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1.
人脂联素球状结构域的表达、纯化和功能鉴定   总被引:1,自引:1,他引:1  
目的表达和纯化人脂联素(adiponectin,APN)球状结构域并观察其生物学活性.方法用PCR方法复制人脂联素球状结构域(globular domain of adiponectin,gAPN)的cDNA,并克隆于pET28a(+)原核表达载体中.将重组表达质粒pET28a(+)-gAPN转化大肠埃希菌BL21(DE3),37℃培养至A600达到0.6时,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达.细菌经超声破菌,得到粗提的包涵体洗涤变性后经镍柱亲和层析柱一步纯化,获得纯化的gAPN重组蛋白,复性后冻干保存.然后,用链佐星(streptozocin,STZ)诱导的小鼠高血糖模型检测其生物活性.结果IPTG诱导后有Mr约为17 000大小的目的蛋白表达,免疫印迹结果进一步表明,其具有人gAPN的抗原性.表达蛋白主要以包涵体形式存在,占菌体蛋白的30%以上,表达产物经变性、纯化、复性,可获得纯度90%以上的目的蛋白.该重组蛋白能够降低STZ诱导的小鼠高血糖模型的血糖水平.结论在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功表达了人gAPN蛋白,经变性、纯化、复性后得到具有生物学活性的蛋白.  相似文献   
2.
目的探讨开腹手术后不同浓度舒芬太尼混合罗哌卡因病人自控硬膜外镇痛(PCEA)的效果。方法选取45例择期开腹行胃部分切除或胆囊切除术的病人,ASAⅠ~Ⅲ级,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组(n=15),术后Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别用0.3、0.4、0.5μg/ml舒芬太尼混合0.125%甲磺酸罗哌卡因行PCEA,并分别于术后4、8、16、24、48 h记录脉搏血氧饱和度(SpO2)、呼吸频率(RR)、心率(HR)、有创平均动脉压(MAP)以及VAS评分、镇痛药液用量、PCA按压次数、镇静及副作用,计算PCA按压次数比值。结果术后48 h内,三组病人生命体征平稳、镇静良好、副作用(恶心、呕吐、皮肤瘙痒、胸闷等)发生率低,VAS评分Ⅲ组低于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05),PCA按压次数Ⅱ组少于Ⅰ组(P<0.05),Ⅲ组少于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05),镇痛药用量Ⅲ组少于Ⅰ、Ⅱ组。结论 0.5μg/ml舒芬太尼复合0.125%甲磺酸罗哌卡因用于开腹手术后病人的PCEA镇痛效果最好,并不增加用药量和副作用。  相似文献   
3.
目的表达和纯化人睫状神经营养因子(CNTF)并观察其生物学活性。方法用PCR方法构建人CNTF的结构基因,并克隆于pLy4原核表达载体中。将重组表达质粒pLy4-CNTF转化大肠埃希菌JF1125,30℃培养至A600(nm)达到0.6时,迅速升温至42℃诱导目的蛋白的表达。细菌经超声破胞,包涵体经变性、复性、透析和阴离子交换层析,获得纯化的CNTF重组蛋白。然后,用鸡胚背根神经节神经元细胞存活实验观察其生物活性。结果42℃诱导后可以获得Mr≈22.9×103的目的蛋白,Western印迹结果进一步表明,其具有人CNTF的抗原性。表达蛋白主要以不溶形式存在,占菌体蛋白的35%以上,表达产物经变性、复性,纯化后可获得纯度90%以上的目的蛋白。该重组蛋白能够促进鸡胚背根神经节神经元细胞的存活。结论在大肠埃希菌JF1125中成功表达了人CNTF分子,经变性、复性,纯化后得到具有生物活性的蛋白。  相似文献   
4.
目的探讨七氟烷吸入麻醉在脑性瘫患儿腰椎穿刺干细胞治疗中的临床效果及实用性。方法选取60例年龄1~6岁行腰椎穿刺干细胞治疗的脑性瘫患儿,ASAⅠ~Ⅱ级,分成两组(n=30),七氟烷组(Ⅰ组)和氯胺酮组(Ⅱ组),观察两组诱导和苏醒时间,诱导的依从性、术中体动和苏醒期躁动的发生率。结果与Ⅱ组比较,Ⅰ组能较好地接受诱导,诱导、苏醒时间较短,术中体动及苏醒期躁动发生率较低(P<0.05)。结论七氟烷吸入麻醉具有麻醉诱导时间短,苏醒快,不良反应少,能较好地应用于脑性瘫患儿腰椎穿刺干细胞治疗。  相似文献   
5.
目的:探讨冠状动脉慢血流现象(coronary slow flow phenomenon,CSFP)与血尿酸(UA)、同型半胱氨酸(Hcy)、红细胞压积(Hct)及红细胞分布宽度(RDW)的相关性。方法:对因胸闷、胸痛症状行冠状动脉造影术(coronary angiography,CAG)住院患者的病例资料进行回顾性分析,选择其中CAG显示心外膜冠状动脉无明显狭窄但存在CSFP的121例患者作为CSFP组(SCF组),另将CAG证实心外膜冠状动脉完全正常且血流正常的606例患者设为正常血流组(NCF组)。比较两组患者UA、Hcy、Hct及RDW的差异,并分析CSFP与上述指标、UA与其他生化指标间的相关性。结果:SCF组UA、Hcy、Hct水平均较NCF组升高(P0.001);两组RDW水平差异无统计学意义。条件Logistic回归分析发现,UA、Hcy、Hct均为CSFP的危险因素;Spearman相关及偏相关性分析示UA与Hcy正相关(P0.001)。结论:UA、Hcy、Hct是CSFP发生的危险因素,UA与Hcy可能协同促进CSFP的发生发展。  相似文献   
6.
目的:探究在双相情感障碍抑郁发作中应用拉莫三嗪的临床效果。方法:在我院2017年1月至2017年10月收治的120例处于急性抑郁发作的双相情感障患者中,选择60例作为对照组,治疗过程中服用碳酸锂;另选择60例作为研究组,在对照组的基础上联用拉莫三嗪。统计治疗前后两组患者的汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分差异。结果:经过治疗,研究组患者的HAMD评分显著低于对照组(P0.05)。结论:拉莫三嗪可有效改善双相情感障碍抑郁发作的患者的抑郁症状,具有较高的临床应用价值  相似文献   
7.
目的 研究地佐辛复合利多卡因和布比卡因用于臂丛神经阻滞的镇痛效果.方法选择上肢手术患者60例,ASA Ⅰ~Ⅱ级,随机分为两组,A组:5 mg地佐辛+1%利多卡因+25 mg布比卡因20 ml;B组1%利多卡因+25 mg布比卡因20 ml.分别记录两组麻醉起效时间、镇痛持续时间、感觉消失时间.同时用VAS评分评价镇痛效果.结果 A组镇痛持续时间明显长于B组(P<0.05).A组麻醉后3.5 h静息VAS评分显著低于B组(P<0.05).结论 地佐辛复合利多卡因和布比卡因用于臂丛神经阻滞能延长麻醉镇痛持续时间.  相似文献   
8.
目的:观察利妥昔单抗治疗系统性硬化病(SSc)的临床疗效及不良反应。方法:2016年11月至2020年5月就诊于上海瑞金医院风湿科8例接受利妥昔单抗治疗的SSc患者,按在0、2、4、24、48周予以利妥昔单抗治疗的方案给药,分别在治疗前、治疗4、24、48周评估患者的临床症状和实验室指标,采用SPSS 23.0软件进行...  相似文献   
9.
目的:抗合成酶综合征(ASS)是一种罕见的自身免疫病,本研究目的增加对该疾病的认识,减少漏诊率。方法:回顾分析8例原诊断为pSS后筛查抗合成酶抗体阳性患者的临床资料并进行描述性统计分析。结果:8例患者中全部病例诊断pSS符合2002年美欧共识小组提出的SS欧洲标准修订版或2016年ACR/EULAR SS分类标准,诊断...  相似文献   
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