用聚合酶链反应技术诊断结核病

用聚合酶链反应技术对结核杆菌特异性重复序列ＩＳ６１１０部分基因１２３ｂＰ的片段进行扩增。该法检测人型结核杆菌灵敏度可达到１０ｆｇＤＮＡ，对１４９份结核患者临床标本检测结果显示ＰＣＲ总阳性率（６９．１％）明显高于直接涂片荧光镜检（１５．４％）与细菌培养（１０．１％）的阳性率（Ｐ＜０．０１）。研究表明ＰＣＲ是一种特异、敏感、快速诊断结核病的好方法，值得推广。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型与消化性溃疡的关系

消化性溃疡（ＰＵ）的病因和发病机制尚未完全明了．近年来，有人认为ＨＳＶⅠ与ＰＵ可能有关［１－３］，我们合成了一对ＤＮＡ聚合酶序列中的特异性引物，应用ＰＣＲ技术检测ＰＵ患者及正常人的胃和十二指肠粘膜中ＨＳＶⅠＤＮＡ，试图了解ＨＳＶⅠ与ＰＵ的关系．１　材料和方法１．１　材料　有复发性口唇疱疹病史及其他ＨＳＶⅠ感染者不纳入本试验．入选病例年龄为１８岁～６５岁．复合性溃疡不入选．对照组３０例，均为健康成人，男１５例，女１５例，平均年龄３２－５岁．内镜检查胃和十二指肠粘膜正常，于胃窦小弯侧（ＧＮｏ…     

PCR法在疱疹病毒性脑炎诊断及疗效观察中的应用

选择疱疹病毒科病毒ＤＮＡ多聚酶基因高保守区中的一对引物，一次ＰＣＲ可同时扩增疱疹病毒科的４种病毒［单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ１）、单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ２）、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）、及巨细胞病毒（ＣＭＶ）］相应的ＤＮＡ片段。根据扩增产物分子的大小及对扩增产物酶切分析，可将标本中的４种病毒准确分型。用该法检测临床疑为病毒脑炎患者和其他中枢神经系统疾病患者（对照组）的脑脊液（ＣＳＦ），脑炎组ＣＳＦ阳性率３０％（９／３０），对照组ＣＳＦ阳性率６．７％（２／３０）；其中８例为ＨＳＶ１阳性，２例为ＣＭＶ阳性，１例为ＨＳＶ２阳性。２例病毒脑炎患者经用无环鸟苷抗病毒治疗７～１０ｄ后其ＣＳＦ中的ＨＳＶ１ＤＮＡ由阳转阴。由此说明ＰＣＲ法不仅可早期诊断疱疹病毒性脑炎，还可显示抗病毒药物的疗效。     

疱疹病毒和人微小病毒B19与胎儿畸形的相关性研究

我们利用畸胎和因母亲疾病引产的胎儿，对其不同组织进行疮疹病毒和Ｂ１９基因检测，旨在研究其与胎儿畸形的相关性。一、对象和方法１．标本来源：１９例畸形胎儿和１８例因母亲疾病引产胎儿（由贵阳医学院附属医院和贵州省人民医院等单位提供）。在无菌操作条件下，分别取胎儿肝、脾、脑组织适量（用１ｍｌＨａｎｋｓ液反复冲洗无脑儿脑膜腔后收集洗液作为脑标本）。－３０℃保存。２．主要试剂：Ｔａｑ－ＤＮＡ聚合酶、ｄＮＴＰ、蛋白酶Ｋ、ＲＮＡ酶，ＢａｍＨＩ限制性内切酶、琼脂糖购自华美生物工程公司，其他为国产分析纯试剂。３．毒…     

临床标本单纯疱疹病毒1型感染的PCR诊断及分析

临床标本单纯疱疹病毒１型感染的ＰＣＲ诊断及分析卓礼梅，徐帆，陈火胜单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ１）是单纯疱疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）、单纯疱疹病毒性角膜炎（ＨＳＫ）等疾病的病原体。ＨＳＥ未经治疗死亡率高达７０％，ＨＳＫ的发病率在国内约占角膜病门诊的５０％，是...     

应用聚合酶链式反应和原位杂交方法检测胎儿组织中人微小病毒B19核酸序列

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法检测了７例胎儿的１２份组织标本，在４份脑组织和１份脾组织中扩增出７００ｂｐ片段，经酶切鉴定证明其为特异性片段。用地高辛标记的人微小病毒Ｂ１９（ＰＶＢ１９）ＤＮＡ探针对ＰＣＲ检测阳性标本进行原位杂交，在２份脑组织和１份脾组织中检出了ＰＶＢ１９ＤＮＡ阳性颗粒，ＰＣＲ和原位杂交方法结合应用可为胎儿ＰＶＢ１９感染的病原学诊断和致病机理的研究提供一套持异、敏感和准确的实验方法。     

新生儿轮状病毒无症状感染的聚合酶链反应研究

选用与 A 组人类轮状病毒(Human Romvirus,HRV)编码 VP7蛋白的第9基因(或8)两个保守序列互补的引物,建立检测 A 组 HRV dsRNA 的聚合酶链反应技术,扩增产物片段约342bp。经逆转录—聚合酶链反应(RT—PCT)检测18例无腹泻症状新生儿89份粪便标本,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法进行比较,结果前者检出 HRV 核酸54份(60.7%),而后者则检出35份(39.3%),PCR 结果可能比较接近新生儿排泌轮状病毒的实际情况。     

新生儿轮状病毒无症状感染的聚合酶链反应研究

选用与 A 组人类轮状病毒(Human Romvirus,HRV)编码 VP7蛋白的第9基因(或8)两个保守序列互补的引物,建立检测 A 组 HRV dsRNA 的聚合酶链反应技术,扩增产物片段约342bp。经逆转录—聚合酶链反应(RT—PCT)检测18例无腹泻症状新生儿89份粪便标本,并与聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法进行比较,结果前者检出 HRV 核酸54份(60.7%),而后者则检出35份(39.3%),PCR 结果可能比较接近新生儿排泌轮状病毒的实际情况。     

琼脂糖电泳法检测轮状病毒RNA

琼脂糖电泳法检测轮状病毒ＲＮＡ卓礼梅，严泳楷（中山医科大学微生物学教研室，５１００８９）４０～５０％需住院治疗的婴幼儿急性胃肠炎病例与轮状病毒感染有关〔１，２〕，因此轮状病毒感染的诊断极为重要。常用的方法有电镜法、酶联免疫吸附试验和聚而烯酰胺凝胶电泳...