间接免疫荧光法与线性免疫印迹法联合检测抗核抗体的意义

目的 分析以间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF) 筛查的抗核抗体(antinuclear antibody,ANA) 结果与线性免疫印迹法检测抗核抗体谱(ANAs)结果的不一致性,分析二者的相互关系.方法 分别采用IIF和LIA两种方法检测抗核抗体,将IIF-ANA阳性/LIA-ANAs 阴性和IIF-ANA阴性/LIA-ANAs 阳性患者分为自身免疫性疾病(AID) 组和非AID组进行比较分析.结果 189份标本中,IIF (+)/LIA 阴性(-)105份,占55.56%;IIF (-)/LIA(+)84份,占44.44%..LIA+标本中,抗核糖核蛋白/史密斯抗原(nRNP/Sm)、抗史密斯抗原(Sm)、抗干燥综合征抗原A(SS-A)、抗Ro-52、抗干燥综合征抗原B(SS-B)、抗scl-70抗原、抗11-16多肽复合体抗原(PM-scl)抗组氨酰tRNA 合成酶抗原(Jo-1) 抗体、抗着丝点抗体B亚型、抗可增殖抗原抗体、抗组蛋白抗体和抗线粒体抗体M2 亚型(AMA-M2)的阳性率分别为1.02%～27.55%.AID组及非AID组IIF-ANA阳性者荧光滴度分布均以1:100～1:320为主;荧光滴度为≥1:1000时,2组间的差异有统计学意义(P＜0.05);AID组中IIF(+)/LIA(-)的荧光模式以细胞核均质型(H)为主,与非AID组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);而非AID组的荧光模式以细胞核斑点型(S)为主,与AID组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IIF 筛查ANA容易导致AID患者部分具有重要临床意义的ANA特异性抗体漏检,而ANA特异性抗体检测因其测定的抗体数量有限也容易导致AID患者的ANA漏检.IIFANA筛查和LIA-ANAs 特异性抗体检测不能相互代替,对需要通过检测ANA来排除AID的患者标本应同时进行IIF-ANA筛查和ANAs 特异性抗体的检测,以避免仅采用1 种方法进行检测时导致的AID患者漏诊.     

贵阳地区成人外周血淋巴细胞亚群及活化正常参考值

目的：对贵阳地区100例健康成人外周血淋巴细胞亚群及活化正常参考值进行调查并建立本实验室相应项目的正常参考范围。方法：采用BD Simultest IMK-Lymphocyte四色试剂盒的荧光抗体和BD活化双色试剂对100例体检健康的成人外周血进行染色,以FACSAria流式细胞仪进行分析,FACSDiva Software软件程序获取数据并分析结果,SPSS软件进行统计。结果：18～64岁健康成人的淋巴细胞亚群相对值正常参考范围为：CD3^＋细胞（总T淋巴细胞）为49．41％～79．93％,CD3^＋CD19^＋细胞（B淋巴细胞）为2．09％～16．05％,CD3^＋CD4^＋细胞（Th淋巴细胞）为19．56％～45．03％,CD3^＋CD8^＋细胞（Ts淋巴细胞）为11．96％-38．40％,CD3^＋／CD16^＋CD56^＋细胞（NK细胞）为0．19％～32．05％;活化的CD3^＋细胞的相对值为0％～7．33％,活化的CD8^＋细胞的相对值为0％～5．63％。女性Th淋巴细胞、活化的CD8^＋细胞相对值比男性高（P〈0．05）。结论：不同地域、不同种族健康成人外周血淋巴细胞亚群正常参考值有所不同,各实验室应建立针对本地区人群的相应参考值范围。     

Ⅰ型干扰素通路IRF5 基因多态性与系统性红斑狼疮的关联性研究

目的:研究玉型干扰素通路IRF5 基因rs2004640、rs10954213、rs4728142 位点的单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮易感性之间的关联。方法: 运用Taqman 荧光定量PCR 检测218 例SLE 患者及200 例健康对照者IRF5 基因rs10954213、rs4728142、rs2004640 位点基因型,计算等位基因频率,分析其与SLE 的关系;用IIF 法和LIA 法测定218 例SLE 患者血浆中抗核抗体、抗双链DNA 抗体和特异性抗体,并分析其与IRF5 rs2004640、rs10954213 位点基因频率的关系。结果:IRF5 rs2004640 位点等位基因T 频率分布SLE 组高于对照组,差异有统计学意义(字2 =6.809,P =0.009),基因型GG/ TT 分布在两组差异有统计学意义(字2 =5.111,P =0.024,);IRF5 rs10954213 位点等位基因G 频率分布在SLE 组高于对照组,差异有统计学意义(字2 =4.332,P =0.037);基因型GG 在两组的分布差异有统计学意义(字2 =5.805,P =0.016);IRF5 rs4728142 位点等位基因频率及基因型,两组比较差异无统计学意义。SLE 组IRF5 rs2004640 位点等位基因T 和抗Sm 抗体、抗Rib-P 抗体相关(字2 =8.512、4.057;P =0.005、0.048)。218 例SLE 患者中活动期患者特异性抗体主要以Anti-NUC、Anti-His、Ant-Rib-P 为主,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IRF5 基因rs2004640、rs10954213 基因位点单核苷酸多态性与SLE 易感性相关,rs4728142 基因位点单核苷酸多态与SLE 易感性不相关;IRF5 rs2004640 T 等位基因和抗Sm 抗体、Anti-Rib-P 抗体相关,SLE 活动期患者特异性抗体主要以抗ds-DNA 抗体、抗NUC 抗体、抗His 抗体、抗Rib-P 抗体为主。     

不同乳腺癌细胞系中TLR5 和NLRC4 受体的表达和定位

目的:探究TLR5 和NLRC4 受体在不同乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF-7 和MDA-MB-435 中的表达和定位情况,并探讨重组鞭毛素蛋白对乳腺癌细胞TLR5 受体的激活情况。方法:利用Real-time PCR 法检测MDA-MB-231、MCF-7 和MDA-MB-435 细胞TLR5 和NLRC4 mRNA 表达水平,用流式细胞仪检测MDA-MB-231、MCF-7 细胞TLR5 受体的表达和定位。纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白FliC(同时激活TLR5 和NLRC4 两条通路)、FliC驻90-97(不能激活TLR5 通路)、FliC-L3A(不能激活NLRC4 通路)、FliC驻90-97:L3A(两条通路都不激活)。用1 g/ ml 重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7 细胞,12 h 后,ELISA 法检测IL-8 的分泌。结果:MCF-7 细胞TLR5 mRNA 表达水平最高,约是MDA-MB-435 细胞的1 700 倍,MDA-MB-231细胞TLR5 表达水平是MDA-MB-435 的约200 倍。TLR5 在MCF-7 细胞浆和胞膜上均有表达,而MDA-MB-231 细胞只在胞浆中表达。激活TLR5 通路的FliC 和FliC-L3A 能够刺激MCF-7 细胞分泌IL-8,而不激活TLR5 通路的FliC 90-97 和FliC 90-97:L3A 则不能。结论:不同乳腺癌细胞系都表达TLR5 和NLRC4,但是表达部位和表达水平不同。MCF-7 细胞TLR5 和NLRC4 表达高于其他乳腺癌细胞系。乳腺癌细胞系表面的TLR5 受体可以被鞭毛素蛋白激活,为进一步探讨TLR5 通路的激活在乳腺癌细胞增殖中的作用提供实验基础。     

IRF2基因 rs13146124位点多态性与系统性红斑狼疮的关联性研究

目的：探讨Ⅰ型干扰素通路中干扰素调节因子2（IRF2）基因rs13146124位点单核苷酸多态性（SNP）与系统性红斑狼疮（SLE）易感性之间的关联。方法采用Taqman实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）分析技术检测366例SLE患者、218例健康对照者IRF2基因rs13146124位点多态性,计算和分析基因型和等位基因频率。结果 SLE患者 IRF2 rs13146124位点AA、AG、GG基因型频率分别为0．011、0．246、0．743,与对照组间差异无统计学意义（χ2值分别为0．093、0．205、0．136;P值分别为0．761、0．651、0．712）;SLE患者IRF2 rs13146124位点A、G等位基因的频率分别为0．13、0．87,与对照组间差异无统计学意义（χ2＝0．071,P＝0．790）。IRF2 rs13146124位点等位基因A和G与抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（dsDNA）等特异性抗体之间差异无统计学意义（P＞0．05）。IRF2 rs13146124位点的等位基因与关节炎、肾损伤等临床特征无相关关系。结论 IRF2 rs13146124基因位点的多态性可能与贵州人群SLE的易感性无关。     

自发性早产母胎界面子宫自然杀伤细胞亚群及T淋巴细胞亚群变化的研究

目的:研究不明原因早产发生时,母胎界面中自然杀伤细胞亚群及T淋巴细胞亚群的变化,探讨早产发生机制.方法:采用流式细胞技术,分别检测足月妊娠分娩孕妇30例(正常妊娠组)和不明原因孕周满28周至不满37周无医学指针终止妊娠的孕妇30例(早产组)母胎界面底蜕膜组织中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD56+CD16+NK细胞百分比、Th1及Th2细胞的百分比.结果:①早产组患者CD4+T细胞、CD56+CD16+NK细胞百分比明显高于正常妊娠组(P<0.05),CD8+T细胞百分比明显低于正常妊娠组(P<0.05);②早产组Th1细胞、Th1/Th2比例明显高于正常妊娠组(P<0.01).结论:母胎界面局部T淋巴细胞亚群、子宫自然杀伤细胞百分比的改变及Th11细胞增多与不明原因自发性早产相关.     

进展性脑梗死的细胞因子研究

目的 探讨进展性脑梗死与细胞因子的关系.方法 从2007-02-2012-02我院收治的进展性脑梗死患者中随机选择240例作为进展性脑梗死组,选择同期一般血栓性脑梗死患者254例作为一般脑梗死组,另外随机选取同期来我院体检中心接受体检的健康者280例作为对照组.结果 当患者出现进展性脑梗死时,血清IL-6、IL-8等细胞因子的水平会明显上升,并随着时间的发展出现不同的动态变化.结论 了解细胞因子在脑梗死发病中的水平变化和具体作用,有助于发现脑梗死的发病机制,寻找有效的临床干预办法.     

应用YAG型美肤治疗仪治疗太田痣及失败性文眉、文眼线、文身的疗效观察

2001年至2005年应用YAG型美肤治疗仪治疗太田痣、失败性文眉、文眼线、文身(外伤性文身),共253例,均取得比较满意的治疗效果,现报告如下。1资料与方法1.1临床资料太田痣:102例,其中男性患者26例,女性患者76例,年龄18～60岁,面积10～100cm2不等,颜色均为褐色或深褐色,分布呈片状或点状。失败性文眉、文眼线、文身(包括外伤性文身)共151例,男性患者52例,女性患者99例。1.2治疗参数采用Medlite二波段治疗仪。输出波长1064mm,脉冲宽10ns。使用光斑2～3mm2,频率2.5～10HZ,能量密度3.7～7.5J/cm2。1.3治疗方法治疗前,嘱患者清洗治疗部位的脏物…     

5695例孕中期唐氏综合征血清学筛查结果的分析

目的 通过分析5 695例孕中期妇女的血清学筛查结果,探讨贵州地区孕中期妇女唐氏筛查的意义.方法 对贵州地区孕14周～20+6周的孕妇进行产前血清AFP和总β-hCG浓度的检测,结合孕周、年龄、体质量等因素进行风险评估.对高风险者行羊水细胞染色体分析.结果 5 695例孕妇筛查出唐氏综合征高风险249例,检出率4.37%;经染色体核型检查84例,确诊异常6例,阳性率7.14%.本次研究汉族唐氏综合征阳性率为4.1%(188/4 663);少数民族为4.6%(47/1 032),两者比较差异无统计学意义(P>0.05).≥35岁的孕妇唐氏综合征阳性率(28.8%)明显高于年龄低于35岁的孕妇(5.1%),差异有统计学意义(P<0.05).孕妇的孕周、体质量及年龄与血清AFP和总β-hCG浓度有相关性(P<0.01).结论 唐氏筛查的结果和孕妇的年龄、孕周、体质量及是否吸烟均有关系.因此要准确地收集患者的资料,以取得可靠的评估结果.     

男性尿道分泌物瑞氏染色法快速检测淋球菌分析

淋病是国内外常见的性传播疾病（Sexual transfer disease,STD）之一,由淋病奈瑟氏菌（Neisseria gonorrhoeae,NG,简称淋球菌）感染所致,多数医院门诊就诊病人主要通过生殖道分泌物直接涂片革兰氏染色法查找淋球菌进行确诊,我们采用瑞氏快速染色法检测男性尿道分泌物淋球菌,并和革兰氏染色法结果进行了比较,现总结分析如下。