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目的:构建含有促甲状腺激素受体抗体(TRAb)单链抗体的重组载体pFastBac~(TM)1-ScFv-IgG1Fc,通过Bac-to-Bac表达系统实现单链抗体融合蛋白的高效表达,并检测目的蛋白表达和免疫学活性。方法:TRAb抗体的重链可变区(HV)和轻链可变区(LV)的序列以linker(G4S)连接,构建ScFv;Genbank检索人IgG1Fc序列,SnapGene软件分析上述序列和载体pFastBac~(TM)1,以基因合成方式构建重组质粒pFastBac~(TM)1-ScFv-IgG1Fc;pFastBac~(TM)1-ScFv-IgG1Fc转化感受态大肠杆菌DH10Bac生成重组杆粒,pUC/M13正向和反向引物进行PCR分析确认目的基因的序列;重组杆粒采用Cellfectin?Ⅱ试剂转染昆虫细胞Sf9生成P1病毒储液,继续感染Sf9生成高滴度的P2和P3病毒储液;P3病毒储液感染High Five~(TM)细胞,收集上清通过SPA-Sepharose CL-4B亲和层析纯化获得较纯的单链抗体融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的蛋白;化学发光和免疫组化检测目的蛋白抗原结合力。结果:PCR扩增得到约3 747 bp的基因序列,重组杆粒中目的基因正确插入;目的蛋白位于55 kDa附近且无杂带,纯度较高;目的蛋白浓度为248 U/L,单链抗体融合蛋白的结合力较好。结论:Bac-to-Bac表达系统成功构建并表达了TRAb单链抗体融合蛋白,抗原亲和力良好。 相似文献
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目的 探讨在针对帕金森痴呆患者的治疗过程之中,使用盐酸美金刚药物联合服用的临床疗效。方法 选取2020年1月-2022年10月纳入治疗的帕金森痴呆患者84例,根据不同用药方案将患者分为对照组42例与观察组42例,对照组患者予以盐酸多奈哌齐治疗,观察组则在对照组基础上联合盐酸美金刚治疗,比较两组患者治疗效果。结果 观察组患者总有效率为95.24%高于对照组78.57%(P<0.05)。治疗后,观察组患者的MOCA、MMSE量表评分高于对照组患者(P<0.05),且治疗后观察组患者的ADL量表评分优于对照组(P<0.05)。两组患者不良症状发生率相当,(P>0.05)。结论 在针对帕金森痴呆患者的治疗过程之中,使用盐酸美金刚药物联合服用,不但效果明显有所提高,还可促进日常生活能力和认知功能的恢复,且治疗安全性高。 相似文献
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目的 探讨前列腺小体外泌蛋白(prostatic exosomal protein,PSEP)检测对慢性前列腺炎的诊断价值。方法收集102 例慢性前列腺炎患者和70 例健康体检者的尿液标本,应用前列腺小体外泌蛋白检测试剂盒,对患者尿液中PSEP 进行定量检测,评价其诊断前列腺炎的灵敏度、特异度和临界值等指标,比较PSEP 检测体系与临床诊断标准的差异。结果 慢性前列腺炎患者PSEP 检测结果为3.002(1.728~3.966)ng/ml,明显高于健康体检者的0.869(0.565~1.094)ng/ml,差异具有统计学意义(P<0.001)。根据受试者工作曲线计算PSEP 的最佳临界值为1.238 ng/ml,ROC 曲线下面积为0.922,对慢性前列腺炎的诊断敏感度为86.27%,特异度为90%。结论 检测患者尿液中的PSEP,取材方便,结果可靠,能提高患者依从性及就诊舒服度,可作为临床上慢性前列腺炎诊断现有方法的补充,为慢性前列腺炎患者临床诊断提供了新的检测依据,值得向临床推广应用。 相似文献
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目的:探讨利多卡因在气管导管套囊中应用的有效性。方法:1体外渗透研究:选取60个套囊,随机分为三组,各20个,a组(2%盐酸利多卡因,ID:7.5)、b组(1.73%碳酸利多卡因,ID:7.5)和c组(1.73%碳酸利多卡因,ID:8.0),测定利多卡因的渗透能力。2临床研究:选择ASAⅠ~Ⅱ级择期手术患者80例,随机分为四组,各20例,A组(对照,空气)、B组(双蒸水)、C组(2%盐酸利多卡因)、D组(1.73%碳酸利多卡因),分别向套囊内加入受试品,观察患者在围拔管期对气管导管的耐受性,HR、MAP、SPO2,以及咳嗽、咽痛、声嘶、痰量、恶心、呕吐等并发症的发生率。结果:1体外渗透研究表明:b组、c组能渗透套囊,a组不能;渗透量与时间成正比;套囊的型号大小对渗透能力无显著影响(P>0.05)。2患者对气管导管的耐受性:D组明显高于A、B、C三组(P<0.05);患者的咳嗽、咽痛、声嘶、血流动力学的波动:D组较A、B、C三组明显减少(P<0.05);痰量、术后恶心、呕吐:A、B、C、D四组患者均无明显改善(P>0.05)。结论:碳酸利多卡因在临床气管导管套囊中应用技术是可行的和有效的。 相似文献
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目的 探讨血清中促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)和甲状腺组织中促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone recepter,TSHR)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的应用价值.方法 收集甲状... 相似文献
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〖HT5"H〗摘要 目的 〖HT5"SS〗了解住院患者铜绿假单胞菌感染情况及耐药性变迁,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。 方法 采用回顾性调查方法,对某医院住院患者铜绿假单胞菌感染情况及其耐药性变迁进行调查分析。 结果 该医院连续5年发生927例铜绿假单胞菌感染患者,从患者送检标本中检出铜绿假单胞菌927株,年平均分离率14.9%,有86.9%分离自痰液标本。铜绿假单胞菌感染患者主要分布在重症监护病房、神经外科和呼吸科。临床分离的铜绿假单胞菌对阿米卡星、美罗培南和亚胺培南等抗菌药物尚比较敏感;对庆大霉素的耐药率最高,接近50%;其中有22.87%为多重耐药菌株。 结论 该医院临床分离的铜绿假单胞菌中多重耐药菌检出率较高,应加强抗菌药物的管理,控制多重耐药菌传播流行。 相似文献
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目的 通过对性别、年龄、乙型肝炎病毒( HBV) DNA载量等因素与血小板( PLT)参数的相关性进行分析,探讨PLT参数变化在临床治疗中的意义.方法 对确诊为HBV感染的无症状乙肝患者的HBV DNA载量及PLT参数进行检测和统计学分析.结果 不同年龄、不同HBV DNA载量对PLT和PCT计数有显著影响.其中与相同年龄组的健康组相比,HBV感染者PLT和血小板比容( PCT)计数显著降低,并以高龄组( >45 岁)变化最为显著. PLT和PCT伴随HBV DNA载量的的升高呈现显著降低趋势.同时,相关性分析表明 HBV 感染者高龄组的 PLT 和 PCT 计数与 HBV DNA 载量呈显著负相关.结论 PLT和PCT在高于45 岁的HBV感染者中随着HBV DNA载量的升高而降低,其变化幅度对判断HBV的复制具有重要的临床参考意义. 相似文献
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目的探讨分析ICU老年患者术后精神障碍的发病率及相关因素。方法以自2011年1月~2016年6月期间我院麻醉科ICU中收治的术后老年患者187例为研究对象。于术后1个月时进行评价分析。以患者年龄、性别、是否合并高血压或糖尿病、围手术期是否发生低血压或低氧血症等作为分组因素,比较不同组间患者术后发生精神障碍的发生率,将有意义的因素再次引入Logistic回归方程,筛选出术后发生精神障碍的独立危险因素。结果术后1个月时,共有33例患者出现精神障碍。单因素分析结果显示,患者是否合并高血压或糖尿病、围手术期是否发生低血压或低氧血症与术后精神障碍的发生显著相关(P0.05),年龄、性别及术后是否使用镇痛泵与术后精神障碍的发生无显著相关性(P0.05)。将术后有无精神障碍作为因变量,上述具有统计学意义的分组因素作为自变量,经Logistic逐步回归分析结果显示,患者合并高血压或糖尿病、围手术期发生低血压或低氧血症均为术后发生精神障碍的独立危险因素(P0.05)。结论老年患者出现术后精神障碍系多个因素协同作用所致,其中合并高血压或糖尿病、围手术期发生低血压或低氧血症均可视为术后发生精神障碍的独立危险因素,应有针对性的加强预防,以降低术后精神障碍的发生率,促进患者康复。 相似文献
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目的探讨血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)、CA199的联合检测在原发性肝癌(PHC)中的诊断价值。方法选取2013年7月至2014年6月收治的67例PHC患者(PHC组)、83例良性肝病患者(良性肝病组),另选取同期125例体检健康者(对照组),采用化学发光法分别检测所有研究对象的血清AFP、CEA、CA125、CA199水平并进行统计学分析。结果 PHC组血清AFP、CEA、CA125和CA199阳性率分别为71.6%、40.3%、53.7%、58.2%,均高于良性肝病组与对照组,比较差异均有统计学意义(P0.05);4项肿瘤标志物联合检测在PHC组的阳性率为91.0%,高于各肿瘤标志物单项检测的阳性率,比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论 AFP、CEA、CA125、CA199联合检测能够明显提高PHC的诊断阳性率,有助于PHC的早期诊断。 相似文献