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目的 构建携带 eap 基因的原核表达载体,诱导表达具有活性的重组 EAP 融合蛋白。 方法 PCR 法扩增金黄色葡萄球菌基因组 DNA,回收、 纯化的扩增产物与 pMD18-T 载体相连接得重组质粒 pMD18-T-EAP,转化 E.coli BL21(DE3)感受态细胞,酶切鉴定;未酶切组作为对照组重组质粒 pMD18-T-EAP 和 pET28a(+)表达载体分别用 Nde I 和 Xho I 限制性内切酶双酶切、连接,转化 E.coli BL21(DE3)感受态细胞,酶切鉴定;空载体作为对照组。用不同浓度(终浓度 1、2、4、8 mmol/L)和不同诱导时间(1、2、3、4、5、6 h)的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对阳性重组菌进行表达优化,分别取 E.coli上清液和沉淀做电泳分析。应用 MagneHisTM 蛋白纯化系统纯化重组 EAP 融合蛋白,并通过薄层扫描测定蛋白质的浓度。 结果 所获 eap 基因与 GeneBank 的基因序列同源性 > 99%;氨基酸同源性达 100%。重组质粒经 IPTG 诱导,阳性重组菌转化子均有表达;当吸光度(A )值等于 0.6 ~ 0.8 时,相对分子质量约 70 000 处出现目的蛋白条带。破碎的重组菌 pET28a-EAP上清液中目的蛋白条带较清楚,沉淀中几乎看不到。终浓度 1 mmol/L 为最佳蛋白表达工作浓度。IPTG 诱导 1 h 重组 EAP 融合蛋白有一定量的表达,随着时间的延长,表达量增加不明显,3 h 时的表达量达最高,之后,蛋白表达量变化不明显。表达的重组 EAP 融合蛋白含量占全菌体蛋白的 29.6%。 结论 成功地克隆和表达了金黄色葡萄球菌重组 EAP 融合蛋白,为进一步研究以 EAP 蛋白作为免疫原预防和治疗由金黄色葡萄球菌引起的疾病奠定基础。 相似文献
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目的探讨血清抗苗勒管激素水平检测在卵巢储备功能下降(DOR)及卵巢早衰(POF)、多囊卵巢综合征(PCOS)患者中的变化特征,为临床卵巢功能异常的诊断提供指导。方法选取2016年5月-2017年5月在杭州市妇产科医院就诊的PCOS患者38例,POF患者37例,DOR患者40例,另选37例健康女性为对照组。空腹采血并测定抗苗勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、睾酮(T)及空腹胰岛素(FINS)的水平。结果 AMH、FSH、LH、E_2、T及FINS水平在PCOS、POF及DOR组间比较差异有统计学意义(P0.05),其中AMH水平在PCOS组最高、POF组最低,T、FINS水平在PCOS组最高,LH、FSH水平在POF组最高,E_2水平在DOR组最高。3组患者各激素水平与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论 AMH水平在DOR、POF、PCOS患者中都有不同程度的表达,联合其它激素检测对诊断卵巢功能有一定的应用价值。 相似文献
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目的 探究人流术后加快子宫内膜修复的方法及效果。方法 选取240例人流术患者,根据患者来院先后顺序按照数字编号法分为对照组(60例,采用常规药物治疗)、盆底操组(60例)、盆底电生理治疗组(60例)、盆底操+盆底电生理治疗组(60例)。比较四组的临床效果。结果 盆底操+盆底电生理治疗组的阴道出血量、疼痛评分及子宫内膜厚度均优于盆底电生理治疗组、盆底操组、对照组(P<0.05)。四组患者术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 人流术后实施盆底操联合电生理治疗,可减少患者的术后阴道出血量,缓解患者腹部疼痛不适,改善子宫内膜厚度,应用价值显著。 相似文献
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目的:探讨奥扎格雷钠治疗急性脑梗死的临床疗效。方法:将118例患者随机分为对照组和治疗组各59例,其中治疗组在应用丹红及阿司匹林的基础上加用奥扎格雷钠静脉滴注;对照组应用丹红注射液及阿司匹林常规治疗,对两组的临床表现及治疗效果进行综合评价和分析。结果:治疗组中基本治愈患者16例,显著进步28例,进步11例,总有效率为93.22%,治疗效果明显优于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:在常规治疗急性脑梗死的基础上应用奥扎格雷钠,可有效提高疗效,不增加不良反应,安全、有效,值得临床推广。 相似文献
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目的 :评估分段诊刮和B超诊断子宫肌层受侵在处理子宫内膜癌中的价值。方法 :对 2 10例子宫内膜癌术前分段诊刮标本和术后子宫切除标本行病理检查并进行比较分析 ,同时B超检查子宫肌层受侵情况与术后病理对照。结果 :分段诊刮 2 10例中 16 2例临床诊断宫颈受侵 ,术后病理证实其中的 12 4例受侵。临床诊断符合率76 .5 4 % ,假阳性率 2 3.4 6 %。B超显示肌层受侵 4 8例 ,术后病理证实 4 6例 ,符合率 95 .83%。结论 :分段诊刮有局限性。必要时术中冰冻切片予以纠正。B超诊断子宫内膜癌肌层受侵 ,准确率高 ,经济、实用。术前制定子宫内膜癌治疗方案 ,特别是拟行腹膜后淋巴结清扫时 ,应将分段诊刮和B超诊断结合起来考虑更为合理 相似文献
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目的 探讨高龄孕妇血糖特征及其自我管理情况对妊娠结局的影响,为预防不良妊娠结局提供科学依据。方法 以2019年4—9月太和县某医院产科建立产前健康档案的≥35岁孕妇为研究对象,在妊娠35周时进行基本情况及自我管理能力问卷调查,同时收集产检程序中妊娠24~28周时进行的口服葡萄糖耐量试验(OGTT)结果,随访至孕妇分娩后出院,收集不良妊娠结局情况,采用描述流行病学分析方法对血糖水平、自我管理情况对高龄孕妇妊娠结局的影响。结果 本研究共纳入496名高龄孕妇进行研究,孕妇年龄35~43岁,35~39岁占69.36%,调查时孕周34~<37周。高龄孕妇空腹血糖为(5.53±0.41)mmol/L,OGTT 1 h为(11.37±1.05)mmol/L,OGTT 2 h为(8.66±0.68)mmol/L,其中空腹血糖超标者占36.45%,OGTT 1 h超标者占39.64%、OGTT 2 h超标者占38.68%。自我管理总分为(69.82±6.59)分。其中自我防护行为得分为(23.35±4.41)分,胎儿监测得分为(11.48±1.56)分,遵医行为(22.44±3.89)分,日常生活行为(22.44±3.89)分。不良妊娠结局143例,发生率为28.83%。多因素Logistic回归分析结果显示,空腹血糖≥5.1mmol/L(OR=3.121)的高龄孕妇发生不良妊娠结局的可能性较高,自我防护行为得分越高(OR=0.616)、遵医行为得分越高(OR=0.524)、胎儿监护行为得分越高(OR=0.477)的高龄孕妇发生不良妊娠结局的可能性较低。结论 高龄孕妇血糖水平异常比例较高,自我管理行为能力一般,不良妊娠结局发生率较高,相关部门应强化高龄孕妇孕期保健管理,以控制血糖水平,改善妊娠结局。 相似文献
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目的 探索孕妇外周血浆胎儿游离DNA产前检测(NIPT)在阜阳地区胎儿染色体非整倍体产前筛查中的应用。方法 选取2017年4月1日—2020年3月30日在阜阳市8个县区医院完成NIPT的135 875例孕妇为研究对象,对NIPT高风险的孕妇行介入性产前诊断,并随访妊娠结局,计算NIPT的阳性预测值(PPV)。结果 135 875例接受NIPT筛查的孕妇中,共发现891例高风险,其中包括21-三体高风险152例,18-三体高风险71例,13-三体高风险59例,性染色体非整倍体异常(SCA)441例,其他染色体异常168例。其中有554例孕妇接受介入性产前诊断,经染色体核型分析确诊101例21-三体,28例18-三体,8例13-三体,135例SCA和13例其他染色体异常,NIPT对以上几种染色体异常的PPV分别为90.18%、56.00%、20.00%、52.53%及13.68%,复合PPV为51.44%。结论 基于大人群数据分析表明NIPT对21-三体等非整倍体筛查中有满意的筛查效果,PPV远高于血清学产前筛查。但是NIPT筛查高风险孕妇的产前诊断率仍有待提高,NIPT可以作为胎儿染色体... 相似文献