结肠镜检低血糖发生率及肠内营养素预防低血糖的研究

比较结肠镜检患者一次清肠和二次清肠的低血糖发生率及肠内营养素膳食在结肠镜检查中对低血糖发生的预防效果和对肠道准备质量的影响。将入院进行结肠镜检查的患者分为一次清肠组、二次清肠组、二次清肠+肠内营养素膳食（半固态预包装营养食品）组（简称干预组）。所有患者在结肠镜检查前测血糖,检查束后通过波士顿肠道准备评分量表评价肠道清洁度。结果,结肠镜检患者低血糖发生率在一次清肠组、二次清肠组、干预组分别为14.38%（23/160）、17.50%（28/160）、6.45%（4/62）。肠道清洁度高者所占比例在一次清肠组、二次清肠组、干预组分别为31.25%（50/160）、35.00%（56/160）、82.26%（51/62）。可见,相比于一次清肠患者,二次清肠患者低血糖发生率增高,而肠内营养素干预能够有效地降低低血糖发生率,同时提高患者肠道准备质量,是一种值得推荐的肠道准备方法。     

多学科协作管理模式在胃癌合并糖尿病术后辅助化疗患者中的应用

目的 探讨多学科协作管理模式对胃癌合并2型糖尿病术后辅助化疗患者体重指数(BMI)及血糖水平控制的影响.方法 选取2018年7月至2019年6月四川省肿瘤医院综合内科收治的68例符合入组标准的胃癌合并糖尿病,且行术后辅助化疗的患者为研究对象,按照入院时间分为两组,2018年7-12月入院患者30例作为对照组,2019年...     

Th17淋巴细胞对甲型H1N1流行性感冒病毒清除作用的探讨

目的 探讨甲型H1N1流行性感冒(流感)患者Th17淋巴细胞表型、比例及其与病毒清除之间的关系.方法 将甲型H1N1流感患者70例、季节性流感患者30例、健康对照者68例分别纳入3组.通过细胞内染色,流式细胞技术测定3组人群外周血Th1、Th2、Th17、调节性T细胞(Treg)淋巴细胞比例;ELISA法测定血浆及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中的IFN-γ、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-6水平;RT-PCR检测鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒载量.统计学方法采用单因素方差分析和线性相关分析.结果 甲型H1N1流感患者Th17淋巴细胞比例为(2.740±0.210)%,较健康对照者的(3.443±0.154)%及季节性流感患者的(3.443±0.277)%显著下降(F=4.242,P＜0.05),而3组间Th1、Th2、Treg淋巴细胞比例无明显差异;甲型H1N1流感患者血浆TGF-β水平为(10±8)ng/mL,较健康者的(43±32)ng/mL及季节性流感患者的(18±10)ng/mL显著下降(F=17.72,P＜0.01);甲型H1N1流感患者PBMC中TGF-β水平为(782±736)pg/mL,较健康者的(1462±315)pg/mL及季节性流感患者的(1481±348)pg/mL显著下降(F=5.730,P＜0.01);Th17淋巴细胞比例与病毒清除时间呈负相关(r=-0.38,P=0.02).结论 甲型H1N1流感患者Th17淋巴细胞比例显著降低,且与TGF-β水平密切相关,其降低可能导致机体延长排毒时间.     

甲型H1N1流感并发肺炎患者细胞免疫学特征的研究

目的 观察甲型H1N1流感并发肺炎患者体内CD4＋T淋巴细胞亚群及相应细胞因子变化情况及其与并发肺炎之间的关系.方法 共有68例健康人、53例单纯甲型H1N1流感患者、16例并发肺炎甲型H1N1流感患者入选,荧光定量PCR方法 检测鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸;流式细胞术测定外周血CD4＋T淋巴细胞亚群表型和频率;ELISA方法 测定血浆TGF-β、IL-6、IFN-γ水平.统计学方法 采用单因素方差分析.结果 并发肺炎甲流患者高峰病毒载量和排毒时间较单纯甲流患者显著升高;而Th17淋巴细胞较单纯甲流患者及健康人显著下降（P＜0.05）,但Th1、Th2、Treg淋巴细胞比例3组人群差异无统计学意义（P＞0.05）;并发肺炎甲流患者血浆TGF-β水平较其他两组人群显著下降（P＜0.05）,IL-6、1FN-γ水平三组人群差异无统计学意义（P＞0.05）;排毒时间与降低的Th17淋巴细胞比例呈负相关（r=-0.38,P＜0.05）.结论 甲型H1N1流感病毒可能有抑制Th17淋巴细胞的作用,而Th17淋巴细胞下降及其导致的机体细胞免疫功能受损可能降低机体清除病毒的能力从而导致肺炎的发生.     

热疗联合放疗治疗恶性肿瘤研究进展

恶性肿瘤发病率升高,给人们的健康带来极大的威胁。放疗作为肿瘤主要的治疗手段之一,近20年来取得了很大的进步,但由于肿瘤的异质性、易于扩散,以及射线对正常组织的损伤所带来的局限性,放疗的肿瘤控制率(tumor control probability,TCP)提高有限。利用热疗来治疗恶性肿瘤的机制是对患者身体进行加热,升高肿瘤组织的温度,肿瘤细胞对温度有不耐受性,将其杀死,同时,热疗能使肿瘤细胞的放射敏感性得到提高,放疗的治疗效果变得更加显著,热疗能够弥补通过放疗治疗恶性肿瘤过程中存在的不足,两者相辅相成,共同治疗肿瘤患者。     

RT-PCR检测手足口病病原体EV71

目的 应用分子生物学技术检测手足口病病原体EV71,为临床诊断提供依据.方法 根据卫生部发布的<手足口病预防控制指南>(2008年版),收集2008年5月深圳市东湖医院收治的临床诊断为手足口病患儿的大便标本265份.应用RT-PCR技术检测手足口病病原体EV71,将RT-PCR产物测序并在GenBank进行比对分析以检测该方法 的准确度.结果 RT-PCR扩增到特异性EV71 VP1区DNA片段,大便阳性率为24%.测序验证所得DNA片段是EV71 VP1区基因,同时也验证RT-PCR准确度达70%(14/21).结论 RT-PCR检测手足口病病原体EV71可以应用于临床辅助诊断.     

小儿单孔腹腔镜疝囊高位结扎术后复发的原因及防治

目的:分析小儿单孔腹腔镜疝囊高位结扎术后复发的危险因素。方法:采用回顾性描述性病例系列研究方法，收集2018年12月至2021年12月收治的65例小儿单孔腹腔镜疝囊高位结扎术后腹股沟斜疝复发病例，其中33例初次手术在外院施行，分析相关复发因素。结果:患儿初次手术年龄、术后活动情况、合并症及发病时长是术后复发的独立危险因素。初次手术年龄越小、术后活动情况越多，复发的风险越高；有合并症的患儿，复发风险高于无合并症者；发病时间越长，复发的可能性越大。结论:小儿单孔腹腔镜疝囊高位结扎术后复发的原因有初次手术年龄、术后活动情况、合并症情况及发病时长。结合各因素分析，有效的日常科普、宣教可提高患儿家属的手术及术后依从性，减少术后剧烈活动次数，可有效降低术后复发风险。     

ARID1A基因突变体的构建及其在肝癌细胞中的过表达鉴定CSCD

目的 构建人类染色体重塑复合物SWI/SNF（Switch/Sucrose NonFermentable）中重要组份ARID1A（A-T rich interaction domain）的突变过表达载体,并检测野生型ARID1A基因及突变型ARID1A基因在肝癌细胞株HepG2中的表达情况.方法 采用overlap PCR技术构建在野生型质粒pcDNA6-ARID1A基础上构建结构域缺失突变体pcDNA6-ARID1A/△ARID以及pcDNA6-ARID1A/△DUF3518;利用脂质体转染技术将野生型质粒以及构建的突变型质粒转染到肝癌细胞HepG2中进行过表达;通过Real-time PCR以及Western blot技术对野生型及突变型ARID1A在肝癌细胞中的表达情况进行鉴定.结果 经双酶切后SDS-PAGE分析以及测序验证,成功构建了真核表达载体pcDNA6-ARID1A的突变型质粒pcDNA6-ARID1A/△ARID以及pcDNA6-ARID1A/△ DUF3518;通过Real-time PCR以及Western blot的方法验证,ARID1A及ARID1 A/△ARID在肝癌细胞株HepG2中成功过表达,而ARID1A/△ DUF3518蛋白可能降解.结论 成功构建ARID1A功能域缺失型突变体,并在肝癌细胞株HepG2中稳定过表达ARID1A及ARID1A/△ARID;ARID1A/△ DUF3518蛋白的缺失暗示DUF3518结构域可能起着稳定蛋白结构的功能.     

SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选

目的:构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株,为研究SLC7A11基因的表达沉默对肝癌发生发展的影响奠定基础。方法:针对SLC7A11基因的不同部位合成3个siRNA的寡核苷酸片段,分别将其克隆到真核表达载体p GPU6/GFP/Neo中。利用脂质体转染法分别将质粒导入肝癌LM3细胞,24小时后观察细胞内GFP表达情况,并通过real-time PCR及Western blot的方法比较各组细胞SLC7A11基因mRNA和蛋白的表达水平,然后用G418对转染细胞进行筛选培养。结果:经酶切分析及测序验证,成功构建了靶向沉默SLC7A11基因的真核表达质粒p GPU6-SLC7A11-siRNA;通过real-time PCR及Western blot的方法验证,成功筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株。结论:成功构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株,为进一步研究SLC7A11基因表达沉默对肝癌细胞发生发展的影响奠定了基础。     

艰难梭状杆菌肠毒素B在巨大芽孢杆菌中的表达和鉴定

目的 获得高纯度和具有生物活性的重组肠毒素B(rTcdB).方法 以艰难梭状芽孢杆菌染色体DNA为模板,通过PCR方法扩增得到全长TcdB基因并克隆至穿梭载体pHis1522.构建的质粒经直接测序验证无误后,转化巨大芽孢杆菌原生质体,在木糖的诱导作用下进行TcdB的表达、纯化及生物活性鉴定.结果 从细菌培养液中纯化得到rTcdB,浓度达到5～10 mg/L,其相对分子质量与天然的TcdB蛋白接近,生物活性与天然的TcdB蛋白相似.结论 在巨大芽孢杆菌中成功表达了具有完整结构和活性的艰难梭状芽孢杆菌TcdB重组蛋白.

Abstract：

Objective To express and purify recombinant and biologically active Clostridium difficile toxin B (rTcdB). Methods The genes of TcdB were amplified by polymerase chain reaction (PCR) using chromosomal DNA from a toxigenic strain, and cloned into a shuttle vector pHis1522.The sequences of TcdB genes in the vector were verified by DNA sequencing. The construction was transformed into Bacillus megaterium protoplasts and the protein expression was driven by a xylose promoter. The purified protein was tested for biological activity. Results rTcdB was successfully purified from bacterial crude extracts. Approximately 5-10 mg of highly purified recombinant toxin was obtained from one liter of bacterial culture. The expressed rTcdB had molecular mass similar to the native toxin, and its biological activity was proved to be similar to its native counterpart after an extensive examination. Conclusion rTcdB with biological activities is successfully expressed in Bacillus megaterium.