生物化学实验教学改革初探

介绍了对生物化学实验教学内容、教学方法及考核方式进行的改革探索和实践,在实验教学中实施了开放性实验,有效地培养了学生主动学习的积极性,提高了实验教学效果。     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因的原核表达及抗体制备

目的 进行人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)基因原核表达裁体的构建,获得高纯度的心肌肌钙蛋白I并制备相应的多克隆抗体.方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段,将其插入原核表达载体形成重组体并导入宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达出带6个组氨酸标签的融合蛋白,Ni-NTA树脂纯化,纯化后的融合蛋白免疫小鼠,制备抗血清.通过ELISA,Western blot鉴定血清效价和特异性.结果 成功构建了cTnI的原核表达载体,并在大肠埃希菌中获得了高效表达.Western blot检测证实获得了抗cTnI抗体.结论 成功表达了cTnI蛋白并制备了其特异性抗体.     

Sysmex UF-500i全自动尿沉渣分析仪故障及排除

0引言我院2008年引进了一台Sysmex UF-500i全自动尿沉渣分析仪,该仪器能在1 h内分析约60份样本[1]。由于其速度快、重复性好,省去了繁琐的离心镜检工作,目前已广泛应用于检验科中[2]。但随着仪器使用时间的延长,仪器故障越来越多,且有些故障较为少见。现将遇到的故障排除过程总结如下,供同行参考。1故障一1.1故障现象仪器报警信息"溢出",分析仪停止工作。     

对氨基酸纸层析实验的改进

目的 对传统的"氨基酸纸层析"实验进行改进,力求寻找一种无毒的展层剂,且操作更简便的实验方法.方法 利用不同浓度的乙醇溶液对混合氨基酸进行分离,与水饱和苯酚的分离效果进行比较.结果 3种不同浓度的乙醇展层剂均可将混合氨基酸分离,但75%的乙醇分离混合氨基酸效果最好;且将茚三酮溶于展层剂中显色比先展开再显色的效果更好.结...     

人心肌肌钙蛋白I基因的原核表达及抗体制备

目的进行人心肌肌钙蛋白I（cardiac troponinI，cTnI）基因原核表达载体的构建，获得高纯度的心肌肌钙蛋白I并制备相应的多克隆抗体。方法利用RT—PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段，将其插入原核表达载体形成重组体并导入宿主菌BL21（DE3）中，经IPTG诱导，表达出带6个组氨酸标签的融合蛋白，Ni—NTA树脂纯化，纯化后的融合蛋白免疫小鼠，制备抗血清。通过ELISA，Western blot鉴定血清效价和特异性。结果成功构建了cTnI的原核表达载体，并在大肠埃希菌中荻得了高效表达。Western blot检测证实获得了抗cTnI抗体。结论成功表达了cTnI蛋白并制备了其特异性抗体。