慢病毒介导的RNA干扰HMGA2基因表达对HL-60细胞增殖及细胞周期素B2、A2表达的影响

目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默高迁移率族蛋白A2(HMGA2)基因表达对人急性白血病细胞系HL-60细胞增殖及细胞周期素(cyclin) B2、cyclin A2表达的影响.方法 制备表达HMGA2基因短发夹RNA(shRNA)的重组慢病毒载体,转染HL-60细胞.通过半定量RT-PCR和Western blot检测特异性shRNA转染后HL-60细胞HMGA2基因表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术(FCM)检测细胞周期; RT-PCR及Western blot检测cyclin B2、cyclin A2 mRNA和蛋白表达水平.结果 RT-PCR和测序证实,成功构建了表达HMGA2 shRNA的重组慢病毒载体;RT-PCR和Western blot证实经嘌呤霉素筛选出的阳性克隆转染的HL-60细胞HMGA2 mRNA和蛋白表达水平与空载体组相比明显受抑,抑制率分别达(80.66 ± 7.98)%和(76.35±12.72)%;CCK-8比色结果显示,HMGA2表达受到稳定干扰的HL-60细胞增殖活力明显受到抑制,细胞增殖曲线低平,缺乏指数增殖特征.FCM检测显示,与对照组相比,转染特异性shRNA的HL-60细胞出现了明显的G2/M期阻滞,G2/M期细胞分别为(13.90±4.07)%和(30.00±5.78)%(P<0.05).HMGA2特异性shRNA转染的HL-60细胞cyclin B2 mRNA和蛋白表达与未转染细胞相比,抑制率分别为(67.55±7.69)%和(51.77±4.81)%(P<0.01).而cyclin A2的表达无明显改变.结论 HMGA2基因沉默可下调cyclin B2表达,从而使细胞出现明显的增殖抑制和G2/M期阻滞.     

142例消化道恶性肿瘤患者红细胞分布宽度分析

目的:研究消化道恶性肿瘤患者红细胞分布宽度(RDW)的特点,探讨其与预后的关系。方法:分析近3年收治的142例消化道肿瘤患者RDW-CV值的特点,研究其与贫血严重度、肿瘤TNM分期、患者Karnofsky评分以及低蛋白血症之间的关系。结果:伴有贫血的消化道恶性肿瘤患者的RDW-CV值明显高于无贫血患者,且与贫血程度呈正相关,肿瘤分期为Ⅲ+Ⅳ期或伴有低蛋白血症患者的RDW-CV值明显高于Ⅰ+Ⅱ期或血清白蛋白水平正常的患者,而RDW-CV值与患者的KPS评分无关。结论:消化道恶性肿瘤患者的RDW-CV值与患者的贫血程度、肿瘤TNM分期以及是否伴有低蛋白血症有关,可间接预测患者的预后。     

干扰HMGA2基因表达抑制HL60细胞的增殖及浸润

目的:探索干扰高迁移率族蛋白A2(high mobility group protein A2,HMGA2)基因的表达对HL-60白血病细胞体外增殖、浸润的影响.方法:实验分为3组,实验组为稳定转染慢病毒干扰HMGA2基因表达载体的HL-60细胞;阴性对照组为稳定转染慢病毒空载体HL-60细胞;空白对照组为未转染的HL60细胞.3组分别接种BALB/c裸鼠建立种植瘤模型,检测接种后各个时间点裸鼠外周血和骨髓中白血病细胞的比例(肿瘤负荷)、生活质量,计算接种40 d后各组小鼠的肝脾指数.结果:RT-PCR及Western印迹证明干扰RNA慢病毒表达载体可明显降低HL-60细胞靶基因的表达.接种后骨髓涂片结果显示裸鼠白血病模型成功建立.接种后21,28,40 d,实验组HL-60细胞在小鼠外周血和骨髓中的比例均明显低于阴性对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其白血病细胞比例随接种时间延长而增加的速度亦明显变缓;且实验组小鼠萎糜少动、腹部膨隆、皮下结节等并发症出现时间明显较空白对照组及阴性对照组延迟;接种40 d后实验组小鼠肝脾指数分别为66.76±5.56和20.57±0.75,均明显低于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:干扰HMGA2基因表达,可明显抑制HL60白血病细胞在小鼠体内增殖、浸润.     

伴t（3；3）急性髓系白血病一例分析并文献复习

 目的　分析伴t（3;3）急性髓性白血病（AML）的临床和实验室特征。方法　骨髓细胞24 h短期培养后按常规方法制备染色体,用热处理吉姆萨反带技术进行细胞遗传学分析。结果　1例M2患者其核型分析结果为t（3;3）异常,确诊为AML-M2a。应用标准诱导化疗后患者未获完全缓解。结论　t（3;3）是一种少见的核型异常,伴t（3;3）异常的急性髓系白血病治疗反应差,预后不良。     

2011年1月—2013年12月大连市甘井子区6岁以下儿童体格发育监测分析

目的了解该地区6岁以下儿童体格发育及营养状况,评价儿童保健工作效果。为今后儿童保健工作重点指明方向。方法对2011年1月—2013年12月期间在甘井子区卫生防治站(11个街道防治分站)门诊进行系统管理的6岁以下儿童,为其进行身高、体重测量及评价指导。结果 6岁以下儿童体格检查覆盖率及3岁以下儿童系统管理率每年均达到95%以上。2011年至2013年低体重、发育迟缓和消瘦的患病率逐年降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。肥胖的患病情况总体成下降趋势,2012年最低,2013年较2011年降低,但相对于2012年略有上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大连市甘井子区儿童保健工作成效显著,今后还应继续加强肥胖儿童的早期干预。     

伴t(16;21)(p11;q22)的恶性血液病的临床和实验分析

目的探讨伴t(16;21)(p11;q22)的恶性血液病的临床及实验室特征。方法骨髓细胞24 h培养后按常规方法制备染色体,用RHG显带技术进行细胞遗传学分析。结果 1例M2的患者其核型分析结果有t(16;21)(p11;q22)的异常,临床和血液学改变符合急性髓细胞白血病-M2a诊断,化疗后未获得完全缓解,中位生存期为6个月。结论 t(16;21)(p11;q22)是一类很独特的白血病亚型有关的易位,为少见的非随机的染色体易位,其临床预后差。     

二甲基亚砜诱导HL-60细胞分化的比较蛋白质组学研究

不同的诱导分化剂可诱导急性髓系白血病细胞系HL-60细胞向不同谱系的细胞分化[1].二甲基亚砜( DMSO)由于其溶解极性和非极性化合物能力极强而被广泛用作溶剂.目前,DMSO作为细胞低温保鲜剂(浓度一般在10％)可直接给患者注射[2].据最新报道,DMS0可通过活化转录因子促进成骨细胞分化[3].我们采用比较蛋白质组学方法,研究DMSO诱导HL-60细胞分化过程中蛋白质的差异表达,并探讨其可能的分子机制.     

预防或减少儿童预防接种的不良反应探讨

目的本文主要探讨如何预防或减少儿童预防接种的不良反应。方法选取我院于2012年7月至2013年7月期间接收的118例前来进行预防接种儿童的临床资料进行回顾性分析,观察儿童接种时所产生的不良反应,并做好统计工作。结果预防接种儿童的总不良反应数率为9例,其中局部反应4例,偶合反应2例、全身反应2例、异常反应1例。结论通过建立预防接种档案、提供优质的接种室以及做好宣传教育、饮食指导、接种前准备、接种后注意事项等方面的工作,才能有效降低儿童预防接种的不良反应发生率。