白藜芦醇通过HIF-1α/BNIP3信号通路促进骨骼肌缺氧损伤修复的机制

目的 探讨白藜芦醇（Res）对二氯化钴（CoCl₂）诱导的骨骼肌细胞缺氧损伤的保护机制。方法 将分化的小鼠骨骼肌细胞系C2C12按不同干预方法分为4组,即对照组、 CoCl₂组、 Res组、 CoCl₂+Res组。观察免疫荧光染色后的细胞形态,统计肌管融合指数;采用荧光定量PCR技术检测肌球蛋白重链（MyHC） mRNA水平的变化;采用蛋白免疫印迹法检测低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、 Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）以及p62和Beclin1蛋白水平。结果 CoCl₂诱导的缺氧损伤使肌细胞形态异常、肌管分化减少,与对照组比较,CoCl₂组肌管融合指数降低（P < 0.001）,MyHC mRNA水平和蛋白表达量降低（P均 < 0.05）,HIF-1α、BNIP3、Beclin1蛋白水平和LC3升高（P均 < 0.001）,p62蛋白水平降低（P < 0.001）。加入Res处理后,细胞形态恢复,肌管分化增多;与CoCl₂组比较,CoCl₂+Res组肌管融合指数升高,MyHC亚型（Myh7、Myh2、Myh4）的mRNA和MyHC蛋白水平升高,HIF-1α、BNIP3和Beclin1蛋白水平降低,p62蛋白水平升高（P均 < 0.05）。结论 CoCl₂诱导的缺氧可抑制MyHC表达,导致肌细胞分化和融合能力下降。Res可增强缺氧条件下成肌细胞的分化和融合能力,对肌细胞的损伤修复有保护作用,可能通过抑制HIF-1α/BNIP3信号通路诱导的自噬来促进肌细胞的损伤修复。