胚胎及骨髓间充质干细胞增殖活性与成脂分化能力的比较

背景：间充质干细胞最先在骨髓中发现,且骨髓间充质干细胞的相关研究也最多,但是骨髓间充质干细胞来源有限且含量极低。近年来,已经从人胚胎组织分离出间充质干细胞,其与骨髓间充质干细胞在生物学特性上有很多相似之处,但是二者的成脂诱导能力比较尚无明确报道。目的：比较人胚胎组织与骨髓来源间充质干细胞体外增殖能力及成脂诱导能力。方法：采用全骨髓法获得骨髓间充质干细胞,胶原酶消化法获得胚胎组织间充质干细胞。流式细胞术鉴定两种间充质干细胞表面分子标记。用细胞计数方法检测两种间充质干细胞增殖能力。分别向两种细胞培养体系中加入成脂诱导剂诱导14d,经油红O染色后观察并计数,计算不同来源间充质干细胞的成脂诱导分化率。结果与结论：从两种不同组织中均可获取梭形贴壁的间充质干细胞,表面标记物CD44、CD73、CD90和CDl05均呈阳性表达,CDl4、CD34和CD45均为阴性表达;胚胎组织间充质干细胞的增殖能力明显强于骨髓间充质干细胞（P〈0．01）。胚胎组织间充质干细胞和骨髓间充质干细胞经过成脂诱导液诱导14d后,油红O染色结果均为阳性,但是骨髓间充质干细胞体外成脂能力明显强于胚胎组织间充质干细胞（P〈0．01）。     

胎盘间充质干细胞传代后的增殖能力

背景：胎盘间充质干细胞的增殖能力比骨髓间充质干细胞增殖能力强,但是否每个代次胎盘间充质干细胞的增殖能力都相同尚无定论。目的：分析不同代次胎盘间充质干细胞的增殖能力。方法：采用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞,并利用流式细胞仪检测干细胞表面标志物,并进行成脂成骨诱导分化。采用细胞计数和BrdU方法检测细胞的增殖能力,根据倍增时间公式计算倍增时间,并进行长期传代。结果与结论：胎盘间充质干细胞阳性表达CD44、CD90和CDl05,阴性表达CDl4、CD34和CD45;成脂诱导21d后油红O染色镜下可见红色脂肪滴,成骨诱导35d茜素红染色镜下可见钙盐结节。细胞从第1代开始计数,直到第15代共获得3．5×10^11个细胞。P5代比P10和P15代胎盘间充质干细胞的增殖能力强,倍增时间短。长期传代,胎盘间充质干细胞传代到第25代时,其中3例标本细胞形态完全发生改变,呈铺路石样;另外2例标本几乎无贴壁细胞。提示胎盘间充质干细胞可以长期传代到第25代,不同代次的胎盘间充质干细胞增殖能力不同,P5代增殖能力明显高于P10和P15代,临床应用应以P5代之前为宜。     

乳腺癌患者手术前后T淋巴细胞亚群变化的实验研究

肿瘤免疫学在近年来的肿瘤研究中起到主导地位,淋巴细胞作为机体免疫调节的重要组成成分,与肿瘤的发生发展具有密切关系。淋巴细胞亚群分析是当今机体免疫功能分析的重要手段。     

苦豆子生物碱的提取方法

生物碱是一类广泛存在于植物中的含氮化合物,是许多药用植物的有效成分之一,其药用价值已经受到人们的广泛关注,生物碱的提取方法也在不断地改进和发展中.本文以苦豆子为研究对象,综述了近年来不同方法在苦豆子生物碱提取中的应用和进展,并作了适当改进,旨在为以后进一步研究苦豆子生物碱提供借鉴.     

5种血浆游离DNA提取方法的比较

目的分别应用5种方法进行血浆游离DNA的提取,从而判定与筛选最佳的血浆cfDNA提取方法。方法采集19例健康人血浆标本,针对每一样本取350ml血浆分别应用经1次／2次酚-氯仿-异戊醇抽提法,经1次／2次酚-氯仿-异戊醇抽提配合微量DNA助沉剂法和介孔纳米磁珠法5种方法进行cfDNA提取,应用紫外分光法测定提取cfDNA的含量与纯度,应用实时荧光定量PCR方法以提取血浆cfDNA为模板进行扩增反应,以验证提取效果。结果应用5种方法从19例350ml血浆样本中提取的血浆cfDNA含量分别为（6971．43±1934．40）ng／ml、（2196．86±823．94）ng／ml、（12397．14±4197．37）ng／ml、（5568．29±1618．17）ng／ml和（7458．57±3706．83）ng／ml,A260／A280值分另0为0．93±0．07、1．09±0．12、1．15±0．05、1．16±0．12和0．89±0．19,RT-qPCR扩增成“功率为100％。结论经1次酚-氯仿-异戊醇配合微量DNA助沉剂法提取量大,纯度高,所提取的血浆cfDNA可以为RT-qPCR提供模板,进行后续实验。     

山茱萸多糖提取纯化方法及药理作用研究进展

<正>山茱萸又叫石枣、药枣,为山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc)干燥成熟果肉,具有补益肝肾、涩精固脱的功效。本文着重就山茱萸多糖的提取纯化方法及山茱萸多糖的药理作用作一综述。1山茱萸多糖的提取纯化方法及最佳的提取工艺1.1传统提取纯化方法主要采取热水、超声和乙醇沉淀等。李平等〔1〕将热水抽提后的山茱萸残渣用碱提取后,经过中和、     

胚胎及骨髓间充质干细胞增殖活性与成脂分化能力的比较

背景：间充质干细胞最先在骨髓中发现,且骨髓间充质干细胞的相关研究也最多,但是骨髓间充质干细胞来源有限且含量极低。近年来,已经从人胚胎组织分离出间充质干细胞,其与骨髓间充质干细胞在生物学特性上有很多相似之处,但是二者的成脂诱导能力比较尚无明确报道。 目的：比较人胚胎组织与骨髓来源间充质干细胞体外增殖能力及成脂诱导能力。 方法：采用全骨髓法获得骨髓间充质干细胞,胶原酶消化法获得胚胎组织间充质干细胞。流式细胞术鉴定两种间充质干细胞表面分子标记。用细胞计数方法检测两种间充质干细胞增殖能力。分别向两种细胞培养体系中加入成脂诱导剂诱导14 d,经油红O染色后观察并计数,计算不同来源间充质干细胞的成脂诱导分化率。 结果与结论：从两种不同组织中均可获取梭形贴壁的间充质干细胞,表面标记物CD44、CD73、CD90和CD105均呈阳性表达,CD14、CD34和CD45均为阴性表达;胚胎组织间充质干细胞的增殖能力明显强于骨髓间充质干细胞(P < 0.01)。胚胎组织间充质干细胞和骨髓间充质干细胞经过成脂诱导液诱导14 d后,油红O染色结果均为阳性,但是骨髓间充质干细胞体外成脂能力明显强于胚胎组织间充质干细胞(P < 0.01)。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：