DNA芯片快速检测耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变

目的 开发快速检测耐利福平结核分枝杆菌(结核菌)rpoB基因突变的DNA芯片。方法 根据结核菌rpoB基因序列设计探针并制作基因芯片，从临床样品中分离出结核菌的基因组DNA，PCR扩增含有rpoB基因突变位点的特异DNA片段，荧光标记后与芯片上含有的检测特异突变位点的寡核苷酸探针进行杂交，同时与DNA直接测序法测定序列比较。结果 35株耐利福平结核菌中有91．4％(32／35)用直接测序法检测出存在rpoB基因突变，DNA芯片的检测效率为71．4％(25／35)。结论 用DNA芯片检测结核菌对利福平的耐药性具有较高的特异性和敏感性，可用于临床结核菌耐药性检测。     

基因芯片法诊断地中海贫血

ThalaChipTM是一种基于DNA芯片技术识别中国地区已知地中海贫血 (珠蛋白合成障碍性贫血 ,地贫 )基因型的新技术 ,专为快速检测α和 β珠蛋白基因中的DNA缺失和突变而设计的 ,能够同时检测中国地区最常见的 -α3 .7、-α4.2 和- SEA三种α地贫[1] ,以及 2 1种 β珠蛋白基因点突变[2 ] ,覆盖率达到 β地贫的 98%。我们对经初筛确诊或可疑地贫患者的血液标本首先用传统的PCR技术或PCR联合反向点杂交技术 (PCR/RDB)作基因检测 ,再与基因芯片技术检测结果进行比较 ,用DNA直接测序法鉴定差异结果。材料和方法1　样本来源　在健康人群…     

CS型血红蛋白H病复合β地中海贫血的实验研究

目的　探讨血红蛋白H病复合β地中海贫血 ( β 地贫 )的实验诊断。 方法　用血红蛋白电泳对患者作血红蛋白组份定量测定 ,红细胞形态观察协助鉴别诊断 ,PCR扩增作α与 β地贫基因分型 ,DNA测序用于检测αCS 基因突变位点。结果　先证者血红蛋白电泳检出微量HbBart’s与HbConstantSpring(HbCS) ,但未发现HbH带 ,常法PCR扩增仅检测 SEA基因与ⅣS Ⅱ 6 5 4位点突变双杂合子 ,DNA测序结果显示 ,无缺失的α珠蛋白基因上αCS 位点存在T→C突变 ,临床表现为血红蛋白H病。结论　血红蛋H病复合β 地贫时可检测不到HbH( β4 )区带。HbA2 的准确定量分析与红细胞形态的仔细观察有助于该病的分析。该病的发现 ,为认识我国地贫的高度异质性提供了新的资料 ,对临床及时准确诊断该病有重要意义