8对DU145细胞周期和凋亡的影响。结果 RT-PCR、免疫组织化学和Western blot提示TRPM8在DU145细胞中高表达而TRPA1在DU145细胞中不表达;薄荷醇能诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,与未经薄荷醇处理的细胞相比,经100μmol/L薄荷醇处理的细胞培养24、48和72h后,G0/G1期细胞显著增加(49.12%±1.92%vs61.71%±2.70%、77.65%±1.63%、71.81%±2.46%,P<0.05,P<0.01),进而抑制细胞增殖(P<0.05),并抑制细胞迁移(P<0.05),流式细胞术检测显示薄荷醇并不引起细胞凋亡。结论 TRPM8可能成为前列腺癌治疗的一个新靶点,对于高表达TRPM8的雄激素非依赖性前列腺癌针对TRPM8通道的药物治疗可能比TRPM8基因治疗更为实用,因此,薄荷醇作为一个潜在的抗肿瘤药物也拥有很大的发展前景。     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠中低睾酮水平对阴茎海绵体平滑肌的影响

目的 观察糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的睾酮水平变化对其阴茎海绵体平滑肌组织和超微结构的影响.方法 将3个月龄雄性Wistar大鼠20只随机等分为两组:正常对照组和DMED组,行放射免疫法测定其血清睾酮浓度和masson染色观察阴茎海绵体平滑肌(CCSM)密度以及通过透射电镜观察海绵体平滑肌细胞的超微结构.结果 DMED组大鼠的血清睾酮水平(17.445 ±2.540) nmol/L较正常组(338.457±63.802) nmol/L明显下降(P＜0.01);同时DMED组大鼠CCSM密度(5.640±0.597)％较正常对照组(19.890±1.957)％亦明显减少(P＜0.01),透射电镜下还观察到DMED组大鼠阴茎CSMC的核浆比增大,高尔基复合体明显肥大以及线粒体水肿.结论 睾酮水平下降可能导致DMED大鼠阴茎海绵体平滑肌发生病理变化.     

30%乙醇经大鼠输精管逆向注射的抗生育研究

目的:通过对大鼠经输精管逆向注射30%乙醇的研究,初步探讨这种方法的抗生育效果及其安全性。方法:将30只SD雄性大鼠[3月龄,重(200±20)g],随机均分为实验和对照两组:分别用5号针头注射器(1 m l)取30%乙醇0.5 m l(实验组)和生理盐水0.5 m l(对照组)经每只雄性大鼠的输精管逆向注射。分别于1.5个月和3个月时各用60只SD雌性成年大鼠交配作妊娠试验来计算其雌鼠妊娠率,并在3个月后处死所有雄鼠,取出附睾组织在镜下检查其精子活力和精子畸形率;同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检查其生精细胞的凋亡情况。结果:实验组在1.5个月时交配后的雌鼠妊娠率为0,3个月时的a+b级精子为(0.32±1.12)%、雌鼠妊娠率为(0.58±1.27)%,与对照组[(80.62±2.68)%、(70.68±1.62)%、(86.62±1.68)%]相比,均有明显的下降(P<0.05);而精子畸形率[(78.26±1.08)%]与对照组[(20.34±1.26)%]相比,却出现了明显的上升(P<0.05);同时3个月时实验组大鼠的凋亡指数为(7.63±1.16)%,与对照组(5.62±1.32)%相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:乙醇经大鼠输精管逆向注射的方法在3个月内可产生明显的抗生育效果,但对其生精细胞没有显著性的影响。     

糖尿病勃起功能障碍大鼠血清睾酮的变化及意义

目的:探讨睾酮在糖尿病大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的意义。方法:3月龄Wistar雄性大鼠18只(SPF级),随机分为正常对照和糖尿病组,每组9只,采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,3月后检测大鼠阴茎海绵体内压(ICP)和平均动脉压(MAP)以评价勃起功能,然后分别行ELISA法检测血清睾酮水平和阴茎海绵体组织中cGMP浓度的变化,Masson法检测阴茎海绵体平滑肌密度的变化。结果:糖尿病组大鼠海绵体内压为(58±11) mmHg,低于正常对照组(115±13) mmHg,差异有统计学意义(P<0. 05),同时糖尿病组大鼠的血清睾酮水平[(17. 45±2. 54) pmol/mL]较正常组[(338. 46±63. 80) pmol/mL]明显下降(P<0. 05);且我们还发现糖尿病组大鼠阴茎海绵体平滑肌密度和阴茎海绵体组织中cGMP浓度均明显下降,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:糖尿病大鼠血清睾酮水平明显下降,可能通过降低阴茎海绵体平滑肌的密度和大鼠阴茎海绵体组织中cGMP含量,从而在糖尿病ED的发生过程中发挥一定的作用。