序贯应用甲状旁腺素和二膦酸盐预防激素性骨质疏松的实验研究

目的 研究序贯应用甲状旁腺素和阿仑膦酸钠对类固醇兔骨质疏松的影响。方法 将成年新西兰大白兔30只随机分为3组：对照组、激素模型组、甲状旁腺素和阿仑膦酸钠治疗组,9周后取股骨和腰椎行超声骨密度测量,再行股骨扭转和腰椎压缩试验,检测血清钙、磷和碱性磷酸酶。结果 激素模型组的BUA,SOS值和骨生物力学参数较对照组有明显减少（P〈0．01）,血清磷和碱性磷酸酶减少;甲状旁腺素和阿仑膦酸钠治疗组的BUA,SOS值和骨生物力学参数较激素模型组增加（P〈0．05）,血清磷和碱性磷酸酶增加。结论 序贯应用甲状旁腺素和阿仑膦酸钠可以减少类固醇兔骨量的丢失,预防骨质疏松的发生。     

改革机能学实验方法 适应本科教学需要

机能学实验是一门将生理学、药理学、病理生理学3门课程的实验有机融合在一起的综合性实验课程，其体现了学科间的交叉融合和新技术的应用以及培养学生的创新能力，是医学院校和生命科学院大多数专业的必修课程；同时，其也是实验设备和实验技术要求较高的课程。对于如何使机能学实验顺利开展，怎样提高学生实验的成功率，进而培养学生的学习兴趣，我们做了一些教学改革尝试，收到了可喜的效果。     

预防用药对激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的影响

背景:由于临床长程使用糖皮质激素的情况日益增多,激素性股骨头坏死的发病率出现增高趋势。骨细胞凋亡在早期激素性股骨头坏死中起着重要作用。目的:应用类固醇激素诱导兔股骨头坏死模型,观察分析采取中西药物并用预防激素性股骨头骨细胞凋亡的效果。设计:随机对照动物实验。单位:韶关学院医学院药学教研室和解剖学教研室,广东省粤北人民医院病理科。材料:实验于2005-04/07在韶关学院医学院中心实验室完成。选取成年新西兰大白兔30只,随机分为空白对照组、激素组、预防用药组,10只/组。血塞通片(主要成分为三七总皂甙,玉溪市维和制药有限公司,生产批号200410290,25mg/片);脂必妥片(主要成分为山楂、白术、红曲,成都地奥九泓制药厂,产品批号0410063,350mg/片);阿仑膦酸钠片(主要成分为4-氨基-1-羟基亚丁基-1,海南曼克星制药厂生产,批号040501,5mg/片);地塞米松磷酸钠注射液(河南天康制药有限公司生产,生产批号040905,5g/L)。方法:①动物适应实验环境1周后,激素组和预防用药组动物均肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL,2次/周,建立激素性股骨头坏死动物模型。空白对照组不造模,在相同时间点肌注等量生理盐水。②预防用药组注射地塞米松的同时,每天灌喂给予血塞通25mg、脂必妥350mg和阿仑膦酸钠5mg,连续给药8周。激素组和空白对照组不给药。各组动物均肌注青霉素预防感染,5万u/只,2次/周。③停药1周后采用原位末端标记法对各组动物进行股骨头细胞凋亡检测,每张玻片上随机选择10个区域,每个区域计数100个骨细胞,统计每100个细胞中的细胞凋亡数。采用醋酸铀及柠檬酸铅双染色观察股骨头细胞的超微病理结构变化。主要观察指标:①各组股骨头骨细胞凋亡检测结果。②各组股骨头骨细胞超微病理结构电子显微镜观察结果。结果:实验选取成年新西兰大白兔30只,预防用药组实验过程中死亡1只,共29只兔进入结果分析。①各组股骨头细胞凋亡检测结果:激素组的骨标本可见细胞核中出现棕黄色颗粒的阳性细胞,即凋亡细胞。激素组每100个骨细胞中的凋亡细胞数均明显多于空白对照组和预防用药组[(24.14±5.46),(2.47±0.76),(8.12±3.23)个,q=8.76,q=13.45,P均<0.01];空白对照组和预防用药组基本相似(P>0.05)。②各组股骨头骨细胞超微病理结构电子显微镜观察结果:激素组骨细胞核体积缩小,染色质呈边聚现象,部分染色质更浓密,电子密度增加,结构模糊不清,具有凋亡细胞特征。预防用药组骨细胞电镜下核膜完整,染色质均匀,核占细胞的1/3左右。结论:采取类固醇激素诱导免股骨头坏死后,血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠联合应用能够抑制兔激素性股骨头细胞的凋亡。     

预防用药对激素性股骨头血流量和血液流变学的影响

目的探讨应用药物预防激素性股骨头坏死。方法给予类固醇激素,诱导出兔股骨头坏死动物模型,同时使用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠治疗,观察血液流变学指标和股骨头血流量。结果该方法可增加模型动物股骨头血流量,改善血液流变学指标,其增加或改善幅度与激素组相比有显著差异(P<0．05)。结论在长程使用类固醇激素同时应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠可提高股骨头血流量,改善血液流变学指标预防或减缓激素性股骨头坏死。     

放射性微球技术检测实验性股骨头坏死血流量

为探讨在使用激素过程中如何预防股骨头坏死，本研究在建立激素性股骨头坏死动物模型的过程中，给予相关药物行预防治疗，并采用放射性微球技术测量股骨头血流量，以判断治疗效果。     

联合用药预防激素性股骨头坏死对骨细胞凋亡和Bcl-2表达的影响

目的观察联合用药预防激素性股骨头骨细胞凋亡的可能性。方法30只兔随机分成三组：对照组同期肌注生理盐水;激素组是给予糖皮质激素肌注;治疗组在给予同剂量糖皮质激素同时,每日使用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠;用末端原位标识（TUNEL）法及免疫组化技术分别检测骨细胞凋亡和bcl-2表达情况,电镜观察股骨头组织学变化。结果电镜下激素组骨细胞核体积缩小,染色质边聚和浓密多见于对照组和治疗组;激素组凋亡细胞比率显著高于治疗组,而其Bcl-2表达则较治疗组低。结论联合应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠能抑制兔激素性股骨头细胞凋亡。     

预防用药对激素性股骨头骨细胞凋亡的影响

目的探讨应用药物预防激素性股骨头骨细胞凋亡的可能性。方法30只兔随机分A、B、C组:A组(对照组)同期肌注生理盐水;B组(激素组)给予糖皮质激素肌注;C组(治疗组)给予以上剂量糖皮质激素的同时,每日使用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠,用末端原位标识(TUNEL)法检测骨细胞凋亡,电镜观察股骨头组织学变化。结果激素组电镜下骨细胞核体积缩小,染色质呈边聚现象,部分染色质更浓密,电子密度增加,结构模糊不清;激素和治疗组凋亡细胞数分别为(24.14±5.46)%和(8.12±3.23)%。结论血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠同时应用能抑制兔激素性股骨头细胞凋亡。     

甲状旁腺素和二膦酸盐对骨密度和骨生物力学的影响

目的:研究应用甲状旁腺素和阿仑膦酸钠对激素性骨质疏松兔骨密度和生物力学的影响。方法:采用成年新西兰大白兔,随机分为对照组、激素模型组、甲状旁腺素和阿仑膦酸钠治疗组,9周后取股骨和腰椎行超声骨密度测量,再行股骨扭转、三点弯曲和腰椎压缩试验。结果:激素模型组的宽频超声衰减(BUA)、超声传导速度(SOS)值和骨生物力学参数较对照组有非常明显减少,甲状旁腺素和阿仑膦酸钠治疗组的BUA、SOS值和骨生物力学参数较激素模型组明显增加。结论:序贯应用甲状旁腺素和阿仑膦酸钠可以减少激素性兔骨量的丢失,预防骨质疏松的发生。     

甲状旁腺素和二膦酸盐对激素性骨质疏松影响的超微结构观察

目的探讨应用甲状旁腺素和阿仑膦酸钠对激素性骨组织超微结构的影响。方法采用成年新西兰大白兔,随机分为对照组、激素模型组、甲状旁腺素和阿仑膦酸钠治疗组,每组10只,9周后取第4腰椎进行透射电镜下超微结构观察。结果对照组标本为成骨相和吸收相骨细胞;激素组大多为吸收相、退变相及死亡的骨细胞;治疗组主要为吸收相和成骨相骨细胞,吸收相骨细胞稍多。结论甲状旁腺素和阿仑膦酸钠能拮抗糖皮质激素对骨组织超微结构的影响。     

预防用药对激素性股骨头坏死组织结构和血流量的影响

背景：目前关于激素性股骨头缺血性坏死的研究多集中在治疗已形成的坏死，对在使用激素过程中如何预防股骨头坏死，报道较少。 目的：观察激素性股骨头坏死预防性给药对股骨头组织结构和血流量的影响。 设计：随机对照实验。 单位：韶关学院医学院药学教研室和解剖学教研室；广东省粤北人民医院核医学科。 材料：成年新西兰大白兔30只，雌雄不拘，体质量（2．5&;#177;0．5）kg。 方法：实验于2005—04／07在韶关学院医学院中心实验室、广东省粤北人民医院核医学科和中山大学北校区电镜室完成。①30只兔随机分为3组，每组10只。对照组肌注生理盐水1mL／kg，2次／周，生理盐水10mL/d灌胃；激素组肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL／kg，2次／周，生理盐水10mL／d灌胃；治疗组肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL／kg，2次／周，从注射地塞米松第1天开始每天灌喂血塞通25mg／kg、脂必妥350mg／kg和阿仑膦酸钠5mg／kg。连续用药8周。②停药1周后3组动物同时采用放射性微球技术测量股骨头血流量；光镜及电镜观察组织学改变。 主要观察指标：①各组兔股骨头血流量。②各组兔股骨头软骨组织形态及超微结构。 结果：①治疗组血流量显著多于激素组[（0．261&;#177;0．042），（0．197&;#177;0．053）mL／（min&;#183;g），q=6．10,P〈0．01]，与对照组[（0．243&;#177;0．039）mL／（min&;#183;g）]比较差异无显著性意义。②治疗组空骨陷窝显著少于激素组[（15．22&;#177;5．49）。（24．78&;#177;7．87）个，q=6．35，P〈0．01]，与对照组[（10．38&;#177;3．78）个]比．较差异无显著性意义。③治疗组细胞正常，内质网丰富，细胞核呈正常形态；激素组骨细胞体积缩小，核固缩，染色质边聚，骨陷窝扩大。 结论：在长程使用类固醇激素同时应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠可提高股骨头血流量，改善骨组织结构，预防或减缓激素性股骨头坏死。