联合IDH1、1p/19q和ATRX对胶质瘤分子分型的临床意义

目的探讨联合异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）、1号染色体短臂和19号染色体长臂（1p/19q）和α-地中海贫血/智力低下综合征X染色体连锁基因（ATRX）对胶质瘤分子分型的临床意义。方法回顾经术后病理证实的104例胶质瘤患者的临床及组织病理资料,采用免疫组织化学法对其存档病理组织蜡块进行IDH1突变、ATRX表达缺失检测,采用荧光原位杂交法检测1p/19q缺失情况,通过门诊复查和电话等方式随访患者的术后生存情况,联合IDH1、1p/19q和ATRX将胶质瘤患者进行分子分型（A型:IDH1突变,1p/19q缺失;B型:IDH1突变,1p/19q完整;C型:IDH1野生,ATRX突变;D型:IDH1野生,ATRX野生）,并分析不同分子分型患者临床病理特征及预后间的差异。结果联合分子分型与胶质瘤患者的年龄、组织学分级、卡氏功能状态（KPS）评分与病理分型均有关（P<0.05）,其中与病理学分型的相关性最大,而与性别、肿瘤部位和肿瘤大小无关（P>0.05）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,4组分子分型的胶质瘤患者术后总生存期差异显著（Log-Rank:χ2=31.631,P<0.001）,其中B型患者的中位生存期最长,D型患者中位生存期最短。COX风险回归分析显示,胶质瘤患者的预后与患者年龄、组织学分级、KPS评分、病理分型、IDH1、ATRX、联合分子分型和治疗方案均独立相关（P<0.05）,而与患者性别、肿瘤部位、大小和1p/19q缺失无关（P>0.05）。结论联合IDH1突变、1p/19q杂合缺失和ATRX突变对胶质瘤患者进行分子分型,有助于临床诊断,还可能为患者术后生存情况提供参考。     

骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系

目的：探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A（MICA）蛋白和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的关系。方法：用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果：MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,两者在骨肉瘤组织的表达呈正相关（r=0.414,P〈0.01）。结论：MICA广泛表达于骨肉瘤组织,其与MMP-9表达可能由相同信号通路调控。     

膀胱癌组织中MICA、NF—κB和p53的表达和意义

目的探讨膀胱尿路上皮癌中MHCI类链相关蛋白A（MHC class I chain．relatedA,MICA）的表达,以及与核因子-KB（ntlclear factor-κB,NF—κB）和p53的相互关系,为研究膀胱癌组织中MICA蛋白的表达机制提供组织学依据。方法用免疫组化方法检测75例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱黏膜中MICA、NF-κB和p53蛋白表达,对MICA、NF-κB和p53在正常膀胱黏膜、浸润和非浸润膀胱癌中的表达进行统计学分析。结果（1）MICA、NF—κB和p53蛋白在膀胱癌的表达率分别为48．0％、85．3％和49．3％,均显著高于正常膀胱黏膜（P〈0．05）。MICA蛋白在浸润性膀胱癌的表达低于非浸润性膀胱癌（P〈0．05）。（2）膀胱癌组织中MICA与NF-κB蛋白表达呈正相关（r=0．256,P=0．027）,而MICA和p53蛋白的表达呈负相关（r=-0．23,P=0．047）。结论膀胱癌中MICA蛋白常表达上调,可作为膀胱癌的肿瘤相关抗原;NF-κB通路可能参与MICA的表达调控;p53通路可能不参与膀胱尿路上皮恶性转化过程中MICA蛋白的表达。     

骨肉瘤组织中MICA基因mRNA和蛋白的表达

【目的】 检测骨肉瘤组织中MHC I类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息&#65377; 【方法】 应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法&#65380;Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织&#65380;6例石蜡包埋正常人骨组织&#65380;9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况&#65377; 【结果】 骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2&#65380;MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达&#65377;【结论】 MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株&#65377;     

浆膜腔积液细胞中Calretinin、CEA、p53、c-erbB-2表达及其意义

目的　探讨浆膜腔积液腺癌细胞和间皮细胞中Calretinin、CEA、p5 3、c erbB 2的表达及其意义。方法　应用细胞块免疫细胞化学方法,检测45例浆膜腔积液腺癌细胞和间皮细胞中Calretinin、CEA、p5 3、c- erbB- 2的表达水平。结果　Calretinin、CEA、p5 3、c erbB 2在腺癌细胞中阳性表达率分别为4% (1/2 6)、5 4% (14 /2 6)、69% (18/2 6)和77% (2 0 /2 6) ,间皮细胞中分别为79 % (15 /19)、16% (3 /19)、5 % (1/19)和2 1% (4 /19)。该4种标志物在腺癌细胞中阳性表达率与在间皮细胞中阳性表达率比较均有非常显著性差异(P <0 .0 1)。结论　Calretinin、CEA、p5 3、c- erbB- 2抗体联合检测可辅助鉴别腺癌细胞和间皮细胞。     

昆明小鼠胎鼠睾丸引带发育过程受己烯雌酚影响模型的建立

目的:建立己烯雌酚(DES)对昆明小鼠胎鼠睾丸引带发育过程影响的动物模型,以备进一步探讨环境雌激素(EES)影响生殖系统发育的机制。方法:孕鼠60只随机分成6组,于孕9~17 d分别给予DES 0、25、50、100、200μg/(kg.d),对照组给予等体积NS。孕17 d处死母鼠取出胎鼠腹部,标本依据不同检查目的分别固定,作光镜和扫描电镜检查。观察死胎率变化及睾丸下降程度。结果:DES致死胎率明显增高,胎鼠引带球发育较差,体积较小,呈圆锥状,引带索细长,组织结构紊乱,睾丸发育较差,下降不全,与对照组比有统计学意义(P<0.05)。结论:DES对胎鼠睾丸引带形态、组织结构影响明显。该模型成功建立可供深入研究EES影响睾丸引带、生殖系统的机理所用。     

超声引导下斜仰卧截石位微通道经皮肾输尿管镜碎石取石术临床分析

目的探讨超声引导下斜仰卧截石位微通道经皮肾输尿管镜碎石取石术的疗效和安全性。方法分析超声引导下斜仰卧截石位经皮肾输尿管镜碎石取石治疗上尿路结石56例的临床资料,男38例,女18例,平均（44±16.7）（23～70）岁;输尿管上段结石10例,肾结石46例（包括单个肾盂结石26侧、多发结石16侧、铸形结石11侧）。结果全部成功获得经皮肾穿刺通道。手术时间60～190min,平均（98±40.1）min。输尿管上段结石10例单次清除率100%;肾结石单次结石清除率71.70%,结石总清除率为92.45%;平均出血量（125±44.5）mL,术中术后均无输血;无胸膜、腹腔脏器、结肠损伤。结论超声引导下斜仰卧截石位微通道经皮肾输尿管镜碎石取石术中患者舒适、安全,可较好耐受手术,结石清除率较高,可同时处理各种异常情况,值得临床推广应用。     

输尿管双J管在泌尿系疾病中的应用及亚甲蓝在置管时的辅助作用

目的 分析泌尿系疾病中输尿管双J管的应用及亚甲蓝在开放手术置双J管时的辅助作用.方法 326例患者分别采用3种途径(开放手术置入法74例、膀胱镜逆行置入法121例、肾镜/输尿管镜顺行置入法131例)内置双J管,67例开放手术以亚甲蓝辅助下放置双J管.结果 术后1～3个月膀胱镜下拔除双J管,随访患者吻合口通畅,肾积水、肾功能明显好转.部分患者长期留置、定期更换双J管.以亚甲蓝辅助置管者无一例出现拔管困难.结论 泌尿系疾病应用输尿管双J管内引流效果好、操作简单、并发症少,亚甲蓝协助开放手术中双J管放置安全有效.     

nm23基因在乳腺癌的表达及其临床价值

目的　探讨nm2 3表达水平对判断乳腺癌生物学行为和预后的临床价值。方法　采用免疫组织化学S P法 ,检测石腊包埋 4 2例乳腺癌组织和 4 0例乳腺囊性增生症中nm2 3蛋白的表达水平。结果　nm2 3表达与年龄、肿瘤大小、绝经前后、ER、术后复发、组织分级和临床分期无相关性 ;nm2 3高表达与腋淋巴结转移情况有显著负相关性 ,nm2 3高表达与患者远处转移有显著负相关性 ,与生存率呈正相关。全组 5年生存率为 6 4 30 %。在腋淋巴结阴性、nm2 3高表达的 15例中 ,5年生存率达86 6 7% (13/ 15例 ) ,仅 4例出现术后远处转移 ,3例出现术后复发。结论　检测nm2 3的表达可作为乳腺癌生物学行为和预后的指标。     

HSV-tk和H60基因重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的：构建携带自杀基因HSV-tk和免疫相关基因H60的逆转录病毒载体pIRKS-H60、pIRES-TK和pTK-IRES-H60。方法;以质粒pUC19-H60为模板,用PCR方法扩增H60基因,并亚克隆至pMD18-T载体,构建中介载体pMD18-H60。双酶切质粒pMD18-H60和tgCMV／HyTK,获得H60和TK基因片段,再克隆至逆转录载体pIRES,构建重组载体pIRES-H60和pIRES-TK。然后把HS0基因片段克隆至载体pIRES-TK,构建重组载体pTK-IRES-H60。转染重组载体至包装细胞PA317进行病毒包装,用病毒液感染NIH3T3细胞,检测病毒液的滴度。结果：测序结果显示PCR扩增的H60基因序列正确,重组载体经PCR和酶切鉴定得到相应的基因片段。经筛选得到稳定的产病毒细胞株PA317／pIRES-H60、PA317／pIRES-TK和PA317／pTK-IRES-H60,病毒滴度分别为8×10^4、1×10^5、7．1×10^4cfu／mL。结论：成功构建逆转录病毒载体pIRES-H60、pIRES-TK和pTK-IRES-H60,建立了稳定的病毒细胞株,所产生的假病毒颗粒具备一定的感染力。